| 中文摘要 | 第1-16页 |
| Abstract | 第16-20页 |
| 1 前言 | 第20-52页 |
| ·药物滥用和药物依赖的现状与发展趋势 | 第20-24页 |
| ·曲马多药理机制 | 第24-30页 |
| ·曲马多药理学特性 | 第24-25页 |
| ·曲马多药物代谢 | 第25-26页 |
| ·曲马多作用机制 | 第26-30页 |
| ·阿片类作用机制 | 第26-27页 |
| ·非阿片类作用机制 | 第27-29页 |
| ·其他作用机制 | 第29-30页 |
| ·曲马多引起的不良反应 | 第30页 |
| ·曲马多滥用和依赖性潜力研究 | 第30-45页 |
| ·曲马多依赖性潜力分析 | 第30-34页 |
| ·药物依赖产生机理及其治疗策略探索 | 第34-38页 |
| ·药物滥用引发的神经损伤和神经功能障碍 | 第38-45页 |
| ·药物滥用导致的氧化应激 | 第39-43页 |
| ·药物滥用引起的细胞凋亡 | 第43-45页 |
| ·药物滥用对神经发生的抑制作用 | 第45页 |
| ·蛋白质组学技术在药物滥用研究中的应用 | 第45-50页 |
| ·蛋白质组学质谱鉴定技术优化策略 | 第45-47页 |
| ·药物滥用的蛋白质组学研究及其进展 | 第47-49页 |
| ·斑马鱼——药物依赖研究新模型 | 第49-50页 |
| ·本论文研究意义和目的 | 第50-52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-75页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·仪器与试剂 | 第52-54页 |
| ·主要仪器设备 | 第52-53页 |
| ·主要试剂 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-75页 |
| ·斑马鱼行为学观察 | 第54-55页 |
| ·曲马多原药及去甲基曲马多代谢物的质谱分析 | 第55-58页 |
| ·曲马多原药的GC/MS和ESI-Q-TOF/MS法分析 | 第55-56页 |
| ·脑组织中去甲基曲马多代谢物的分析 | 第56-57页 |
| ·ESI-Q-TOF/MS分析条件 | 第57页 |
| ·GC/MS分析条件 | 第57-58页 |
| ·脂质过氧化物含量和SOD酶活性的分析 | 第58-61页 |
| ·鱼脑组织匀浆样品制备 | 第58页 |
| ·MDA含量测定 | 第58-59页 |
| ·SOD酶活性测定 | 第59-61页 |
| ·蛋白质组学技术研究曲马多慢性诱导下斑马鱼脑差异表达的关键蛋白质 | 第61-74页 |
| ·差异蛋白质组学实验步骤 | 第61-70页 |
| ·脑组织总蛋白样品制备 | 第61-62页 |
| ·2D-PAGE | 第62-64页 |
| ·蛋白质染色 | 第64页 |
| ·图像采集与分析 | 第64-65页 |
| ·肽质量指纹图谱分析 | 第65-66页 |
| ·肽质量指纹谱鉴定和数据库检索 | 第66-70页 |
| ·多肽质谱检测条件优化 | 第66-69页 |
| ·质谱鉴定和数据库检索条件 | 第69-70页 |
| ·差异蛋白质的免疫印迹验证 | 第70-73页 |
| ·果糖二磷酸醛缩酶和肌酸激酶活性测定 | 第73-74页 |
| ·果糖二磷酸醛缩酶活性测定 | 第73-74页 |
| ·肌酸激酶活性测定 | 第74页 |
| ·线粒体超微结构观察 | 第74-75页 |
| 3 结果 | 第75-134页 |
| ·曲马多导致斑马鱼行为学异常和体重、脑重下降 | 第75-79页 |
| ·曲马多在斑马鱼体内的分布和代谢 | 第79-92页 |
| ·组织中曲马多原药ESI-Q-TOF/MS法的检出和结构解析 | 第79-83页 |
| ·组织中曲马多原药的分布情况 | 第83-88页 |
| ·脑组织中曲马多含量与处理时间的对应趋势 | 第88-89页 |
| ·脑组织代谢产生O-和N-去甲基两种主要代谢产物 | 第89-92页 |
| ·曲马多诱导的脂质过氧化物含量和SOD酶活性改变 | 第92-96页 |
| ·曲马多慢性诱导下斑马鱼脑差异表达的关键蛋白质的鉴定和分析 | 第96-128页 |
| ·双向凝胶电泳技术的优化 | 第96-102页 |
| ·第二向胶交联度的选择 | 第96-98页 |
| ·样品中核酸的去除 | 第98-99页 |
| ·第二向胶蛋白斑点扭曲现象的避免 | 第99-100页 |
| ·第二向胶银染色差的消除 | 第100-102页 |
| ·优化质谱分析技术 | 第102-116页 |
| ·多肽质谱分析中蛋白增强剂的发现 | 第102-107页 |
| ·蛋白质提高多肽绝对信号强度 | 第102-104页 |
| ·蛋白增强剂对共结晶质量的改善 | 第104-105页 |
| ·不同蛋白质增强酸性多肽的离子化效率 | 第105-106页 |
| ·提高肽质量指纹谱鉴定蛋白质的可信度 | 第106-107页 |
| ·提高多肽质谱分析效果的黏合剂涂层的筛选 | 第107-116页 |
| ·寻找合适的黏合剂作为MALDI金属靶涂层 | 第107-108页 |
| ·MCP、GCP和VCP在多肽分析中的运用 | 第108-111页 |
| ·MCP、GCP和VCP在血清多肽检测中的运用 | 第111-112页 |
| ·高盐浓度的多肽样品检测 | 第112页 |
| ·两种靶上脱盐方法的比较 | 第112页 |
| ·结晶形态显微观察 | 第112-116页 |
| ·基于双向凝胶电泳和质谱技术的蛋白质分离和鉴定 | 第116-124页 |
| ·曲马多诱导的14-3-3 epsilon蛋白表达量上调的免疫印迹验证 | 第124-125页 |
| ·曲马多对ALD酶活性的影响 | 第125-127页 |
| ·曲马多对CK酶活性的影响 | 第127-128页 |
| ·曲马多慢性诱导下的线粒体超微结构变化 | 第128-134页 |
| 4 讨论 | 第134-155页 |
| ·氧化应激相关的斑马鱼行为学改变 | 第134-135页 |
| ·曲马多在斑马鱼体内的吸收和代谢规律 | 第135-136页 |
| ·曲马多诱导的氧化应激相关的SOD酶活性抑制和脂质过氧化物含量增加 | 第136-138页 |
| ·曲马多诱导的斑马鱼脑氧化应激和依赖性潜力分析 | 第138-151页 |
| ·差异蛋白质组学技术优化 | 第138-141页 |
| ·曲马多相关的差异蛋白鉴定结果分析 | 第141-151页 |
| ·曲马多诱导表达的差异蛋白的特性及功能分类 | 第141-144页 |
| ·曲马多慢性诱导导致中枢神经系统的氧化应激损伤 | 第144-148页 |
| ·曲马多依赖性潜力分析 | 第148-151页 |
| ·曲马多慢性诱导下的线粒体损伤 | 第151-155页 |
| 5 结论 | 第155-158页 |
| 参考文献 | 第158-180页 |
| 附录一:图表索引 | 第180-184页 |
| 附录二:缩略语及中英文对照 | 第184-187页 |
| 在学期间发表论文与获奖情况 | 第187-188页 |
| 致谢 | 第188页 |
