果胶酶高产菌株的筛选及其Pectate Lyase基因克隆
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 绪论 | 第8-19页 |
| ·果胶及其应用 | 第8-10页 |
| ·果胶酶及其应用 | 第10-14页 |
| ·果胶酸裂解酶研究进展 | 第14-17页 |
| ·本研究的意义、内容及其技术路线 | 第17-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-27页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·菌株和质粒 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·试剂(盒)及其它 | 第20页 |
| ·培养基及常用溶液 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-27页 |
| ·菌种的培养 | 第20页 |
| ·菌株的筛选 | 第20-21页 |
| ·果胶酶液制备及活力测定 | 第21页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)扩增 | 第22-23页 |
| ·PCR产物的电泳及回收纯化 | 第23页 |
| ·载体的构建 | 第23-24页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第24页 |
| ·转化和筛选 | 第24-25页 |
| ·质粒的提取 | 第25-26页 |
| ·质粒的鉴定 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-38页 |
| ·产酶菌种的筛选 | 第27页 |
| ·欧文氏杆菌T85-166基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第28-29页 |
| ·果胶酸裂解酶Pel基因的连接转化 | 第29-31页 |
| ·质粒的提取 | 第31页 |
| ·质粒的鉴定 | 第31-32页 |
| ·传代稳定性研究 | 第32-33页 |
| ·生物信息学分析 | 第33-38页 |
| ·多序列比对 | 第33-36页 |
| ·碱基序列的多序列比对 | 第33-34页 |
| ·Pel基因氨基酸序列多序列比对 | 第34-36页 |
| ·二级结构 | 第36页 |
| ·高级结构预测 | 第36-37页 |
| ·系统进化树 | 第37-38页 |
| 4 结论与讨论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 附录 | 第47-55页 |
| 符号表 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |
