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鸡CAST基因cDNA的克隆、组织表达及其生物信息学分析

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
1 文献综述第10-23页
   ·选题背景第10-13页
     ·鸡肉质主要评定指标第10-11页
     ·鸡肉质的研究进展第11-13页
   ·钙蛋白酶抑制酶(CAST)的研究第13-19页
     ·钙蛋白酶系统概述第13-15页
     ·钙蛋白酶抑制酶蛋白的结构及其定位第15-17页
     ·钙蛋白酶抑制酶的作用机制第17-18页
     ·钙蛋白酶抑制酶的特性与生物学功能第18-19页
   ·实时定量PCR技术的原理与应用第19-22页
     ·荧光实时定量PCR技术的原理第19-20页
     ·各种荧光定量方法第20-22页
     ·荧光实时定量PCR的应用第22页
   ·本试验的目的及意义第22-23页
2 材料和方法第23-32页
   ·材料第23-25页
     ·试验材料第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
     ·试验试剂第24页
     ·主要试剂的配制第24-25页
   ·试验方法第25-31页
     ·试验技术路线第25-26页
     ·引物设计第26页
     ·总RNA的提取第26-27页
     ·总RNA的检测第27页
     ·逆转录(单链cDNA的合成)及PCR扩增第27-29页
     ·PCR产物克隆及测序第29-30页
     ·实时荧光定量PCR第30-31页
   ·统计分析第31-32页
3 结果与分析第32-50页
   ·PCR扩增及克隆测序结果第32-41页
     ·总RNA提取结果第32页
     ·RT-PCR结果第32-33页
     ·目的片段的测序结果第33页
     ·CAST基因克隆序列分析第33-35页
     ·鸡CAST基因生物信息学分析第35-41页
   ·荧光定量PCR扩增结果第41-43页
     ·常规PCR及测序结果第41页
     ·目的基因与管家基因的标准曲线和熔解曲线第41-43页
   ·CAST基因的表达结果第43-50页
     ·CAST基因表达的品种差异第43-44页
     ·CAST基因的组织表达差异第44-48页
     ·CAST基因表达的发育性变化第48-50页
4 讨论第50-55页
   ·克隆cDNA序列分析第50-52页
     ·鸡CAST基因的序列初步确定第50-51页
     ·鸡CAST基因保守区序列分析第51页
     ·鸡CAST基因的确定序列特性:跨膜螺旋、磷酸化位点第51-52页
   ·鸡CAST基因的表达规律第52-55页
     ·避免基因组DNA污染第52页
     ·参照基因的选择第52-53页
     ·SYBR green I的选择第53页
     ·CAST基因组织表达差异及其发育性表达规律第53-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-61页
致谢第61页

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