中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-23页 |
·选题背景 | 第10-13页 |
·鸡肉质主要评定指标 | 第10-11页 |
·鸡肉质的研究进展 | 第11-13页 |
·钙蛋白酶抑制酶(CAST)的研究 | 第13-19页 |
·钙蛋白酶系统概述 | 第13-15页 |
·钙蛋白酶抑制酶蛋白的结构及其定位 | 第15-17页 |
·钙蛋白酶抑制酶的作用机制 | 第17-18页 |
·钙蛋白酶抑制酶的特性与生物学功能 | 第18-19页 |
·实时定量PCR技术的原理与应用 | 第19-22页 |
·荧光实时定量PCR技术的原理 | 第19-20页 |
·各种荧光定量方法 | 第20-22页 |
·荧光实时定量PCR的应用 | 第22页 |
·本试验的目的及意义 | 第22-23页 |
2 材料和方法 | 第23-32页 |
·材料 | 第23-25页 |
·试验材料 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·试验试剂 | 第24页 |
·主要试剂的配制 | 第24-25页 |
·试验方法 | 第25-31页 |
·试验技术路线 | 第25-26页 |
·引物设计 | 第26页 |
·总RNA的提取 | 第26-27页 |
·总RNA的检测 | 第27页 |
·逆转录(单链cDNA的合成)及PCR扩增 | 第27-29页 |
·PCR产物克隆及测序 | 第29-30页 |
·实时荧光定量PCR | 第30-31页 |
·统计分析 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-50页 |
·PCR扩增及克隆测序结果 | 第32-41页 |
·总RNA提取结果 | 第32页 |
·RT-PCR结果 | 第32-33页 |
·目的片段的测序结果 | 第33页 |
·CAST基因克隆序列分析 | 第33-35页 |
·鸡CAST基因生物信息学分析 | 第35-41页 |
·荧光定量PCR扩增结果 | 第41-43页 |
·常规PCR及测序结果 | 第41页 |
·目的基因与管家基因的标准曲线和熔解曲线 | 第41-43页 |
·CAST基因的表达结果 | 第43-50页 |
·CAST基因表达的品种差异 | 第43-44页 |
·CAST基因的组织表达差异 | 第44-48页 |
·CAST基因表达的发育性变化 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-55页 |
·克隆cDNA序列分析 | 第50-52页 |
·鸡CAST基因的序列初步确定 | 第50-51页 |
·鸡CAST基因保守区序列分析 | 第51页 |
·鸡CAST基因的确定序列特性:跨膜螺旋、磷酸化位点 | 第51-52页 |
·鸡CAST基因的表达规律 | 第52-55页 |
·避免基因组DNA污染 | 第52页 |
·参照基因的选择 | 第52-53页 |
·SYBR green I的选择 | 第53页 |
·CAST基因组织表达差异及其发育性表达规律 | 第53-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61页 |