中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第1章 文献综述 | 第13-29页 |
·影响玉米淀粉生物合成的关键酶 | 第15-19页 |
·腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶 | 第17页 |
·淀粉合成酶 | 第17页 |
·淀粉分支酶 | 第17-18页 |
·淀粉去分支酶 | 第18-19页 |
·RNA 干扰技术 | 第19-23页 |
·RNAi 的发现 | 第19-20页 |
·RNAi 的种类 | 第20-22页 |
·RNAi 作用机理 | 第22-23页 |
·RNA 干扰的作用特点 | 第23-24页 |
·RNA 干扰的研究进展 | 第24页 |
·玉米遗传转化系统的研究进展 | 第24-25页 |
·愈伤组织诱导 | 第24-25页 |
·分化 | 第25页 |
·植物转基因方法概况 | 第25-27页 |
·农杆菌介导法 | 第26页 |
·基因枪法 | 第26页 |
·花粉管通道法 | 第26-27页 |
·显微注射法(子房注射法) | 第27页 |
·其他转化方法 | 第27页 |
·本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
第2章 支链淀粉合成相关基因 RNAi 载体构建 | 第29-68页 |
·材料与方法 | 第29-35页 |
·实验材料 | 第29页 |
·菌株与载体 | 第29-31页 |
·试剂 | 第31-32页 |
·实验所需试剂及培养基的配制 | 第32页 |
·仪器 | 第32-33页 |
·植物材料 | 第33页 |
·玉米基因组 DNA 的提取 | 第33-34页 |
·玉米总 RNA 的提取 | 第34页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-49页 |
·植物表达载体的构建 | 第35-36页 |
·合成支链淀粉的相关基因的克隆 | 第36-38页 |
·合成支链淀粉相关基因的 PCR 扩增 | 第38-41页 |
·琼脂糖凝胶电泳回收目的基因片段 | 第41-42页 |
·回收产物的平末端加 A | 第42页 |
·目的基因片段与 T 载体连接 | 第42-43页 |
·大肠杆菌 Top10 感受态细胞的制备(CaCl2法) | 第43页 |
·转化大肠杆菌感受态细胞 | 第43-44页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第44-45页 |
·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第45页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第45-46页 |
·测序 | 第46页 |
·目的基因片段与中间载体的连接 | 第46-48页 |
·目的基因片段与表达载体 pCAMBIA3301 的连接 | 第48-49页 |
·结果与分析 | 第49-66页 |
·玉米 DNA 的提取 | 第49-50页 |
·幼胚总 RNA 的提取 | 第50-51页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第51页 |
·合成支链淀粉相关基因的克隆 | 第51-53页 |
·目的基因片段与克隆载体的连接及鉴定 | 第53-56页 |
·目的基因片段与中间载体的连接及鉴定 | 第56-60页 |
·目的基因片段与表达载体 pCAMBIA3301 的连接及鉴定 | 第60-66页 |
·讨论 | 第66-67页 |
·结论 | 第67-68页 |
第3章 玉米遗传转化体系的建立及不同转基因方法的研究 | 第68-105页 |
·实验材料 | 第68页 |
·受体材料 | 第68页 |
·菌株 | 第68页 |
·实验仪器 | 第68页 |
·实验方法 | 第68-81页 |
·Southern blot 杂交液的配制 | 第68-69页 |
·培养基的配置 | 第69-71页 |
·愈伤组织的诱导 | 第71页 |
·分化 | 第71页 |
·生根 | 第71页 |
·炼苗及移栽 | 第71-72页 |
·农杆菌介导玉米不同组织部位的遗传转化 | 第72-74页 |
·花粉管通道法介导玉米遗传转化 | 第74-75页 |
·显微注射法介导的玉米遗传转化 | 第75页 |
·转基因植株鉴定 | 第75-80页 |
·转基因植株淀粉含量测定 | 第80-81页 |
·结果与分析 | 第81-101页 |
·玉米愈伤组织的诱导 | 第81-83页 |
·愈伤组织的分化 | 第83-85页 |
·生根 | 第85页 |
·炼苗及移栽 | 第85-86页 |
·农杆菌侵染愈伤组织 | 第86-87页 |
·农杆菌侵染玉米幼胚 | 第87-88页 |
·农杆菌侵染下胚轴 | 第88-89页 |
·花粉管通道法 | 第89-90页 |
·显微注射法 | 第90页 |
·GUS 瞬时检测 | 第90-94页 |
·转基因检测 | 第94-98页 |
·T_0代转基因植株田间生物性状分析 | 第98-100页 |
·T_1代转基因玉米籽粒形态分析 | 第100页 |
·T_1代转基因植株淀粉含量的测定 | 第100-101页 |
·讨论 | 第101-104页 |
·结论 | 第104-105页 |
全文结论 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-118页 |
硕士期间工作 | 第118-119页 |
致谢 | 第119页 |