| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 英文缩写词表 | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第1部分 文献综述 | 第15-27页 |
| 1 分类 | 第15页 |
| 2 分型 | 第15-16页 |
| 3 生物学特性和理化特性 | 第16-17页 |
| 4 结构及功能 | 第17-19页 |
| 5 流行病学 | 第19-21页 |
| ·地理分布 | 第19-20页 |
| ·传播媒介与传染源 | 第20页 |
| ·在自然界的贮存 | 第20页 |
| ·跨地区传播机理 | 第20-21页 |
| ·易感动物与人群 | 第21页 |
| ·季节对 JE 流行的影响 | 第21页 |
| 6 JEV 致病机理 | 第21-23页 |
| ·JEV 在宿主体内的感染过程 | 第21-22页 |
| ·JEV 在细胞内的感染与复制 | 第22页 |
| ·JEV 通过血脑屏障的机制 | 第22-23页 |
| 7 人感染 JEV 的主要症状 | 第23页 |
| 8 感染 JEV 的病理学变化 | 第23-24页 |
| 9 JE 的诊断 | 第24-25页 |
| ·JEV 病原学诊断 | 第24-25页 |
| ·JEV 血清学诊断 | 第25页 |
| 10 JE 疫苗研究进展 | 第25-27页 |
| ·灭活苗和减毒苗 | 第25-26页 |
| ·基因工程苗 | 第26-27页 |
| 第2部分 研究内容 | 第27-63页 |
| 第1章 利用噬菌体表面展示技术筛选 JEV E 蛋白单克隆抗体的抗原表位 | 第27-37页 |
| 1 实验材料 | 第27-29页 |
| ·毒株、抗体和试剂 | 第27-28页 |
| ·主要仪器、设备 | 第28页 |
| ·试剂配制 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-32页 |
| ·特异性抗原表位的生物淘洗 | 第30页 |
| ·噬菌体克隆 P/N 值测定 | 第30-31页 |
| ·噬菌体的扩增与纯化 | 第31页 |
| ·ELISA 分析噬菌体克隆与 McAb 3E9 的结合反应 | 第31-32页 |
| ·提取噬菌体单链 DNA | 第32页 |
| 3 实验结果 | 第32-34页 |
| ·噬菌体克隆 P/N 值测定 | 第32-33页 |
| ·噬菌体克隆与 McAb 3E9 的 ELISA 分析 | 第33页 |
| ·阳性克隆序列分析 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-35页 |
| ·JEV E 蛋白 McAb 3E9 抗原表位的筛选 | 第34-35页 |
| ·E373 是 JEV E 蛋白的线性表位 | 第35页 |
| 5 小结 | 第35-37页 |
| 第2章 JEV E 抗原表位在大肠杆菌中的表达及表达产物抗原性的研究 | 第37-51页 |
| 1 实验材料 | 第37-40页 |
| ·工具酶、质粒及试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器、设备 | 第37页 |
| ·试剂配制 | 第37-40页 |
| 2 实验方法 | 第40-45页 |
| ·合成片段 | 第40-41页 |
| ·BL21（DE3）大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第41页 |
| ·转化质粒 pGEX-KG | 第41页 |
| ·质粒限制性酶切 | 第41-42页 |
| ·质粒酶切产物切胶回收 | 第42页 |
| ·双链 DNA 片段与载体连接 | 第42页 |
| ·细菌克隆鉴定 | 第42页 |
| ·IPTG 诱导表达目的蛋白并纯化 | 第42-43页 |
| ·SDS-PAGE | 第43-44页 |
| ·凝胶蛋白染色及脱色 | 第44页 |
| ·Western blot 方法检测重组表位的抗原性 | 第44-45页 |
| ·间接 ELISA 方法鉴定纯化蛋白的抗体识别功能 | 第45页 |
| 3 实验结果 | 第45-48页 |
| ·构建重组表达载体 | 第45-46页 |
| ·目的蛋白的诱导表达及纯化 | 第46-47页 |
| ·Western Blot 检测重组表位的抗原性 | 第47-48页 |
| ·pGEX-KG-JEV-E-373 融合多肽 ELISA 结果 | 第48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| ·表位 E373 的原核表达及纯化 | 第48-49页 |
| ·JEV E 蛋白重组抗原表位的抗原性研究 | 第49-50页 |
| 5 小结 | 第50-51页 |
| 第3章 HE、免疫组化法检测鼠脑中 JEV 方法的优化及应用 | 第51-63页 |
| 1 实验材料 | 第51-53页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·毒株、抗体及各种试剂 | 第51页 |
| ·主要仪器、设备 | 第51页 |
| ·试剂配置 | 第51-53页 |
| 2 实验方法 | 第53-57页 |
| ·乳鼠脑内接种实验 | 第53页 |
| ·HE 染色观察小鼠脑组织病理变化 | 第53-54页 |
| ·RT-PCR 方法检测脑组织中抗原 | 第54-55页 |
| ·免疫酶组织化学方法检测鼠脑中 JEV 抗原 | 第55-57页 |
| 3 实验结果 | 第57-61页 |
| ·HE 染色结果及脑组织病理学变化 | 第57-58页 |
| ·RT-PCR 检测结果 | 第58页 |
| ·免疫酶组化染色方法的优化 | 第58-61页 |
| 4 讨论 | 第61-62页 |
| ·免疫酶组化技术的应用于 JEV 检测 | 第61页 |
| ·免疫组化各项条件的优化 | 第61-62页 |
| 5 小结 | 第62-63页 |
| 第3部分结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 作者简介及在学期间取得的科研成果 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
