| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-14页 |
| 第2章 实验材料 | 第14-22页 |
| ·菌株 | 第14页 |
| ·质粒载体 | 第14-15页 |
| ·工具酶及 DNA、蛋白质分子量 Marker | 第15页 |
| ·试剂盒 | 第15页 |
| ·主要化学试剂及耗材 | 第15-16页 |
| ·主要仪器及设备 | 第16-17页 |
| ·常用溶液的配制 | 第17-22页 |
| ·LB 培养基 | 第17页 |
| ·固体培养基 | 第17-18页 |
| ·Amp 贮液 | 第18页 |
| ·IPTG 贮液 | 第18页 |
| ·SDS-PAGE | 第18-20页 |
| ·细菌超声裂解液 | 第20页 |
| ·洗涤缓冲液 | 第20页 |
| ·AKTA 离子交换缓冲液 | 第20-21页 |
| ·AKTA 分子筛缓冲液 | 第21-22页 |
| 第3章 实验方法 | 第22-33页 |
| ·luxS 的生物信息学分析 | 第22页 |
| ·引物的设计与合成 | 第22页 |
| ·变形链球菌 UA159 菌株的培养与基因组提取 | 第22-23页 |
| ·变形链球菌 UA159 菌株的培养 | 第22-23页 |
| ·变形链球菌 UA159 菌株基因组提取 | 第23页 |
| ·luxS 编码序列的扩增及回收 | 第23-24页 |
| ·序列的扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR 产物回收 | 第24页 |
| ·PCR 产物及载体质粒的酶切 | 第24-25页 |
| ·连接 | 第25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·质粒 DNA 的小量提取 | 第25-26页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶重组蛋白的小量诱导表达及鉴定 | 第26-27页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶重组蛋白的大量诱导表达 | 第27页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶重组蛋白的纯化 | 第27-29页 |
| ·BCA 法测定蛋白浓度 | 第29-30页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶的鉴定 | 第30页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶的晶体培养 | 第30-32页 |
| ·晶体衍射数据收集与分析 | 第32-33页 |
| 第4章 结果 | 第33-42页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶的生物信息学 | 第33页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶 PCR 的扩增结果和表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶的诱导表达 | 第34-35页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶的纯化 | 第35-38页 |
| ·GST 柱亲和层析纯化 | 第35页 |
| ·离子交换层析 | 第35-37页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第37-38页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶的质谱鉴定 | 第38页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶纯化过程总结 | 第38-39页 |
| ·核糖基高半胱氨酸酶晶体生长条件的筛选 | 第39-40页 |
| ·晶体生长条件的优化 | 第40页 |
| ·晶体衍射数据的收集与处理 | 第40-42页 |
| 第5章 讨论 | 第42-46页 |
| 第6章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |