| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 第一章 综述 | 第16-40页 |
| 第一节 昆虫表皮骨化研究进展 | 第16-25页 |
| 摘要 | 第16页 |
| 1 昆虫表皮的骨化 | 第16-18页 |
| 2 儿茶酚类的合成及跨上皮运输 | 第18-19页 |
| 3 表皮儿茶酚类氧化为邻醌 | 第19-20页 |
| 4 对醌甲基化合物的形成 | 第20页 |
| 5 脱氢N-酰基多巴胺的合成 | 第20页 |
| 6 体外骨化时加成化合物的形成 | 第20-21页 |
| 7 体内骨化时加成化合物的形成 | 第21-22页 |
| 8 酮基儿茶酚 | 第22-23页 |
| 9 昆虫骨化机制 | 第23-24页 |
| 10 着色反应 | 第24-25页 |
| 第二节 哺乳动物酪氨酸羟化酶研究进展 | 第25-33页 |
| 摘要 | 第25-26页 |
| 1 儿茶酚胺的生物合成途径及在生物体内的重要性 | 第26-28页 |
| 2 哺乳动物酪氨酸羟化酶基因研究 | 第28-29页 |
| 3 哺乳动物酪氨酸羟化酶蛋白研究 | 第29-30页 |
| 4 哺乳动物酪氨酸羟化酶体外表达研究 | 第30-31页 |
| 5 哺乳动物酪氨酸羟化酶活性调控研究 | 第31-32页 |
| 6 酪氨酸羟化酶与帕金森疾病关系研究 | 第32-33页 |
| 7 展望 | 第33页 |
| 第三节 昆虫酪氨酸羟化酶研究进展 | 第33-40页 |
| 摘要 | 第33-35页 |
| 1 昆虫TH 体内研究进展 | 第35-38页 |
| 2 昆虫TH 体外研究进展 | 第38-39页 |
| 3 展望 | 第39-40页 |
| 第二章 材料和方法 | 第40-52页 |
| 1 实验材料 | 第40-43页 |
| 2 常用仪器设备 | 第43-44页 |
| 3 常用方法 | 第44-52页 |
| ·黄粉虫的饲养 | 第44页 |
| ·菌种的培养 | 第44页 |
| ·菌体灭活 | 第44页 |
| ·黄粉虫的免疫处理 | 第44页 |
| ·黄粉虫血淋巴的收集及解剖 | 第44-45页 |
| ·黄粉虫总RNA 的抽提 | 第45页 |
| ·RNA 甲醛变性凝胶电泳 | 第45页 |
| ·RNA 浓度测定 | 第45-46页 |
| ·RNA 反转录 | 第46页 |
| ·PCR 扩增 | 第46-47页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第47页 |
| ·PCR 产物凝胶纯化 | 第47页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第47-48页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第48-49页 |
| ·连接反应 | 第49页 |
| ·重组DNA 的转化及菌体复苏 | 第49页 |
| ·重组质粒菌液PCR 鉴定 | 第49页 |
| ·酶切反应 | 第49-50页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质电泳凝胶的配制 | 第50页 |
| ·SDS-PAGE 电泳凝胶的灌制 | 第50-52页 |
| 第三章 黄粉虫酪氨酸羟化酶基因的克隆及生物信息学分析 | 第52-68页 |
| 1 材料与方法 | 第52-55页 |
| ·材料与试剂 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-66页 |
| ·简并引物扩增获得TH 片段 | 第55-57页 |
| ·3′RACE 法扩增TmTH 基因cDNA3′末端 | 第57页 |
| ·5′RACE 法扩增TmTH 基因cDNA5′末端 | 第57-58页 |
| ·TmTH 基因编码区片段的克隆及序列分析 | 第58-59页 |
| ·TmTH 生物信息学分析 | 第59-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| 第四章 黄粉虫酪氨酸羟化酶变态发育中的功能分析 | 第68-81页 |
| 1 材料与方法 | 第68-71页 |
| ·材料与试剂 | 第68页 |
| ·试验方法 | 第68-71页 |
| 2 结果与分析 | 第71-79页 |
| ·半定量条件摸索 | 第71-74页 |
| ·黄粉虫TmTH 组织表达图谱分析 | 第74-75页 |
| ·TmTH 的发育表达图谱分析 | 第75-76页 |
| ·TmTH 的诱导时效性分析 | 第76-78页 |
| ·TmTH 的诱导特异性分析 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-81页 |
| 第五章 黄粉虫酪氨酸羟化酶基因的原核表达 | 第81-87页 |
| 1 材料和方法 | 第81-83页 |
| ·材料与试剂 | 第81页 |
| ·方法 | 第81-83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-85页 |
| ·pMD19-T-TmTH 重组载体的鉴定 | 第83-84页 |
| ·pET28(+)-TmTH 重组表达载体的鉴定 | 第84-85页 |
| ·黄粉虫TmTH 基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第85页 |
| 3 讨论 | 第85-87页 |
| 第六章 小结 | 第87-89页 |
| 1 黄粉虫酪氨酸羟化酶基因的克隆及序列分析 | 第87页 |
| 2 黄粉虫酪氨酸羟化酶变态发育中的功能分析 | 第87-88页 |
| 3 黄粉虫酪氨酸羟化酶体外原核表达研究 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-103页 |
| 附录 | 第103-109页 |
| 附录一 3' RACE 法原理 | 第103-105页 |
| 附录二 5' RACE 法原理 | 第105-107页 |
| 附录三 pMD19-T 载体质粒图谱 | 第107-108页 |
| 附录四 pET28a(+)质粒图谱 | 第108-109页 |
| 研究生期间科研成果 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
