| 中文摘要 | 第5-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 引言 | 第8-14页 |
| 第一部分 MetaLnc9在肺癌中的功能和作用机制研究 | 第14-73页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 1 材料与方法 | 第15-38页 |
| 1.1 细胞系及实验动物 | 第15页 |
| 1.2 肺癌组织样本 | 第15页 |
| 1.3 主要试剂及检测试剂盒 | 第15-17页 |
| 1.4 主要仪器 | 第17-18页 |
| 1.5 主要溶液配制 | 第18-19页 |
| 1.6 引物序列及siRNA序列 | 第19-22页 |
| 1.7 临床组织及细胞总RNA提取 | 第22页 |
| 1.8 细胞质和细胞核RNA分离 | 第22-23页 |
| 1.9 cDNA合成及Real time PCR | 第23-24页 |
| 1.10 5'和3'RACE(Rapid amplification of cDNA ends) | 第24-27页 |
| 1.11 Northern Blot | 第27-30页 |
| 1.12 慢病毒感染 | 第30页 |
| 1.13 寡核苷酸转染 | 第30页 |
| 1.14 RNA pull down实验 | 第30-32页 |
| 1.15 RIP实验 | 第32-33页 |
| 1.16 ChIP实验 | 第33-34页 |
| 1.17 荧光素酶活力检测 | 第34页 |
| 1.18 裸鼠体内转移实验 | 第34-35页 |
| 1.19 细胞总蛋白的提取 | 第35页 |
| 1.20 BCA法蛋白定量 | 第35页 |
| 1.21 WesternBlot实验 | 第35-37页 |
| 1.22 细胞体外迁移和侵袭实验 | 第37页 |
| 1.23 统计学方法 | 第37-38页 |
| 2 结果 | 第38-68页 |
| 2.1 高低转移肺癌细胞系LncRNA表达谱芯片及筛选转移相关LncRNA | 第38-47页 |
| 2.2 MetaLnc9的生物学特征 | 第47-48页 |
| 2.3 MetaLnc9在体外实验中对肺癌细胞系迁移和侵袭能力的影响 | 第48-49页 |
| 2.4 过表达MetaLnc9促进肺癌细胞体内肺癌转移结节的形成 | 第49-50页 |
| 2.5 MetaLnc9直接与NONO和PGK1蛋白结合 | 第50-53页 |
| 2.6 MetaLnc9影响PGK1的泛素化降解 | 第53-55页 |
| 2.7 MetaLnc9通过PGK1调控AKT/mTOR信号通路 | 第55-61页 |
| 2.8 NONO与CRTC/CREB形成复合物参与对MetaLnc9的转录调控 | 第61-68页 |
| 3 讨论 | 第68-72页 |
| 4 小结 | 第72-73页 |
| 第二部分 MiRNA-10a在肺癌中功能和作用机制研究 | 第73-94页 |
| 前言 | 第73-74页 |
| 1 材料与方法 | 第74-80页 |
| 1.1 细胞系及实验动物 | 第74页 |
| 1.2 主要试剂与常用溶剂 | 第74页 |
| 1.3 主要仪器 | 第74页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第74-75页 |
| 1.5 组织及细胞总RNA抽提 | 第75页 |
| 1.6 cDNA合成及Real time PCR检测 | 第75页 |
| 1.7 组织miRNA抽提 | 第75页 |
| 1.8 miRNA逆转录及Real time PCR检测 | 第75-76页 |
| 1.9 慢病毒感染 | 第76页 |
| 1.10 寡核苷酸转染 | 第76-77页 |
| 1.11 细胞增殖实验 | 第77页 |
| 1.12 FACS分析检测细胞周期 | 第77页 |
| 1.13 克隆形成实验 | 第77-78页 |
| 1.14 细胞迁移侵袭实验 | 第78页 |
| 1.15 Western Blot实验 | 第78-79页 |
| 1.16 荧光素酶活性检测 | 第79页 |
| 1.17 统计学分析 | 第79-80页 |
| 2 结果 | 第80-90页 |
| 2.1 miR-10a在非小细胞肺癌中表达上调并与非小细胞肺癌进展相关 | 第80-82页 |
| 2.2 miR-10a促进非小细胞肺癌细胞的迁移和侵袭能力 | 第82-84页 |
| 2.3 miR-10a在体外促进细胞增殖能力 | 第84-85页 |
| 2.4 PTEN是miR-10a的下游调控靶基因 | 第85-87页 |
| 2.5 PTEN介导miR-10a在非小细胞肺癌中的迁移和侵袭能力 | 第87-88页 |
| 2.6 PTEN在临床组织中的表达与miR-10a的关系 | 第88-90页 |
| 3 讨论 | 第90-93页 |
| 4 小结 | 第93-94页 |
| 总结 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-105页 |
| 发表论文及获奖情况 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
