摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
缩略词表 | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第13-17页 |
第二章 IPSC-MSCs-exsome对骨质疏松大鼠骨量及正常MSCs成骨分化的影响 | 第17-33页 |
2.1 前言 | 第17-19页 |
2.2 材料和方法 | 第19-26页 |
2.2.1 实验动物 | 第19-20页 |
2.2.2 主要试剂 | 第20页 |
2.2.3 主要仪器 | 第20-21页 |
2.2.4 主要溶液配制 | 第21-22页 |
2.2.5 hiPS-MSC-Exos提取鉴定 | 第22-25页 |
2.2.6 构建大鼠去卵巢骨质疏松模型及假手术模型 | 第25页 |
2.2.7 ELISA法检测血清骨钙素水平 | 第25页 |
2.2.8 Micro-CT检测 | 第25页 |
2.2.9 组织切片HE染色检测 | 第25-26页 |
2.2.10 统计学分析 | 第26页 |
2.3 结果 | 第26-31页 |
2.3.1 hiPS-MSCs的鉴定结果 | 第26-28页 |
2.3.2 ELISA检测血清骨钙素结果 | 第28页 |
2.3.3 Micro-CT检测结果 | 第28-30页 |
2.3.4 HE检测结果 | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-32页 |
2.5 结论 | 第32-33页 |
第三章 人诱导的多能干细胞来源的间充质干细胞分泌的外泌体通过增强血管新生和新骨形成能力修复骨质疏松大鼠的骨缺损实验研究 | 第33-60页 |
3.1 前言 | 第33-34页 |
3.2 材料和方法 | 第34-47页 |
3.2.1 实验动物 | 第34页 |
3.2.2 主要试剂 | 第34-35页 |
3.2.3 主要溶液配制 | 第35-36页 |
3.2.4 主要仪器 | 第36-37页 |
3.2.5 hiPSC-MSC-Exos的分离和鉴定 | 第37-38页 |
3.2.6动物实验 | 第38页 |
3.2.7 骨质疏松大鼠的骨髓间充质干细胞的提取及培养 | 第38-39页 |
3.2.8 细胞增殖测定 | 第39页 |
3.2.9 碱性磷酸酶(ALP)活性测定和茜素红S染色 | 第39-40页 |
3.2.10 实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR) | 第40-42页 |
3.2.11 Western blotting分析相关成骨蛋白表达 | 第42-43页 |
3.2.12 颅骨缺损的模型建立 | 第43-44页 |
3.2.13 微Micro CT分析 | 第44页 |
3.2.14 荧光共聚焦检测 | 第44-45页 |
3.2.15 血管灌注Microfil检测 | 第45页 |
3.2.16 组织形态学和免疫组化分析 | 第45-47页 |
3.2.17 统计分析 | 第47页 |
3.3 结果 | 第47-58页 |
3.2.1 hiPSC-MSC-Exos的鉴定 | 第47-49页 |
3.2.2 骨质疏松模型的确定 | 第49-50页 |
3.2.3 hiPSC-MSC-Exos促进r BMSC-OVX的成骨分化 | 第50页 |
3.2.4 成骨相关基因与蛋白检测结果 | 第50-52页 |
3.2.5 颅骨缺损的新生骨的Micro-CT分析 | 第52-53页 |
3.2.6 荧光标记组织形态计量学分析 | 第53-55页 |
3.2.7 骨缺损新生血管形成分析 | 第55-56页 |
3.2.8 组织学和免疫组化分析 | 第56-58页 |
3.4 讨论 | 第58-59页 |
3.5 结论 | 第59-60页 |
第四章 hiPS-MSCs-exsome对Wnt/β-catenin信号通路的影响的研究 | 第60-78页 |
4.1 前言 | 第60-61页 |
4.2 材料和方法 | 第61-73页 |
4.2.0 实验动物 | 第61页 |
4.2.1 主要试剂 | 第61-62页 |
4.2.2 主要溶液配制 | 第62页 |
4.2.3 主要仪器 | 第62-63页 |
4.2.4 IPSC-MSCs的病毒感染 | 第63-67页 |
4.2.5 细胞复苏 | 第67页 |
4.2.6 细胞共转染 | 第67-68页 |
4.2.7 Western blot检测细胞β-catenin表达 | 第68-69页 |
4.2.8 Real Time-PCR检测β-catenin表达 | 第69-71页 |
4.2.9 转然病毒后外泌体提取及鉴定 | 第71页 |
4.2.10 SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离、培养 | 第71-72页 |
4.2.11 hiPSC-MSCs-Exos-β-catenin刺激骨髓间充质干细胞 | 第72页 |
4.2.12 Western blot检测成骨相关蛋白表达 | 第72页 |
4.2.13 Real Time-PCR检测成骨相关基因表达 | 第72-73页 |
4.3 实验结果 | 第73-77页 |
4.3.1 转染慢病毒后IPSC-MSCs观察 | 第73-74页 |
4.3.2 慢病毒转染后分子水平检测结果 | 第74-75页 |
4.3.3 Western blot检测结果 | 第75-76页 |
4.3.4 Real Time-PCR检测结果 | 第76-77页 |
4.4 讨论 | 第77页 |
4.5 结论 | 第77-78页 |
全文总结 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
博士在读期间发表论文和科研成果 | 第88-91页 |