| 摘要 | 第9-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-21页 |
| 1.1 Endo-siRNA的概述 | 第12-13页 |
| 1.2 Endo-siRNA的特点 | 第13-14页 |
| 1.3 Endo-siRNA的生物发生过程 | 第14-16页 |
| 1.4 Endo-siRNA的来源 | 第16-18页 |
| 1.4.1 Endo-siRNA来源于转座子 | 第16-17页 |
| 1.4.2 Endo-siRNA来源于顺式天然反义转录 | 第17页 |
| 1.4.3 Endo-siRNA来自于哺乳动物的假基因对 | 第17-18页 |
| 1.4.4 Endo-siRNA来自于长发夹结构的RNA | 第18页 |
| 1.5 Endo-siRNA的生物学功能 | 第18-19页 |
| 1.6 Endo-siRNA与早期胚胎发育 | 第19-20页 |
| 1.7 本研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-28页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要试剂和试剂盒 | 第22页 |
| 2.1.4 引物设计 | 第22-25页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第25-28页 |
| 2.1.6 主要生物学分析软件 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-33页 |
| 2.2.1 猪卵母细胞-卵丘复合体的获得 | 第28页 |
| 2.2.2 COCs的体外成熟培养 | 第28页 |
| 2.2.3 卵母细胞的去除和成熟卵母细胞的分选 | 第28-29页 |
| 2.2.4 持卵针、注射针的制备 | 第29页 |
| 2.2.5 卵母细胞显微注射 | 第29页 |
| 2.2.6 注射后卵母细胞孤雌激活(PA) | 第29页 |
| 2.2.7 猪endo-siRNA筛选与预测 | 第29-30页 |
| 2.2.8 胚胎总RNA的提取 | 第30页 |
| 2.2.9 RNA反转成cDNA | 第30-31页 |
| 2.2.10 琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| 2.2.11 胚胎小RNA的提取 | 第31页 |
| 2.2.12 小RNA反转录 | 第31页 |
| 2.2.13 实时定量PCR | 第31-32页 |
| 2.2.14 Westernblot | 第32页 |
| 2.2.15 RNAFISH | 第32页 |
| 2.2.16 数据分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-41页 |
| 3.1 猪合子小RNA测序及鉴定 | 第33-34页 |
| 3.1.1 猪合子小RNA的测序 | 第33页 |
| 3.1.2 猪合子小RNA的鉴定 | 第33-34页 |
| 3.2 LTR-siRNA的形成机制研究 | 第34-37页 |
| 3.2.1 LTR-siRNAs的形成依赖Dicer | 第34-36页 |
| 3.2.2 LTR-siRNAs的形成依赖双链RNA(dsRNA) | 第36页 |
| 3.2.3 LTR-siRNAs的形成依赖LTR的转录 | 第36-37页 |
| 3.3 LTR-siRNA对LTR表达的调控 | 第37-39页 |
| 3.3.1 检测LTRs、LTR-siRNAs在猪早期胚胎发育各时期的表达模式 | 第37-39页 |
| 3.3.2 LTR-siRNAs对LTRs表达的调控 | 第39页 |
| 3.4 LTR-siRNA对猪早期胚胎发育的影响 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第49页 |
