| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 第1章 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 严紧反应 | 第12-16页 |
| 1.1.1 严紧反应的发现 | 第12-13页 |
| 1.1.2 (p)ppGpp的合成和水解 | 第13-14页 |
| 1.1.3 严紧反应调控的生理功能 | 第14-16页 |
| 1.1.4 严紧反应在藻类中的研究进展 | 第16页 |
| 1.2 铜绿微囊藻及雨生红球藻 | 第16-19页 |
| 1.2.1 铜绿微囊藻 | 第16-17页 |
| 1.2.2 雨生红球藻 | 第17-19页 |
| 1.3 研究内容及意义 | 第19-21页 |
| 第2章 严紧反应关键基因Marsh/Hprsh的克隆与功能鉴定 | 第21-48页 |
| 2.1 前言 | 第21-22页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第22-24页 |
| 2.2.1 藻种及培养基 | 第22页 |
| 2.2.2 试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-37页 |
| 2.3.1 藻类培养 | 第24页 |
| 2.3.2 铜绿微囊藻Marsh及雨生红球藻Hprsh基因的克隆 | 第24-27页 |
| 2.3.3 雨生红球藻Hprsh基因启动子的克隆 | 第27-32页 |
| 2.3.4 目的条带回收,质粒提取,外源DNA转化,克隆及测序 | 第32-35页 |
| 2.3.5 功能互补实验 | 第35页 |
| 2.3.6 MaRSH点突变 | 第35-36页 |
| 2.3.7 MaRSH及HpRSH体外酶活鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3.8 统计分析 | 第37页 |
| 2.3.9 序列分析 | 第37页 |
| 2.4 实验结果及讨论 | 第37-47页 |
| 2.4.1 Marsh及Hprsh基因序列克隆与分析 | 第37-40页 |
| 2.4.2 Marsh及Hprsh基因功能验证 | 第40-43页 |
| 2.4.3 MaRSH及HpRSH蛋白酶活性鉴定 | 第43-44页 |
| 2.4.4 雨生红球藻Hprsh基因启动子分析 | 第44-45页 |
| 2.4.5 MaRSH及HpRSH系统发育分析 | 第45-47页 |
| 2.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 第3章 ppGpp核苷酸类似物及类胡萝卜素检测方法的建立 | 第48-71页 |
| 3.1 前言 | 第48-52页 |
| 3.1.1 ppGpp检测方法 | 第48-50页 |
| 3.1.2 建立ppGpp检测新方法的迫切性和必要性 | 第50-51页 |
| 3.1.3 现存类胡萝卜素检测方法的不足 | 第51-52页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第52页 |
| 3.2.1 化学试剂 | 第52页 |
| 3.2.2 仪器 | 第52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-55页 |
| 3.3.1 大肠杆菌工程菌培养及类胡萝卜素提取 | 第52页 |
| 3.3.2 ppGpp及其类似物UHPLC-PDA检测方法的建立 | 第52-54页 |
| 3.3.3 类胡萝卜素UHPLC-PDA检测方法的建立 | 第54-55页 |
| 3.4 实验结果及讨论 | 第55-69页 |
| 3.4.1 ppGpp检测方法及色谱机制探讨 | 第55-63页 |
| 3.4.2 类胡萝卜素检测方法及固定相的比较 | 第63-69页 |
| 3.5 本章小结 | 第69-71页 |
| 第4章 严紧反应在铜绿微囊藻高渗耐受中的调控作用 | 第71-101页 |
| 4.1 前言 | 第71-72页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第72页 |
| 4.2.1 藻种及培养基 | 第72页 |
| 4.2.2 试剂配制 | 第72页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第72页 |
| 4.3 实验方法 | 第72-81页 |
| 4.3.1 实验分组 | 第72-73页 |
| 4.3.2 胁迫处理及严紧反应诱导 | 第73-74页 |
| 4.3.3 环境胁迫对铜绿微囊藻生长的影响 | 第74页 |
| 4.3.4 环境胁迫下Marsh及ROS相关基因的转录分析 | 第74-75页 |
| 4.3.5 藻细胞内ppGpp的含量检测 | 第75-76页 |
| 4.3.6 藻细胞生长曲线及原初光合转化速率(FV/Fm)检测 | 第76页 |
| 4.3.7 ROS的流式细胞仪定量及共聚焦显微定性分析 | 第76页 |
| 4.3.8 ROS相关酶活性检测 | 第76-81页 |
| 4.3.9 统计分析 | 第81页 |
| 4.4 实验结果及讨论 | 第81-99页 |
| 4.4.1 缺氮及SHX处理抑制藻细胞生长 | 第81-82页 |
| 4.4.2 环境胁迫差异性调控Marsh转录表达 | 第82-84页 |
| 4.4.3 环境胁迫差异性调控胞内ppGpp含量 | 第84-87页 |
| 4.4.4 缺氮胁迫诱导的严紧反应提高藻细胞对高渗胁迫的耐受能力 | 第87-95页 |
| 4.4.6 缺氮胁迫诱导严紧反应调控高渗耐受的作用机制 | 第95-99页 |
| 4.5 本章小结 | 第99-101页 |
| 第5章 严紧反应在雨生红球藻类胡萝卜素合成中的调控作用 | 第101-118页 |
| 5.1 前言 | 第101页 |
| 5.2 实验材料和仪器 | 第101-102页 |
| 5.2.1 藻种及培养基 | 第101页 |
| 5.2.2 试剂配制 | 第101-102页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第102页 |
| 5.3 实验方法 | 第102-105页 |
| 5.3.1 雨生红球藻的胁迫处理 | 第102-103页 |
| 5.3.2 环境胁迫下藻细胞类胡萝卜素的含量分析 | 第103页 |
| 5.3.3 环境胁迫下藻细胞内ppGpp的含量检测 | 第103页 |
| 5.3.4 环境胁迫下Hprsh的转录分析 | 第103-105页 |
| 5.3.5 显微观察 | 第105页 |
| 5.3.6 统计分析 | 第105页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第105-116页 |
| 5.4.1 环境胁迫触发雨生红球藻严紧反应 | 第105-107页 |
| 5.4.2 环境胁迫促进雨生红球藻累积虾青素 | 第107-110页 |
| 5.4.3 严紧反应参与胁迫诱导虾青素累积 | 第110-113页 |
| 5.4.4 严紧反应诱导雨生红球藻累积类胡萝卜素的作用机制 | 第113-116页 |
| 5.5 本章小结 | 第116-118页 |
| 第6章 总结与展望 | 第118-124页 |
| 参考文献 | 第124-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第134-135页 |
| 附录 | 第135-136页 |
