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分子对接法研究橡胶籽β-葡萄糖苷酶的底物特异性及热稳定性

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 引言第11-17页
    1.1 β-葡萄糖苷酶及稳定性概述第11-12页
        1.1.1 β-葡萄糖苷酶的简介第11页
        1.1.2 β-葡萄糖苷酶的稳定性概述第11-12页
    1.2 添加剂对β-葡萄糖苷酶的影响第12-13页
    1.3 分子荧光光谱技术第13-14页
    1.4 分子对接第14-15页
        1.4.1 分子对接技术的简介第14页
        1.4.2 分子对接技术的应用第14-15页
    1.5 研究目的、意义以及主要内容第15-17页
        1.5.1 研究目的与意义第15页
        1.5.2 研究的主要内容第15-16页
        1.5.3 特色创新之处第16-17页
2 材料和方法第17-22页
    2.1 材料第17-18页
        2.1.1 实验材料第17页
        2.1.2 主要试剂第17-18页
        2.1.3 仪器设备第18页
    2.2 方法第18-21页
        2.2.1 β-葡萄糖苷酶酶液的制备第18页
        2.2.2 AutoDock分子对接第18-19页
        2.2.3 荧光滴定第19-20页
        2.2.4 高效液相测定色谱条件第20页
        2.2.5 HPLC法测定β-葡萄糖苷酶动力学参数第20页
        2.2.6 橡胶籽β-葡萄糖苷酶残余酶活(%)的测定第20页
        2.2.7 热处理对β-葡萄糖苷酶活性影响第20页
        2.2.8 尿素对β-葡萄糖苷酶热稳定性影响第20页
        2.2.9 糖类对β-葡萄糖苷酶热稳定性影响第20-21页
        2.2.10 酶热失活动力学分析第21页
    2.3 数据统计分析第21-22页
3 结果与分析第22-48页
    3.1 橡胶籽β-葡萄糖苷酶模型构建第22页
    3.2 β-葡萄糖苷酶与荧光猝灭剂的相互作用第22-26页
        3.2.1 β-葡萄糖苷酶与槲皮素的分子对接第23页
        3.2.2 槲皮素荧光猝灭光谱第23-24页
        3.2.3 槲皮素荧光猝灭机制及作用力类型第24-26页
    3.3 分子对接法探究酶与不同类型底物相互作用第26-30页
        3.3.1 pNPG与β-葡萄糖苷酶作用第26-27页
        3.3.2 异黄酮与β-葡萄糖苷酶作用第27页
        3.3.3 黄酮与β-葡萄糖苷酶作用第27-28页
        3.3.4 氰苷与β-葡萄糖苷酶作用第28-29页
        3.3.5 酚苷与β-葡萄糖苷酶作用第29页
        3.3.6 纤维寡糖与β-葡萄糖苷酶作用第29-30页
    3.4 HPLC法测定酶解的米氏常数第30-34页
        3.4.1 酶解pNPG米氏常数的测定第30-31页
        3.4.2 酶解异黄酮米氏常数的测定第31页
        3.4.3 酶解黄酮米氏常数的测定第31-32页
        3.4.4 酶解氰苷米氏常数的测定第32-33页
        3.4.5 酶解酚苷米氏常数的测定第33页
        3.4.6 酶解纤维寡糖米氏常数的测定第33-34页
    3.5 热处理对溶液中β-葡萄糖苷酶的影响第34-36页
        3.5.1 溶液中β-葡萄糖苷酶的热稳定性第34-35页
        3.5.2 热失活动力学分析第35-36页
    3.6 尿素对β-葡萄糖苷酶热稳定性影响第36-40页
        3.6.1 尿素对β-葡萄糖苷酶溶液活性的影响第36-37页
        3.6.2 低浓度尿素对β-葡萄糖苷酶溶液热稳定性的影响第37-38页
        3.6.3 高浓度尿素对β-葡萄糖苷酶溶液热稳定性的影响第38-39页
        3.6.4 极限温度下不同浓度尿素对β-葡萄糖苷酶溶液半衰期的影响第39-40页
    3.7 糖类对β-葡萄糖苷酶热稳定性影响第40-48页
        3.7.1 单糖浓度对β-葡萄糖苷酶活性影响第40页
        3.7.2 葡萄糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响第40-41页
        3.7.3 果糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响第41-42页
        3.7.4 半乳糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响第42-43页
        3.7.5 寡糖浓度对β-葡萄糖苷酶活性影响第43页
        3.7.6 麦芽糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响第43-44页
        3.7.7 海藻糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响第44-45页
        3.7.8 蔗糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响第45-46页
        3.7.9 极限温度下不同糖类对溶液中β-葡萄糖苷酶半衰期的影响第46-48页
4 讨论与展望第48-51页
    4.1 讨论第48-49页
        4.1.1 分子对接结合荧光猝灭法研究酶与猝灭剂相互作用第48页
        4.1.2 分子对接结合高效液相色谱法研究酶与底物相互作用第48页
        4.1.3 尿素的添加对溶液中橡胶籽β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响第48-49页
        4.1.4 糖类添加对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响第49页
    4.2 展望第49-51页
5 结论第51-52页
    5.1 β-葡萄糖苷酶与底物相互作用第51页
    5.2 尿素的添加对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性影响第51页
    5.3 糖的添加对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性影响第51-52页
参考文献第52-58页
附录: 硕士期间发表论文第58页

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