摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第11-17页 |
1.1 β-葡萄糖苷酶及稳定性概述 | 第11-12页 |
1.1.1 β-葡萄糖苷酶的简介 | 第11页 |
1.1.2 β-葡萄糖苷酶的稳定性概述 | 第11-12页 |
1.2 添加剂对β-葡萄糖苷酶的影响 | 第12-13页 |
1.3 分子荧光光谱技术 | 第13-14页 |
1.4 分子对接 | 第14-15页 |
1.4.1 分子对接技术的简介 | 第14页 |
1.4.2 分子对接技术的应用 | 第14-15页 |
1.5 研究目的、意义以及主要内容 | 第15-17页 |
1.5.1 研究目的与意义 | 第15页 |
1.5.2 研究的主要内容 | 第15-16页 |
1.5.3 特色创新之处 | 第16-17页 |
2 材料和方法 | 第17-22页 |
2.1 材料 | 第17-18页 |
2.1.1 实验材料 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
2.1.3 仪器设备 | 第18页 |
2.2 方法 | 第18-21页 |
2.2.1 β-葡萄糖苷酶酶液的制备 | 第18页 |
2.2.2 AutoDock分子对接 | 第18-19页 |
2.2.3 荧光滴定 | 第19-20页 |
2.2.4 高效液相测定色谱条件 | 第20页 |
2.2.5 HPLC法测定β-葡萄糖苷酶动力学参数 | 第20页 |
2.2.6 橡胶籽β-葡萄糖苷酶残余酶活(%)的测定 | 第20页 |
2.2.7 热处理对β-葡萄糖苷酶活性影响 | 第20页 |
2.2.8 尿素对β-葡萄糖苷酶热稳定性影响 | 第20页 |
2.2.9 糖类对β-葡萄糖苷酶热稳定性影响 | 第20-21页 |
2.2.10 酶热失活动力学分析 | 第21页 |
2.3 数据统计分析 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-48页 |
3.1 橡胶籽β-葡萄糖苷酶模型构建 | 第22页 |
3.2 β-葡萄糖苷酶与荧光猝灭剂的相互作用 | 第22-26页 |
3.2.1 β-葡萄糖苷酶与槲皮素的分子对接 | 第23页 |
3.2.2 槲皮素荧光猝灭光谱 | 第23-24页 |
3.2.3 槲皮素荧光猝灭机制及作用力类型 | 第24-26页 |
3.3 分子对接法探究酶与不同类型底物相互作用 | 第26-30页 |
3.3.1 pNPG与β-葡萄糖苷酶作用 | 第26-27页 |
3.3.2 异黄酮与β-葡萄糖苷酶作用 | 第27页 |
3.3.3 黄酮与β-葡萄糖苷酶作用 | 第27-28页 |
3.3.4 氰苷与β-葡萄糖苷酶作用 | 第28-29页 |
3.3.5 酚苷与β-葡萄糖苷酶作用 | 第29页 |
3.3.6 纤维寡糖与β-葡萄糖苷酶作用 | 第29-30页 |
3.4 HPLC法测定酶解的米氏常数 | 第30-34页 |
3.4.1 酶解pNPG米氏常数的测定 | 第30-31页 |
3.4.2 酶解异黄酮米氏常数的测定 | 第31页 |
3.4.3 酶解黄酮米氏常数的测定 | 第31-32页 |
3.4.4 酶解氰苷米氏常数的测定 | 第32-33页 |
3.4.5 酶解酚苷米氏常数的测定 | 第33页 |
3.4.6 酶解纤维寡糖米氏常数的测定 | 第33-34页 |
3.5 热处理对溶液中β-葡萄糖苷酶的影响 | 第34-36页 |
3.5.1 溶液中β-葡萄糖苷酶的热稳定性 | 第34-35页 |
3.5.2 热失活动力学分析 | 第35-36页 |
3.6 尿素对β-葡萄糖苷酶热稳定性影响 | 第36-40页 |
3.6.1 尿素对β-葡萄糖苷酶溶液活性的影响 | 第36-37页 |
3.6.2 低浓度尿素对β-葡萄糖苷酶溶液热稳定性的影响 | 第37-38页 |
3.6.3 高浓度尿素对β-葡萄糖苷酶溶液热稳定性的影响 | 第38-39页 |
3.6.4 极限温度下不同浓度尿素对β-葡萄糖苷酶溶液半衰期的影响 | 第39-40页 |
3.7 糖类对β-葡萄糖苷酶热稳定性影响 | 第40-48页 |
3.7.1 单糖浓度对β-葡萄糖苷酶活性影响 | 第40页 |
3.7.2 葡萄糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响 | 第40-41页 |
3.7.3 果糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响 | 第41-42页 |
3.7.4 半乳糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响 | 第42-43页 |
3.7.5 寡糖浓度对β-葡萄糖苷酶活性影响 | 第43页 |
3.7.6 麦芽糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响 | 第43-44页 |
3.7.7 海藻糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响 | 第44-45页 |
3.7.8 蔗糖对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响 | 第45-46页 |
3.7.9 极限温度下不同糖类对溶液中β-葡萄糖苷酶半衰期的影响 | 第46-48页 |
4 讨论与展望 | 第48-51页 |
4.1 讨论 | 第48-49页 |
4.1.1 分子对接结合荧光猝灭法研究酶与猝灭剂相互作用 | 第48页 |
4.1.2 分子对接结合高效液相色谱法研究酶与底物相互作用 | 第48页 |
4.1.3 尿素的添加对溶液中橡胶籽β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响 | 第48-49页 |
4.1.4 糖类添加对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性的影响 | 第49页 |
4.2 展望 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
5.1 β-葡萄糖苷酶与底物相互作用 | 第51页 |
5.2 尿素的添加对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性影响 | 第51页 |
5.3 糖的添加对溶液中β-葡萄糖苷酶热稳定性影响 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录: 硕士期间发表论文 | 第58页 |