摘要 | 第7-9页 |
1 前言 | 第9-18页 |
1.1 谷子基因的克隆与功能研究进展 | 第9页 |
1.2 逆境胁迫植物的开花途径 | 第9-11页 |
1.2.1 光周期途径 | 第9-10页 |
1.2.2 赤霉素途径 | 第10页 |
1.2.3 春化途径 | 第10页 |
1.2.4 自主开花途径 | 第10-11页 |
1.2.5 植物开花途径重要基因的相互作用 | 第11页 |
1.3 植物FT家族基因的特性 | 第11-12页 |
1.4 热激蛋白 | 第12-15页 |
1.4.1 Hsp100家族 | 第12页 |
1.4.2 Hsp90家族 | 第12-13页 |
1.4.3 Hsp70家族 | 第13-14页 |
1.4.4 Hsp60家族 | 第14页 |
1.4.5 sHsp家族 | 第14-15页 |
1.4.6 热激蛋白的调控网络 | 第15页 |
1.5 转录组测序 | 第15-17页 |
1.5.1 图位克隆 | 第15-16页 |
1.5.2 MutMap | 第16页 |
1.5.3 PCR扩增法 | 第16-17页 |
1.6 研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-24页 |
2.1 试验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 材料与载体 | 第18页 |
2.1.2 培养基和试剂的配制 | 第18-19页 |
2.2 试验方法 | 第19-24页 |
2.2.1 晋谷21的EMS诱变处理 | 第19页 |
2.2.2 谷子的培养、总RNA的提取和质量检测 | 第19-21页 |
2.2.3 PCR扩增目的片段体系和程序 | 第21页 |
2.2.4 PCR产物的回收 | 第21-22页 |
2.2.5 酶切反应 | 第22页 |
2.2.6 酶切载体和目标片段的切胶回收 | 第22-23页 |
2.2.7 目的基因和载体的连接 | 第23页 |
2.2.8 大肠杆菌热激转化和单克隆的筛选 | 第23页 |
2.2.9 菌种保存 | 第23页 |
2.2.10 农杆菌电击转化 | 第23-24页 |
3 结果与分析 | 第24-43页 |
3.1 EMS诱变及突变体筛选 | 第24-25页 |
3.2 突变体110-2-5形态特征分析 | 第25-26页 |
3.3 110-2-5突变体群体重测序与候选基因功能研究 | 第26-33页 |
3.3.1 野生型和110-2-5突变体混池重测序和SNP位点分析 | 第26页 |
3.3.2 ED关联分析 | 第26-27页 |
3.3.3 MutMap+分析 | 第27-28页 |
3.3.4 110-2-5候选基因筛选 | 第28-29页 |
3.3.5 Seita.6G095400基因序列分析 | 第29页 |
3.3.6 水稻同源基因功能研究 | 第29-31页 |
3.3.7 Seita.6G095400基因SNP分析 | 第31页 |
3.3.8 单倍型分析 | 第31-32页 |
3.3.9 Seita.6G095400组织表达分析 | 第32-33页 |
3.4 突变体差异基因的表达 | 第33-40页 |
3.4.1 转录组测序分析 | 第33-35页 |
3.4.2 转录组测序质量评估 | 第35-36页 |
3.4.3 新基因发掘与功能注释 | 第36-37页 |
3.4.4 已注释基因结构的优化 | 第37-38页 |
3.4.5 差异表达的基因 | 第38-40页 |
3.5 FT基因的克隆及其在拟南芥中的过量表达 | 第40-43页 |
3.5.1 豫谷FT基因的扩增 | 第40-41页 |
3.5.2 pBA-Si4G180200和pBA-Si4G122200载体的构建 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
4.1 110-2-5是谷子株型相关的多效性突变体 | 第43页 |
4.2 热激蛋白功能的研究 | 第43-44页 |
4.3 FT基因的过表达载体的构建及其功能 | 第44页 |
4.4 谷子新基因的发掘和基因结构的优化 | 第44页 |
4.5 本试验未来的设想 | 第44-45页 |
5 全文结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
Abstract | 第53-54页 |
研究生期间发表论文 | 第55-57页 |
致谢 | 第57页 |