摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第13-30页 |
1.1 前言 | 第13页 |
1.2 研究背景 | 第13-18页 |
1.2.1 培南类药物 | 第13-14页 |
1.2.2 培南类药物关键手性中间体4-AA | 第14-18页 |
1.2.2.1 以6-APA为起始原料 | 第15-16页 |
1.2.2.2 以L-苏氨酸为起始原料 | 第16页 |
1.2.2.3 以3-羟基丁酸酯为起始原料 | 第16-17页 |
1.2.2.4 以1,3-丁二醇为起始原料 | 第17页 |
1.2.2.5 以乙酰乙酸乙酯为起始原料 | 第17-18页 |
1.3 国内外研究现状及趋势 | 第18-22页 |
1.3.1 化学催化研究现状 | 第19-20页 |
1.3.2 生物催化研究现状 | 第20-22页 |
1.4 微生物不对称催化反应立体选择性的影响因素 | 第22-25页 |
1.4.1 添加合适的辅助底物 | 第22页 |
1.4.2 选择合适的抑制剂 | 第22-23页 |
1.4.3 预热处理 | 第23页 |
1.4.4 选择合适的表面活性剂 | 第23页 |
1.4.5 底物的添加方式 | 第23-24页 |
1.4.6 细胞生理状态 | 第24页 |
1.4.7 选择合适的反应介质 | 第24-25页 |
1.5 本论文的研究内容 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-30页 |
第二章 羰基还原酶产生菌的筛选 | 第30-43页 |
2.1 引言 | 第30页 |
2.2 材料与方法 | 第30-35页 |
2.2.1 实验仪器与试剂 | 第30-31页 |
2.2.3 土样与菌种 | 第31-32页 |
2.2.4 培养基 | 第32页 |
2.2.4.1 富集培养基 | 第32页 |
2.2.4.2 斜面培养基 | 第32页 |
2.2.4.3 种子培养基 | 第32页 |
2.2.4.4 发酵培养基 | 第32页 |
2.2.5 分析方法的建立 | 第32-33页 |
2.2.5.1 样品的表征 | 第32页 |
2.2.5.2 非手性分析方法的建立 | 第32-33页 |
2.2.5.3 手性分析方法建立 | 第33页 |
2.2.6 菌种筛选 | 第33页 |
2.2.7 形态观察 | 第33页 |
2.2.8 菌种生理生化鉴定 | 第33-34页 |
2.2.9 菌种分子鉴定 | 第34-35页 |
2.3 结果与讨论 | 第35-41页 |
2.3.1 产物的表征 | 第35-36页 |
2.3.1.1 产物MS分析 | 第35-36页 |
2.3.1.2 产物旋光度分析 | 第36页 |
2.3.2 分析方法 | 第36-38页 |
2.3.2.1 产物的非手性分析 | 第36-37页 |
2.3.2.2 产物的手性分析 | 第37-38页 |
2.3.3 菌种的筛选结果 | 第38-41页 |
2.3.3.1 实验室及现有菌种筛选结果 | 第38-39页 |
2.3.3.2 土壤中菌种筛选结果 | 第39-41页 |
2.3.4 筛菌小结 | 第41页 |
2.4 本章小结 | 第41页 |
参考文献 | 第41-43页 |
第三章 B.gladioli ZJB-12126产酶条件研究 | 第43-57页 |
3.1 前言 | 第43页 |
3.2 材料与方法 | 第43-44页 |
3.2.1 菌种 | 第43页 |
3.2.2 实验仪器与试剂 | 第43页 |
3.2.3 培养基 | 第43页 |
3.2.4 菌体培养 | 第43-44页 |
3.2.5 生物量测定 | 第44页 |
3.2.6 酶活测定 | 第44页 |
3.2.7 液相色谱分析方法 | 第44页 |
3.3 结果与讨论 | 第44-55页 |
3.3.1 培养基组分优化 | 第44-51页 |
3.3.1.1 碳源的选择及浓度确定 | 第44-46页 |
3.3.1.2 氮源的选择及浓度的确定 | 第46-48页 |
3.3.1.3 KH_2PO_4浓度对生长及产酶的影响 | 第48-49页 |
3.3.1.4 MgSO_4浓度对生长及产酶的影响 | 第49-50页 |
3.3.1.5 NaCl浓度对生长及产酶的影响 | 第50页 |
3.3.1.6 金属离子对生长及产酶的影响 | 第50-51页 |
3.3.2 其他培养条件对生长及产酶的影响 | 第51-54页 |
3.3.2.1 培养基初始pH对生长及产酶的影响 | 第51-52页 |
3.3.2.2 温度对生长及产酶的影响 | 第52-53页 |
3.3.2.3 接种量对生长及产酶的影响 | 第53页 |
3.3.2.4 装液量对生长及产酶的影响 | 第53-54页 |
3.3.3 B.gladioli ZJB-12126生长及发酵产酶的过程 | 第54-55页 |
3.3.4 B.gladioli ZJB-12126不对称催化反应进程 | 第55页 |
3.4 小结 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-57页 |
第四章 B.gladioli ZJB-12126全细胞不对称催化反应的立体选择性研究 | 第57-70页 |
4.1 前言 | 第57页 |
4.2 材料与方法 | 第57-59页 |
4.2.1 菌种 | 第57页 |
4.2.2 实验仪器与试剂 | 第57页 |
4.2.3 培养基 | 第57-58页 |
4.2.4 细胞培养 | 第58页 |
4.2.5 静息细胞转化 | 第58-59页 |
4.2.6 液相色谱分析方法 | 第59页 |
4.3 结果与讨论 | 第59-68页 |
4.3.1 反应温度对立体选择性的影响 | 第59-60页 |
4.3.2 反应体系pH对立体选择性的影响 | 第60-61页 |
4.3.3 辅助底物对立体选择性的影响 | 第61-62页 |
4.3.4 助溶剂对立体选择性的影响 | 第62-63页 |
4.3.5 抑制剂对立体选择性的影响 | 第63-64页 |
4.3.6 表面活性剂对立体选择性的影响 | 第64-65页 |
4.3.7 金属离子对立体选择性的影响 | 第65-66页 |
4.3.8 热处理对立体选择性的影响 | 第66-68页 |
4.3.8.1 热处理温度对立体选择性的影响 | 第66页 |
4.3.8.2 热处理时间对立体选择性的影响 | 第66-68页 |
4.4 本章小结 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-70页 |
第五章 B.gladioli ZJB-12126全细胞不对称催化体系反应条件研究 | 第70-82页 |
5.1 前言 | 第70页 |
5.2 材料与方法 | 第70-72页 |
5.2.1 菌种 | 第70页 |
5.2.2 培养基 | 第70-71页 |
5.2.3 细胞培养 | 第71页 |
5.2.4 静息细胞转化 | 第71-72页 |
5.3 结果与讨论 | 第72-80页 |
5.3.1 辅助底物浓度对反应的影响 | 第72-73页 |
5.3.2 细胞浓度对反应的影响 | 第73页 |
5.3.3 底物浓度对反应的影响 | 第73-74页 |
5.3.4 相同S/C下不同底物浓度对反应的影响 | 第74-75页 |
5.3.5 产物浓度对反应的影响 | 第75-76页 |
5.3.6 底物补加对反应的影响 | 第76-77页 |
5.3.7 正交试验优化反应条件 | 第77-79页 |
5.3.8 B.gladioli ZJB-12126水相不对称催化反应进程 | 第79-80页 |
5.3.9 两相体系研究 | 第80页 |
5.4 本章小结 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-82页 |
第六章 结论与展望 | 第82-84页 |
6.1 结论 | 第82-83页 |
6.2 展望 | 第83-84页 |
附录 | 第84-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第88页 |