| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 小鼠胚胎干细胞研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 早期胚胎发育与胚层分化 | 第13-15页 |
| 1.1.2 小鼠多能干细胞研究进展 | 第15-17页 |
| 1.1.3 与小鼠胚胎干细胞多能性维持相关的信号通路 | 第17-18页 |
| 1.2 小鼠上胚层干细胞的研究进展 | 第18-23页 |
| 1.2.1 小鼠上胚层干细胞研究背景 | 第18-19页 |
| 1.2.2 小鼠上胚层干细胞研究相关信号通路 | 第19-23页 |
| 第二章 类上胚层干细胞的建立 | 第23-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.2 实验设备及耗材 | 第23页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-39页 |
| 2.2.1 培养液的配制 | 第24-26页 |
| 2.2.2 小鼠类上胚层干细胞的建立 | 第26-29页 |
| 2.2.3 小鼠类上胚层干细胞的初步鉴定 | 第29-39页 |
| 2.3 实验结果 | 第39-45页 |
| 2.3.1 小鼠类上胚层干细胞系的建立 | 第39页 |
| 2.3.2 形态鉴定和碱性磷酸酶染色结果 | 第39-41页 |
| 2.3.3 染色体、生长特性的分析 | 第41-42页 |
| 2.3.4 免疫荧光染色和qRT-PCR分析 | 第42-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-46页 |
| 第三章 Act A对AF/SCs的影响 | 第46-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第46页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第46页 |
| 3.1.2 实验耗材及设备 | 第46页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-49页 |
| 3.2.1 培养液的配制 | 第46-47页 |
| 3.2.2 AF/SCs细胞系的诱导 | 第47页 |
| 3.2.3 诱导后细胞系的初步鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2.4 在AF-4A/SCs中脂质体转染td Tomato质粒 | 第48页 |
| 3.2.5 嵌合体小鼠的制备及检测 | 第48页 |
| 3.2.6 E6.5小鼠胚胎的分离 | 第48-49页 |
| 3.3 实验结果 | 第49-54页 |
| 3.3.1 形态特征和碱性磷酸酶染色结果 | 第49-51页 |
| 3.3.2 多能基因和分化基因表达结果 | 第51-52页 |
| 3.3.3 小鼠AF-4A/SCs体内发育潜能检测 | 第52-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第四章 Act A和BMP4共同作用对AF/SCs细胞的影响 | 第56-73页 |
| 4.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第56页 |
| 4.1.2 实验耗材及设备 | 第56页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第56-57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-61页 |
| 4.2.1 培养液的配制 | 第57-58页 |
| 4.2.2 AF/SCs向AF-AB/SCs、AF-AC/SCs及 AF-AL/SCs细胞系的诱导 | 第58页 |
| 4.2.3 诱导后细胞系的初步鉴定 | 第58-59页 |
| 4.2.4 嵌合体小鼠的制备(详细实验过程见3.2.5) | 第59页 |
| 4.2.5 体外胚胎培养及固定染色 | 第59-60页 |
| 4.2.6 E6.5胚胎的分离(详细实验过程见3.2.6) | 第60页 |
| 4.2.7 转录组分析 | 第60-61页 |
| 4.3 实验结果 | 第61-71页 |
| 4.3.1 形态特征和碱性磷酸酶染色结果 | 第61-62页 |
| 4.3.2 诱导细胞系的多能性鉴定 | 第62-65页 |
| 4.3.3 诱导细胞系发育潜能检测 | 第65-68页 |
| 4.3.4 AF-AB/SCs和AF-AL/SCs的分子特征 | 第68-71页 |
| 4.4 讨论 | 第71-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
