摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
缩略语 | 第9-10页 |
第1章 引言 | 第10-13页 |
第2章 实验材料与方法 | 第13-22页 |
2.1 实验材料 | 第13-15页 |
2.1.1 主要试剂 | 第13-14页 |
2.1.2 主要试剂配制 | 第14页 |
2.1.3 主要仪器 | 第14-15页 |
2.2 实验方法 | 第15-18页 |
2.2.1 人卵巢颗粒细胞体外培养体系的建立 | 第15-17页 |
2.2.2 氯胺酮对人卵巢颗粒细胞体外培养的作用 | 第17-18页 |
2.3 实时荧光定量PCR法检测YAP和TAZ mRNA水平 | 第18-19页 |
2.3.1 RNA的提取 | 第18页 |
2.3.2 逆转录(RT)合成cDNA | 第18-19页 |
2.3.3 荧光实时定量PCR | 第19页 |
2.4 WESTERN BLOT检测YAP及TAZ的蛋白表达量 | 第19-21页 |
2.4.1 蛋白质的提取 | 第19-20页 |
2.4.2 蛋白质定量检测(BCA法) | 第20页 |
2.4.3 免疫蛋白印迹操作 | 第20-21页 |
2.5 统计学分析 | 第21-22页 |
第3章 实验结果 | 第22-31页 |
3.1 颗粒细胞生长特点 | 第22页 |
3.2 细胞鉴定 | 第22-23页 |
3.3 细胞生长曲线 | 第23页 |
3.4 颗粒细胞体外染毒形态学变化 | 第23-24页 |
3.5 人卵巢颗粒细胞体外染毒凋亡检测 | 第24-28页 |
3.5.1 TUNEL染色法 | 第24-26页 |
3.5.2 流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双染法 | 第26-28页 |
3.6 氯胺酮对颗粒细胞的YAP、TAZ的MRNA表达的影响 | 第28-29页 |
3.7 人卵巢颗粒细胞经氯胺酮作用后对YAP、TAZ蛋白表达的影响 | 第29-31页 |
第4章 讨论 | 第31-36页 |
第5章 结论与展望 | 第36-37页 |
致谢 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第43-44页 |
综述 | 第44-55页 |
参考文献 | 第50-55页 |