| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-25页 |
| ·Th17细胞 | 第17-20页 |
| ·Th17细胞简介 | 第17-18页 |
| ·Th17细胞和类风湿关节炎的关系 | 第18-19页 |
| ·Th17细胞、Treg细胞以及Th1细胞间的关系 | 第19-20页 |
| ·GITR/GITRL | 第20-22页 |
| ·GITRL和GITR分子简介 | 第20-21页 |
| ·GITRL/GITR与自身免疫性疾病的关系 | 第21-22页 |
| ·本论文研究的目的、方法、实验方案的设计、意义 | 第22-25页 |
| ·研究目的 | 第22页 |
| ·研究方法 | 第22页 |
| ·实验设计 | 第22-24页 |
| ·本研究的意义 | 第24-25页 |
| 第二章 mGITRL蛋白的表达纯化及多克隆抗体的制备 | 第25-31页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·溶液 | 第25页 |
| ·质粒载体和菌株 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-28页 |
| ·mGITRL重组蛋白、对照蛋白的诱导表达 | 第25-26页 |
| ·mGITRL重组蛋白的鉴定 | 第26-27页 |
| ·mGITRL重组蛋白、对照蛋白的纯化 | 第27页 |
| ·去除重组蛋白中的内毒素 | 第27页 |
| ·免疫家兔 | 第27-28页 |
| ·兔抗小鼠GITRL抗血清效价和特异性的测定 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-29页 |
| ·mGITRL重组蛋白的诱导表达、纯化及鉴定 | 第28-29页 |
| ·兔抗小鼠GITRL多克隆抗体效价和特异性的测定 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 mGITRL蛋白对小鼠Th17细胞的影响 | 第31-42页 |
| ·材料和方法 | 第31-32页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·溶液的配制 | 第31-32页 |
| ·mGITRL蛋白及对照蛋白制备 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·小鼠CD4~+T细胞的分离 | 第32页 |
| ·Th17细胞的体外诱导 | 第32-33页 |
| ·Th17细胞胞内细胞因子染色 | 第33页 |
| ·ELISA法检测培养上清中的IL-17A | 第33页 |
| ·小鼠体内注射mGITRL蛋白 | 第33页 |
| ·小鼠脾脏中Th17细胞的检测 | 第33-34页 |
| ·小鼠脾脏中CD4~+ROR γ t~+T细胞的检测 | 第34页 |
| ·小鼠血清中的IL-17的检测 | 第34页 |
| ·统计分析 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-40页 |
| ·小鼠CD4~+T细胞的分离鉴定 | 第34-35页 |
| ·mGITRL在体外对Th17细胞的诱导培养具有增强作用 | 第35-36页 |
| ·mGITRL在体外对Th17细胞的增强作用具有浓度依赖性 | 第36-37页 |
| ·mGITRL促进小鼠脾脏中Th17细胞比例增加 | 第37-38页 |
| ·mGITRL促进小鼠脾脏中CD4~+ROR γ t~+T细胞比例增加 | 第38-39页 |
| ·mGITRL促进小鼠血清中IL-17水平增高 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 mGITRL蛋白对胶原诱导性关节炎小鼠的影响 | 第42-54页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·mGITRL蛋白及对照蛋白制备 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-44页 |
| ·小鼠CIA模型建立及分组处理 | 第42-43页 |
| ·模型观察指标及评价方法 | 第43页 |
| ·关节组织病理学检查及评价方法 | 第43页 |
| ·小鼠脾细胞分离 | 第43页 |
| ·小鼠腹壁及胭窝淋巴结细胞分离 | 第43-44页 |
| ·Th17细胞胞内细胞因子染色 | 第44页 |
| ·小鼠淋巴结中CD4~+ROR γ t~+T细胞的检测 | 第44页 |
| ·小鼠血清中的IL-17的检测 | 第44页 |
| ·统计分析 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-52页 |
| ·mGITRL可以加速小鼠CIA发病过程 | 第44-46页 |
| ·mGITRL可以加重小鼠CIA发病程度 | 第46-47页 |
| ·mGITRL对CIA小鼠脾脏中Th17细胞的影响 | 第47-49页 |
| ·mGITRL对CIA小鼠淋巴结中Th17细胞的影响 | 第49-51页 |
| ·mGITRL对CIA小鼠淋巴结中CD4~+ROR γ t~+T细胞比例的影响 | 第51-52页 |
| ·mGITRL促进CIA小鼠血清中IL-17水平增高 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 主要结论及展望 | 第54-55页 |
| ·主要结论 | 第54页 |
| ·展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 缩略词 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第66页 |
