| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略表 | 第15-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-30页 |
| 1.1 熊蜂的生物学特性 | 第16-17页 |
| 1.1.1 熊蜂的生活史 | 第16-17页 |
| 1.1.2 熊蜂的生殖方式 | 第17页 |
| 1.2 影响熊蜂蜂王产卵的因素 | 第17-19页 |
| 1.2.1 营养因素 | 第17-18页 |
| 1.2.2 环境因素 | 第18页 |
| 1.2.3 激素 | 第18-19页 |
| 1.3 昆虫卵黄原蛋白研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.1 卵黄原蛋白在膜翅目昆虫中的表达概况 | 第19-21页 |
| 1.3.2 卵黄原蛋白与激素的关系 | 第21页 |
| 1.4 基因转录调控的机制 | 第21-28页 |
| 1.4.1 真核生物启动子的类型 | 第21-22页 |
| 1.4.2 预测启动子上的转录因子结合位点的数据库 | 第22页 |
| 1.4.3 研究启动子的方法 | 第22-24页 |
| 1.4.4 昆虫相关的特异转录调控元件 | 第24-26页 |
| 1.4.5 卵黄原蛋白基因的转录调控 | 第26-28页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第28-30页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第28-29页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第29-30页 |
| 第二章 兰州熊蜂卵黄原蛋白基因的研究 | 第30-44页 |
| 2.1 材料与方法 | 第30-38页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第30页 |
| 2.1.2 试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.3 试剂的配制 | 第31页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第31-32页 |
| 2.1.5 引物设计 | 第32页 |
| 2.1.6 模板的制备 | 第32-35页 |
| 2.1.7 PCR扩增、回收、连接、转化 | 第35-37页 |
| 2.1.8 荧光定量PCR反应 | 第37页 |
| 2.1.9 序列测定及分析 | 第37-38页 |
| 2.1.10 数据处理与统计学分析 | 第38页 |
| 2.2 结果 | 第38-42页 |
| 2.2.1 兰州熊蜂卵黄原蛋白基因的特征 | 第38-39页 |
| 2.2.2 兰州熊蜂卵黄原蛋白基因的系统进化分析 | 第39-41页 |
| 2.2.3 兰州熊蜂蜂王卵黄原蛋白的表达量 | 第41-42页 |
| 2.3 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 兰州熊蜂Broad-Complex的研究 | 第44-54页 |
| 3.1 材料与方法 | 第44-49页 |
| 3.1.1 供试昆虫 | 第44页 |
| 3.1.2 试剂 | 第44页 |
| 3.1.3 试剂的配制 | 第44页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第44页 |
| 3.1.5 模板的制备 | 第44页 |
| 3.1.6 引物的设计 | 第44-46页 |
| 3.1.7 目的基因Broad-Complex的克隆 | 第46页 |
| 3.1.8 荧光定量 | 第46页 |
| 3.1.9 提取转染细胞的无内毒素质粒 | 第46-47页 |
| 3.1.10 细胞的复苏、传代及培养 | 第47页 |
| 3.1.11 脂质体转染昆虫细胞的方法 | 第47-48页 |
| 3.1.12 Western Blot检测 | 第48-49页 |
| 3.2 结果 | 第49-52页 |
| 3.2.1 兰州熊蜂Broad-Complex基因的特征 | 第49-50页 |
| 3.2.2 兰州熊蜂蜂王Broad-Complex在卵巢中的表达量 | 第50-51页 |
| 3.2.3 兰州熊蜂Broad-Complex重组质粒的构建 | 第51-52页 |
| 3.2.4 兰州熊蜂Broad-Complex的真核表达 | 第52页 |
| 3.3 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 兰州熊蜂卵黄原蛋白基因的转录调控 | 第54-86页 |
| 4.1 材料与方法 | 第54-64页 |
| 4.1.1 试虫、细胞和质粒 | 第54页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第54-55页 |
| 4.1.3 主要实验仪器 | 第55页 |
| 4.1.4 兰州熊蜂卵黄原蛋白Vg基因启动子的克隆 | 第55-60页 |
| 4.1.5 构建pGL4-Vg-Promoter重组质粒 | 第60-61页 |
| 4.1.6 pGL4-Vg-Promoter重组质粒的鉴定 | 第61页 |
| 4.1.7 提取转染细胞的无内毒素质粒 | 第61页 |
| 4.1.8 细胞的复苏、传代及培养 | 第61页 |
| 4.1.9 脂质体转染昆虫细胞的方法 | 第61-62页 |
| 4.1.10 荧光素酶检测方法 | 第62-63页 |
| 4.1.11 启动子活性检测条件的优化 | 第63-64页 |
| 4.1.12 激素对pGL4-Vg-promoter启动子活性的诱导 | 第64页 |
| 4.1.13 转录因子BlBrC的点突变 | 第64页 |
| 4.1.14 数据分析 | 第64页 |
| 4.2 结果 | 第64-84页 |
| 4.2.1 兰州熊蜂Vg基因缺失启动子片段的克隆结果 | 第64-75页 |
| 4.2.2 构建pGL4-BlVg-promoter重组质粒的结果 | 第75-78页 |
| 4.2.3 提取无内毒素质粒并定量结果 | 第78-79页 |
| 4.2.4 启动子活性检测条件的优化 | 第79-81页 |
| 4.2.5 BlVg启动子对激素信号的响应 | 第81-82页 |
| 4.2.6 转录因子BlBrC对BlVg启动子活性的影响 | 第82-83页 |
| 4.2.7 点突变BrC-Z3元件对BlVg启动子活性的影响 | 第83-84页 |
| 4.3 讨论 | 第84-86页 |
| 全文总结 | 第86-87页 |
| 创新之处 | 第87-88页 |
| 不足之处与展望 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-102页 |
| 附录 | 第102-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 博士后期间发表的文章情况 | 第107-108页 |
| 个人简历 | 第108页 |
