| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 微生物次级代谢 | 第13-18页 |
| 1.1.1 聚酮合成酶 | 第13-15页 |
| 1.1.2 非核糖体多肽合成酶 | 第15-18页 |
| 1.2 次级代谢产物的遗传改造 | 第18-21页 |
| 1.2.1 启动子优化 | 第18-19页 |
| 1.2.2 转录调控 | 第19-20页 |
| 1.2.3 异源表达 | 第20-21页 |
| 1.3 基因簇克隆与表达 | 第21-24页 |
| 1.3.1 基因组文库策略 | 第21页 |
| 1.3.2 同源重组策略 | 第21-24页 |
| 1.4 本课题的研究目的及意义 | 第24-25页 |
| 2 iTAR系统构建 | 第25-56页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-43页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第25-26页 |
| 2.1.2 引物 | 第26-27页 |
| 2.1.3 生化试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.4 抗生素 | 第28-29页 |
| 2.1.5 仪器与设备 | 第29-30页 |
| 2.1.6 培养基 | 第30-31页 |
| 2.1.7 常用溶液配制 | 第31-33页 |
| 2.1.8 分子生物学操作 | 第33-43页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第43-55页 |
| 2.2.1 重组载体pSHTB10的构建 | 第43-47页 |
| 2.2.2 重组菌株E. coli BL21-hyg~R的构建 | 第47-49页 |
| 2.2.3 含hyg~R大片段DNA的制备及其iTAR克隆 | 第49-51页 |
| 2.2.4 iTAR克隆效率的影响因素 | 第51-55页 |
| 2.3 本章小结 | 第55-56页 |
| 3 Polymyxin基因簇的克隆 | 第56-66页 |
| 3.1 材料与方法 | 第56-59页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第56-57页 |
| 3.1.2 引物 | 第57页 |
| 3.1.3 生化试剂 | 第57页 |
| 3.1.4 抗生素 | 第57-58页 |
| 3.1.5 仪器与设备 | 第58页 |
| 3.1.6 培养基 | 第58页 |
| 3.1.7 常用溶液配制 | 第58页 |
| 3.1.8 分子生物学操作 | 第58页 |
| 3.1.9 代谢分析 | 第58-59页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第59-65页 |
| 3.2.1 Polymyxin基因簇结构分析 | 第59-60页 |
| 3.2.2 Polymyxin基因簇的克隆与表达 | 第60-63页 |
| 3.2.3 生物测试与代谢分析 | 第63-65页 |
| 3.3 本章小结 | 第65-66页 |
| 4 结论与展望 | 第66-68页 |
| 4.1 结论 | 第66-67页 |
| 4.2 展望 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 附录 | 第77页 |