| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 前言 | 第10-17页 |
| 1.1 亲和沉淀 | 第10-14页 |
| 1.1.1 亲和沉淀技术简介 | 第10-11页 |
| 1.1.2 亲和载体 | 第11-12页 |
| 1.1.3 亲和配基 | 第12-14页 |
| 1.1.4 亲和沉淀技术的应用 | 第14页 |
| 1.2 胰岛素及其分离纯化研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.1 胰岛素简介 | 第14-15页 |
| 1.2.2 胰岛素分离纯化研究进展 | 第15页 |
| 1.3 本课题研究的内容与意义 | 第15-17页 |
| 第2章 pH敏感聚合物P_(MMDN)的合成与表征 | 第17-26页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第17-20页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第18页 |
| 2.2.3 P_(MMDN)聚合物的合成 | 第18页 |
| 2.2.4 聚合物的等电点及回收率的测定 | 第18-19页 |
| 2.2.5 聚合物的粘度与分子量测定 | 第19-20页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第20-25页 |
| 2.3.1 聚合物合成结果 | 第20-22页 |
| 2.3.2 聚合物的等电点及回收率 | 第22-23页 |
| 2.3.3 聚合物的粘均量与分子量 | 第23-25页 |
| 2.4 小结 | 第25-26页 |
| 第3章 聚合物的活化与配基连接 | 第26-32页 |
| 3.1 引言 | 第26页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第26-28页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第26-27页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第27页 |
| 3.2.3 聚合物的活化与配基连接 | 第27-28页 |
| 3.2.4 共聚物与聚合物的结构表征 | 第28页 |
| 3.2.5 共聚物中锌离子的定性测定 | 第28页 |
| 3.2.6 共聚物中金属配基密度的测定 | 第28页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第28-31页 |
| 3.3.1 聚合物的活化反应式和螯合反应式 | 第28-29页 |
| 3.3.2 聚合物与共聚物的红外光图谱 | 第29-30页 |
| 3.3.3 共聚物中金属离子的定性表征 | 第30页 |
| 3.3.4 不同浓度活化剂与配基密度的关系 | 第30-31页 |
| 3.4 小结 | 第31-32页 |
| 第4章 亲和沉淀分离纯化胰岛素 | 第32-55页 |
| 4.1 引言 | 第32页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第32-33页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第32-33页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第33页 |
| 4.3 亲和沉淀的吸附反应 | 第33-36页 |
| 4.3.1 共聚物、胰岛素、共聚物-胰岛素的差异性研究 | 第34页 |
| 4.3.2 胰岛素全波长扫描和标准曲线的绘制 | 第34页 |
| 4.3.3 不同反应时间对吸附的影响 | 第34-35页 |
| 4.3.4 不同pH值的缓冲液对吸附的影响 | 第35页 |
| 4.3.5 不同的盐离子浓度对吸附的影响 | 第35页 |
| 4.3.6 不同的胰岛素初始加入量对吸附的影响 | 第35页 |
| 4.3.7 不同的配基密度对吸附的影响 | 第35页 |
| 4.3.8 配基对胰岛素结构的影响 | 第35-36页 |
| 4.4 亲和沉淀的洗脱反应 | 第36-37页 |
| 4.4.1 共聚物吸附与洗脱后的红外图谱 | 第36页 |
| 4.4.2 洗脱剂对洗脱的影响 | 第36页 |
| 4.4.3 溶剂对洗脱的影响 | 第36-37页 |
| 4.4.4 盐离子对洗脱的影响 | 第37页 |
| 4.4.5 洗脱后胰岛素的效价测定 | 第37页 |
| 4.4.6 共聚物的回收循环利用 | 第37页 |
| 4.5 结果与讨论: | 第37-53页 |
| 4.5.1 亲和沉淀-吸附阶段 | 第37-44页 |
| 4.5.1.1 DLS检测粒径结果 | 第37-39页 |
| 4.5.1.2 胰岛素的全波长扫描结果与标准曲线图 | 第39-40页 |
| 4.5.1.3 反应时间与吸附的关系 | 第40-41页 |
| 4.5.1.4 不同pH值的磷酸盐缓冲液对吸附的影响 | 第41-42页 |
| 4.5.1.5 不同浓度Na_2SO_4对吸附的影响 | 第42页 |
| 4.5.1.6 吸附等温线的确定 | 第42-43页 |
| 4.5.1.7 不同的配基密度与吸附的关系 | 第43-44页 |
| 4.5.1.8 配基对胰岛素结构的影响 | 第44页 |
| 4.5.2 亲和沉淀-洗脱阶段 | 第44-53页 |
| 4.5.2.1 吸附和洗脱后共聚物的红外图谱 | 第44-46页 |
| 4.5.2.2 不同种类洗脱剂洗脱效果 | 第46-47页 |
| 4.5.2.3 不同缓冲液的洗脱效果 | 第47页 |
| 4.5.2.4 不同pH值的PBS对洗脱的影响 | 第47-48页 |
| 4.5.2.5 溶剂与洗脱剂组成洗脱的结果 | 第48-49页 |
| 4.5.2.6 最佳溶剂浓度的确定 | 第49页 |
| 4.5.2.7 NaCl对洗脱的影响 | 第49-50页 |
| 4.5.2.8 不同种类盐对洗脱的影响 | 第50页 |
| 4.5.2.9 最佳盐浓度的确定 | 第50-51页 |
| 4.5.2.10 HPLC法测定吸附洗脱后胰岛素效价结果 | 第51-53页 |
| 4.5.2.11 共聚物循环使用次数 | 第53页 |
| 4.6 小结 | 第53-55页 |
| 第5章 总结与展望 | 第55-57页 |
| 5.1 总结 | 第55页 |
| 5.2 展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附件 | 第62页 |
