| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 未知功能基因的一般研究方法 | 第10-11页 |
| 1.1.1 生物信息学方法的运用 | 第10-11页 |
| 1.1.2 突变体在基因功能研究中的作用 | 第11页 |
| 1.2 不同环境因子对植物生长的影响 | 第11-14页 |
| 1.2.1 非生物胁迫对植物的影响 | 第11-13页 |
| 1.2.3 生物胁迫对植物的影响 | 第13-14页 |
| 1.3 蛋白功能鉴定研究背景和目的 | 第14-17页 |
| 1.3.1 酵母双杂交技术的原理和运用 | 第14-16页 |
| 1.3.2 GST-Pull down技术的原理和运用 | 第16-17页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第17-20页 |
| 1.4.1 拟南芥AT2G17350基因的来源 | 第17页 |
| 1.4.2 研究内容和意义 | 第17-20页 |
| 第2章 拟南芥AT2G17350基因的克隆和表达分析 | 第20-28页 |
| 2.1 实验材料、试剂及主要实验仪器 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第20页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 拟南芥种植 | 第22页 |
| 2.2.2 实验材料处理 | 第22-23页 |
| 2.2.3 拟南芥总RNA提取和AT2G17350的克隆 | 第23页 |
| 2.2.4 不同处理下AT2G17350表达水平的PCR检测 | 第23-24页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第24-28页 |
| 2.3.1 AT2G17350基因的克隆 | 第24-25页 |
| 2.3.2 基因表达分析 | 第25-28页 |
| 第3章 相互作用的四条基因克隆和分析 | 第28-38页 |
| 3.1 实验材料,试剂和仪器 | 第28页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第28页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-29页 |
| 3.2.1 RNA的提取和基因克隆 | 第28-29页 |
| 3.2.2 生物信息学分析 | 第29页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第29-38页 |
| 3.3.1 MAD2、CHY、IMPA-2、IMPA-3的克隆和分析 | 第29-33页 |
| 3.3.2 MAD2、CHY、IMPA-2、IMPA-3的生物信息学分析 | 第33-35页 |
| 3.3.3 互作关系网络分析 | 第35-38页 |
| 第4章 相互作用研究 | 第38-52页 |
| 4.1 实验材料,试剂和仪器 | 第38-40页 |
| 4.1.1 菌株及载体 | 第38页 |
| 4.1.2 试剂 | 第38-39页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第39-40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-47页 |
| 4.2.1 酵母双杂交载体的构建 | 第40-41页 |
| 4.2.2 酵母菌株的检测 | 第41页 |
| 4.2.3 小量酵母感受态制备和转化 | 第41页 |
| 4.2.4 自激活检测 | 第41-42页 |
| 4.2.5 DNA-BD融合蛋白的毒性检测 | 第42页 |
| 4.2.6 实验组的设置及共转化 | 第42页 |
| 4.2.7 原核表达载体构建 | 第42-45页 |
| 4.2.8 蛋白的提取和裂解及孵育 | 第45-47页 |
| 4.2.9 SDS-PAGE蛋白电泳检测 | 第47页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第47-52页 |
| 4.3.1 酵母菌株的检测 | 第47-48页 |
| 4.3.2 诱饵质粒自激活检测 | 第48页 |
| 4.3.3 融合蛋白的毒性检测 | 第48-49页 |
| 4.3.4 酵母双杂交互作结果 | 第49-50页 |
| 4.3.5 原核表达载体的构建 | 第50-51页 |
| 4.3.6 GST-pull down结果 | 第51-52页 |
| 第5章 五条基因在突变体中的表达和部分有丝分裂相关基因关系的初探 | 第52-62页 |
| 5.1 实验材料,试剂和仪器 | 第52页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第52页 |
| 5.1.2 试剂 | 第52页 |
| 5.1.3 仪器 | 第52页 |
| 5.2 实验方法 | 第52-54页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第54-62页 |
| 5.3.1 四条相关基因分别在不同组织和突变体中的表达量 | 第54-57页 |
| 5.3.2 有丝分裂相关基因在突变体中的表达量 | 第57-62页 |
| 第6章 讨论与结论 | 第62-66页 |
| 6.1 讨论 | 第62-64页 |
| 6.2 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第76页 |
