| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-19页 |
| 1 巴西橡胶树主要病害及危害 | 第10-11页 |
| 2 植物抗病机制研究进展 | 第11-13页 |
| 2.1 植物的抗病性及先天免疫系统 | 第11-12页 |
| 2.2 植物抗病信号传递途径研究进展 | 第12-13页 |
| 3 植物抗白粉病机制研究 | 第13-14页 |
| 4 ARF-GEF基因家族的研究进展 | 第14-15页 |
| 4.1 ARF-GEF家族基因的结构特点及其理化性质 | 第14-15页 |
| 4.2 ARF-GEF家族基因的生物学功能研究 | 第15页 |
| 4.3 GNOM蛋白的研究进展情况 | 第15页 |
| 5 植物类受体激酶研究进展 | 第15-17页 |
| 5.1 植物类受体激酶的结构特点及其理化性质 | 第15-16页 |
| 5.2 CrRLK1-Like亚家族类受体激酶 | 第16页 |
| 5.3 植物类受体激酶在植物抗病中的功能研究 | 第16-17页 |
| 5.4 FER蛋白的研究进展 | 第17页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 7 技术路线 | 第18-19页 |
| 第一章 巴西橡胶树ADP核糖基化因子的鸟苷酸交换因子基因HbGNOM的克隆及其初步功能分析 | 第19-36页 |
| 1 材料与方法 | 第19-25页 |
| 1.1 实验材料和试剂 | 第19-20页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第19-20页 |
| 1.2 实验方法 | 第20-25页 |
| 1.2.1 橡胶树HbGNOM基因的克隆 | 第20页 |
| 1.2.2 HbGNOM基因的生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 1.2.3 HbGNOM基因的表达分析 | 第21-22页 |
| 1.2.3.1 炭疽病菌接种橡胶树叶片 | 第21页 |
| 1.2.3.2 白粉病菌接种橡胶树叶片 | 第21页 |
| 1.2.3.3 不同信号分子对橡胶树的处理 | 第21页 |
| 1.2.3.4 RT-PCR半定量分析 | 第21-22页 |
| 1.2.4 HbGNOM的亚细胞定位 | 第22页 |
| 1.2.4.1 原生质体亚细胞定位载体(pUC19-35s-HbGNOM-GFP)的构建 | 第22页 |
| 1.2.4.2 橡胶树叶肉原生质体的制备以及转化 | 第22页 |
| 1.2.4.3 利用激光共聚焦显微镜观察亚细胞定位 | 第22页 |
| 1.2.5 转基因拟南芥的获得 | 第22-25页 |
| 1.2.5.1 植物表达载体(pCAMBIA 99-1-HbGNOM-3×HA)的构建 | 第22-23页 |
| 1.2.5.2 植物表达载体转化农杆菌感受态细胞 | 第23页 |
| 1.2.5.3 农杆菌转化子的鉴定 | 第23页 |
| 1.2.5.4 浸泡注柱头法转化拟南芥 | 第23-24页 |
| 1.2.5.5 抗性植株的筛选 | 第24-25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-34页 |
| 2.1 HbGNOM基因的克隆 | 第25-26页 |
| 2.1.1 橡胶树叶片总RNA提取结果 | 第25页 |
| 2.1.2 HbGNOM基因片段全长的克隆 | 第25-26页 |
| 2.2 HbGNOM基因的生物信息学分析 | 第26-30页 |
| 2.3 HbGNOM基因的表达分析 | 第30-31页 |
| 2.3.1 HbGNOM基因对橡胶树白粉病菌和炭疽病菌侵染的应答 | 第30页 |
| 2.3.2 不同抗病信号分子处理对橡胶树叶片中HbGNOM基因表达的影响 | 第30-31页 |
| 2.4 HbGNOM在橡胶树中的亚细胞定位 | 第31-32页 |
| 2.4.1 亚细胞定位载体pUC19-35s-HbGNOM-GFP的构建 | 第31-32页 |
| 2.4.2 HbGNOM蛋白的亚细胞定位 | 第32页 |
| 2.5 转HbGNOM基因拟南芥株系的获得 | 第32-34页 |
| 2.5.1 HbGNOM植物表达载体的构建及鉴定 | 第32-33页 |
| 2.5.2 植物表达载体pCAMBIA-99-1-HbGNOM-3HA农杆菌转化子的鉴定 | 第33页 |
| 2.5.3 转HbGNOM基因拟南芥株系的获得 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-35页 |
| 4 结论 | 第35-36页 |
| 第二章 巴西橡胶树HbFER基因的功能分析 | 第36-47页 |
| 1 材料与方法 | 第36-39页 |
| 1.1 实验材料和试剂 | 第36页 |
| 1.2 实验方法 | 第36-37页 |
| 1.2.1 橡胶树HbFER基因的克隆 | 第36页 |
| 1.2.2 HbFER基因的表达分析 | 第36-37页 |
| 1.2.2.1 炭疽病菌和白粉病菌接种橡胶树叶片 | 第36-37页 |
| 1.2.2.2 不同信号分子对橡胶树的处理 | 第37页 |
| 1.2.2.3 RT-PCR半定量分析 | 第37页 |
| 1.2.3 HbFER的亚细胞定位 | 第37页 |
| 1.3 拟南芥T-DNA插入突变体fer基因型鉴定和表型分析 | 第37-38页 |
| 1.3.1 拟南芥DNA基因组的提取 | 第37页 |
| 1.3.2 拟南芥T-DNA插入纯合突变体fer的分子鉴定 | 第37页 |
| 1.3.3 fer纯合突变体的表型分析 | 第37-38页 |
| 1.4 转基因拟南芥的获得及鉴定 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-45页 |
| 2.1 巴西橡胶树HbFER基因的表达分析 | 第39-40页 |
| 2.1.1 HbFER基因对橡胶树胶胞炭疽病菌侵染的应答 | 第39页 |
| 2.1.2 HbFER基因对不同抗病信号分子的应答 | 第39-40页 |
| 2.2 HbFER在橡胶树中的亚细胞定位 | 第40-41页 |
| 2.2.1 亚细胞定位载体pUC19-35s-HbFER-GFP的构建 | 第40-41页 |
| 2.2.2 HbFER蛋白的亚细胞定位 | 第41页 |
| 2.3 拟南芥T-DNA插入突变体fer的鉴定和表型分析 | 第41-43页 |
| 2.3.1 fer突变体的分子鉴定 | 第41-42页 |
| 2.3.2 fer纯合突变体的表型分析 | 第42-43页 |
| 2.4 转HbFER基因拟南芥株系的获得 | 第43-45页 |
| 2.4.1 HbFER植物表达载体的构建及鉴定 | 第43页 |
| 2.4.2 植物表达载体pCAMBIA-1300-HbFER-3HA农杆菌转化子的鉴定 | 第43-44页 |
| 2.4.3 获得转基因拟南芥植株 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| 4 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 本研究资金来源 | 第56页 |
| 学术论文成果 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
