| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词 | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-20页 |
| 1.1 抗体结构简介 | 第11-12页 |
| 1.2 抗体分子的形式及其研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 单链抗体在大肠杆菌中的表达纯化 | 第13页 |
| 1.4 重组蛋白融合技术在大肠杆菌中的运用 | 第13-15页 |
| 1.4.1 重组蛋白融合技术的优点 | 第14页 |
| 1.4.2 重组蛋白融合技术的缺点 | 第14-15页 |
| 1.5 SUMO简介 | 第15-17页 |
| 1.6 SUMO蛋白酶简介 | 第17-18页 |
| 1.7 SUMO标签及SUMO蛋白酶Ulp1在大肠杆菌表达中的运用 | 第18页 |
| 1.8 HSA用于多肽药物半衰期的延长 | 第18-19页 |
| 1.9 课题研究内容 | 第19-20页 |
| 1.9.1 课题的来源和意义 | 第19页 |
| 1.9.2 本课题的主要研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 宿主菌及质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 实验主要试剂和仪器 | 第20-22页 |
| 2.1.3 主要溶液 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 抗HSA抗体的制备、纯化和检测 | 第23-25页 |
| 2.2.2 大肠杆菌感受态的制备 | 第25页 |
| 2.2.3 大肠杆菌表达scFv重组菌株的构建 | 第25-27页 |
| 2.2.4 大肠杆菌表达SUMO-scFv重组菌株的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.5 scFv和SUMO-scFv的表达 | 第28-29页 |
| 2.2.6 表达SUMO蛋白酶Ulp1菌株的构建、表达条件优化及表达量测定 | 第29-31页 |
| 2.2.7 SUMO蛋白酶Ulp1的Western blotting检测 | 第31页 |
| 2.2.8 SUMO蛋白酶Ulp1的纯化 | 第31页 |
| 2.2.9 Ulp1酶活测定及酶活特性分析 | 第31-34页 |
| 2.2.10 融合蛋白SUMO-scFv及scFv纯化 | 第34页 |
| 2.2.11 抗体建模 | 第34-35页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第35-51页 |
| 3.1 抗HSA抗体的制备及scFv的表达 | 第35-39页 |
| 3.1.1 抗HSA抗体的制备及亲和力检测 | 第35-36页 |
| 3.1.2 1H11抗体scFv的初步表达 | 第36-37页 |
| 3.1.3 融合蛋白SUMO-scFv的表达菌株构建 | 第37-38页 |
| 3.1.4 SUMO-scFv的表达和纯化 | 第38-39页 |
| 3.2 SUMO蛋白酶Ulp1的表达纯化及活性分析 | 第39-48页 |
| 3.2.1 表达Ulp1的重组菌株的构建 | 第39-41页 |
| 3.2.2 Ulp1的表达条件优化及Western blotting鉴定 | 第41-43页 |
| 3.2.3 SUMO蛋白酶Ulp1的纯化 | 第43-44页 |
| 3.2.4 Ulp1酶活测定底物SUMO-EGFP的表达与纯化 | 第44-45页 |
| 3.2.5 Ulp1酶活测定及酶活特性分析 | 第45-48页 |
| 3.3 融合蛋白SUMO-scFv的酶切及scFv的纯化 | 第48页 |
| 3.4 抗体与抗原HSA同源建模分析 | 第48-51页 |
| 主要结论与展望 | 第51-53页 |
| 主要结论 | 第51页 |
| 展望 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59页 |
