| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-18页 |
| 1.1 麦芽糖淀粉酶 | 第8-12页 |
| 1.1.1 麦芽糖淀粉酶简介 | 第8-9页 |
| 1.1.2 麦芽糖淀粉酶的应用 | 第9-11页 |
| 1.1.3 麦芽糖淀粉酶的制备 | 第11-12页 |
| 1.2 枯草芽孢杆菌表达系统与表达元件 | 第12-15页 |
| 1.2.1 枯草芽孢杆菌概述 | 第12-13页 |
| 1.2.2 启动子元件对外源蛋白重组表达的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.3 信号肽元件对外源蛋白重组表达的影响 | 第14-15页 |
| 1.3 立题依据及研究意义 | 第15-16页 |
| 1.4 主要研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-30页 |
| 2.1 材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 工具酶和主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19页 |
| 2.1.4 培养基 | 第19-20页 |
| 2.2 基因工程操作方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 重组质粒的构建 | 第20-22页 |
| 2.2.2 启动子的优化 | 第22-23页 |
| 2.2.3 信号肽的筛选 | 第23-26页 |
| 2.3 发酵方法 | 第26-27页 |
| 2.3.1 重组B.subtilis CCTCC M2016536的摇瓶发酵 | 第26页 |
| 2.3.2 重组B.subtilis RIK1285的96孔板发酵 | 第26页 |
| 2.3.3 重组B.subtilis CCTCC M2016536的3-L罐发酵 | 第26-27页 |
| 2.4 分析方法 | 第27-30页 |
| 2.4.1 核酸琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| 2.4.2 聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)分析 | 第27页 |
| 2.4.3 重组酶的纯化方法 | 第27-28页 |
| 2.4.4 重组酶酶学性质测量方法 | 第28页 |
| 2.4.5 蛋白质浓度的测定 | 第28-29页 |
| 2.4.6 重组酶的淀粉水解活力的测定 | 第29页 |
| 2.4.7 葡萄糖浓度的测定 | 第29-30页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第30-52页 |
| 3.1 启动子对麦芽糖淀粉酶在枯草芽孢杆菌中重组表达的影响 | 第30-35页 |
| 3.1.1 启动子的选择 | 第30页 |
| 3.1.2 重组表达质粒的构建 | 第30-32页 |
| 3.1.3 麦芽糖淀粉酶在不同组成型启动子下的表达 | 第32-34页 |
| 3.1.4 麦芽糖淀粉酶在不同诱导型启动子下的表达 | 第34-35页 |
| 3.2 信号肽对麦芽糖淀粉酶在枯草芽孢杆菌中重组表达的影响 | 第35-42页 |
| 3.2.1 信号肽的筛选 | 第35-37页 |
| 3.2.2 信号肽对麦芽糖淀粉酶重组表达的影响 | 第37-42页 |
| 3.3 重组酶在B.subtilis中的酶学性质研究 | 第42-44页 |
| 3.3.1 重组麦芽糖淀粉酶的纯化 | 第42页 |
| 3.3.2 重组麦芽糖淀粉酶的酶学性质 | 第42-44页 |
| 3.4 重组菌的发酵条件优化 | 第44-52页 |
| 3.4.1 重组菌的摇瓶发酵条件优化 | 第44-48页 |
| 3.4.2 重组菌的3-L罐发酵条件优化 | 第48-52页 |
| 主要结论与展望 | 第52-54页 |
| 主要结论 | 第52页 |
| 展望 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第61页 |
