| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| 1.1 烟酸简介 | 第9-10页 |
| 1.1.1 烟酸的结构与性质 | 第9页 |
| 1.1.2 烟酸的用途与生产现状 | 第9-10页 |
| 1.2 腈水解酶的研究背景 | 第10-13页 |
| 1.2.1 腈水解酶的来源和分类 | 第10-11页 |
| 1.2.2 腈水解酶的结构和催化机制 | 第11-12页 |
| 1.2.3 腈水解酶的应用与研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 ARTP诱变 | 第13-14页 |
| 1.3.1 ARTP诱变原理 | 第13页 |
| 1.3.2 ARTP诱变在微生物育种中的应用 | 第13-14页 |
| 1.4 高通量筛选技术 | 第14-15页 |
| 1.4.1 高通量筛选方法 | 第14页 |
| 1.4.2 腈水解酶的高通量筛选方法 | 第14-15页 |
| 1.5 细胞固定化技术 | 第15-17页 |
| 1.5.1 细胞固定化的主要方法 | 第15-16页 |
| 1.5.2 细胞固定化的载体 | 第16-17页 |
| 1.5.3 固定化细胞技术在腈类化合物生物转化中的应用 | 第17页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第17-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-27页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.1 主要试剂材料 | 第19-20页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第20页 |
| 2.1.3 菌株和培养基 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.2.1 OPA-TCA微量反应法 | 第20-22页 |
| 2.2.2 ARTP诱变 | 第22页 |
| 2.2.3 烟酸批次转化实验 | 第22页 |
| 2.2.4 催化特性表征 | 第22-23页 |
| 2.2.5 固定化细胞的制备 | 第23-24页 |
| 2.2.6 添加无机材料以提升固定化细胞性能 | 第24页 |
| 2.3 分析方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 酶活检测 | 第24页 |
| 2.3.2 固定化细胞催化活力测定体系 | 第24页 |
| 2.3.3 HPLC法 | 第24-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-51页 |
| 3.1 ARTP诱变选育高产菌株 | 第27-37页 |
| 3.1.1 构建基于96孔板的高通量筛选方法 | 第27-28页 |
| 3.1.2 ARTP诱变 | 第28页 |
| 3.1.3 初筛 | 第28-29页 |
| 3.1.4 复筛 | 第29-30页 |
| 3.1.5 mut-D3的烟酸转化实验 | 第30-32页 |
| 3.1.6 mut-D3的生长曲线和酶活曲线 | 第32-33页 |
| 3.1.7 mut-D3的扫描电镜观察 | 第33页 |
| 3.1.8 mut-D3的催化特性表征 | 第33-37页 |
| 3.2 mut-D3的SA-PVA固定化 | 第37-44页 |
| 3.2.1 有机固定材料的选择 | 第37-38页 |
| 3.2.2 SA-PVA固定化条件的优化 | 第38-40页 |
| 3.2.3 SA-PVA固定化细胞的扫描电镜观察 | 第40页 |
| 3.2.4 pH对SA-PVA固定化细胞催化活力的影响 | 第40-41页 |
| 3.2.5 温度对SA-PVA固定化细胞催化活力的影响 | 第41页 |
| 3.2.6 SA-PVA固定化细胞的热稳定性 | 第41-42页 |
| 3.2.7 SA-PVA固定化细胞的贮藏稳定性 | 第42-43页 |
| 3.2.8 初始3-氰基吡啶浓度对SA-PVA固定化细胞转化影响及批次转化 | 第43-44页 |
| 3.3 添加无机材料提升SA-PVA固定化细胞性能 | 第44-51页 |
| 3.3.1 无机材料的选择 | 第44-45页 |
| 3.3.2 无机材料条件的优化 | 第45-46页 |
| 3.3.3 添加无机材料的SA-PVA固定化细胞扫描电镜观察 | 第46页 |
| 3.3.4 pH对添加无机材料固定化细胞催化活性的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.5 温度对添加无机材料固定化细胞催化活性的影响 | 第47页 |
| 3.3.6 添加无机材料的SA-PVA固定化细胞热稳定性 | 第47-48页 |
| 3.3.7 添加无机材料的SA-PVA固定化细胞贮藏稳定性 | 第48页 |
| 3.3.8 初始3-氰基吡啶浓度对加入无机材料的SA-PVA固定化细胞转化影响及批次转化 | 第48-51页 |
| 主要结论与展望 | 第51-53页 |
| 主要结论 | 第51-52页 |
| 展望 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59页 |
