| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| 1.1 WRKY转录因子 | 第11-19页 |
| 1.1.1 WRKY转录因子结构 | 第11-12页 |
| 1.1.2 WRKY家族基因鉴定 | 第12-13页 |
| 1.1.3 WRKY转录因子功能研究 | 第13-19页 |
| 1.2 中间锦鸡儿分子机制研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2.1 中间锦鸡儿抵抗逆境的分子机制研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2.2 中间锦鸡儿WRKY功能研究 | 第21页 |
| 1.3 本课题的研究内容及其意义 | 第21-22页 |
| 1.4 本课题的技术路线 | 第22-23页 |
| 2 中间锦鸡儿WRKY家族基因的分析和鉴定 | 第23-50页 |
| 2.1 材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植物种子 | 第23页 |
| 2.1.2 实验主要试剂及相关溶液配制 | 第23页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-29页 |
| 2.2.1 中间锦鸡儿培养 | 第24页 |
| 2.2.2 中间锦鸡儿RNA提取及cDNA合成 | 第24-26页 |
| 2.2.3 中间锦鸡儿WRKY基因鉴定及理化性质 | 第26-28页 |
| 2.2.4 CiWRKYs蛋白的保守结构域及系统进化分析 | 第28页 |
| 2.2.5 CiWRKYs蛋白质的二级结构和三级结构分析 | 第28页 |
| 2.2.6 其它豆科类植物的WRKYs家族分析 | 第28-29页 |
| 2.2.7 中间锦鸡儿与其他植物的WRKYs相似性比对分析 | 第29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-44页 |
| 2.3.1 CiWRKYs基因序列分析及命名 | 第29-32页 |
| 2.3.2 CiWRKYs基因全长序列验证 | 第32-33页 |
| 2.3.3 CiWRKYs的理化性质分析 | 第33-34页 |
| 2.3.4 CiWRKYs蛋白的结构域及系统进化分析 | 第34-40页 |
| 2.3.5 CiWRKYs蛋白的二级结构预测结果及分析 | 第40页 |
| 2.3.6 CiWRKYs蛋白的三级结构预测结果及分析 | 第40页 |
| 2.3.7 其它豆科类植物WRKY家族基因的分析结果 | 第40-43页 |
| 2.3.8 中间锦鸡儿WRKY家族蛋白与其他植物的比对结果及分析 | 第43-44页 |
| 2.4 讨论及结论 | 第44-50页 |
| 2.4.1 CiWRKYs蛋白结构域和进化分析 | 第44-47页 |
| 2.4.2 CiWRKYs与拟南芥WRKYs氨基酸组成比较 | 第47-48页 |
| 2.4.3 中间锦鸡儿等豆科植物WRKYs与拟南芥WRKYs比较 | 第48-50页 |
| 3 中间锦鸡儿WRKY家族基因的亚细胞定位及其表达谱 | 第50-76页 |
| 3.1 材料 | 第50-52页 |
| 3.1.1 植物材料及载体 | 第50页 |
| 3.1.2 实验主要试剂及培养基配制 | 第50-51页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第51-52页 |
| 3.2 方法 | 第52-61页 |
| 3.2.1 植物培养 | 第52页 |
| 3.2.2 CiWRKY26和CiWRKY28-1的克隆 | 第52-54页 |
| 3.2.3 PCR产物胶回收 | 第54页 |
| 3.2.4 目的片段与载体的连接及连接产物转化 | 第54页 |
| 3.2.5 菌落PCR检测 | 第54-55页 |
| 3.2.6 GFP融合表达载体构建 | 第55-56页 |
| 3.2.7 拟南芥的遗传转化 | 第56-58页 |
| 3.2.8 亚细胞定位 | 第58页 |
| 3.2.9 不同组织部位表达 | 第58-59页 |
| 3.2.10 干旱胁迫处理生理指标的检测 | 第59页 |
| 3.2.11 不同非生物胁迫处理、取样及检测 | 第59-61页 |
| 3.3 结果及分析 | 第61-72页 |
| 3.3.1 CiWRKY26和CiWRKY28-1克隆以及GFP融合表达载体构建 | 第61-62页 |
| 3.3.3 CiWRKY26和CiWRKY28-1的亚细胞定位研究 | 第62-63页 |
| 3.3.4 CiWRKYs基因不同组织部位表达谱分析 | 第63-64页 |
| 3.3.5 CiWRKYs基因对干旱胁迫处理的响应 | 第64-65页 |
| 3.3.6 CiWRKYs基因对其他非生物胁迫处理的响应 | 第65-70页 |
| 3.3.7 CiWRKYs基因对非生物胁迫处理的响应总结分析 | 第70-72页 |
| 3.4 讨论 | 第72-76页 |
| 3.4.1 CiWRKYs亚细胞定位 | 第72-75页 |
| 3.4.2 CiWRKYs的组织表达和对不同环境胁迫的响应 | 第75-76页 |
| 4.中间锦鸡儿CiWRKY75-1和CiWRKY28-1的功能研究 | 第76-93页 |
| 4.1 材料 | 第76页 |
| 4.1.1 植物材料及载体 | 第76页 |
| 4.1.2 实验主要试剂及培养基配制 | 第76页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第76页 |
| 4.2 方法 | 第76-81页 |
| 4.2.1 基因克隆和植物表达载体构建 | 第76-77页 |
| 4.2.2 拟南芥的遗传转化 | 第77-78页 |
| 4.2.3 CiWRKY75-1的功能检测 | 第78页 |
| 4.2.4 CiWRKY28-1的克隆和功能检测 | 第78-81页 |
| 4.3 结果与分析 | 第81-90页 |
| 4.3.1 过表达CiWRKY75-1减弱了拟南芥对盐胁迫的耐受能力 | 第81-82页 |
| 4.3.2 过表达CiWRKY75-1增强了ABA对拟南芥种子萌发的抑制作用 | 第82-83页 |
| 4.3.3 CiWRKY28-1基因结构分析 | 第83-84页 |
| 4.3.4 过表达CiWRKY28-1拟南芥的筛选与鉴定 | 第84-87页 |
| 4.3.5 过表达CiWRKY28-1减弱拟南芥对干旱胁迫的耐受能力 | 第87-89页 |
| 4.3.6 过表达CiWRKY28-1增加拟南芥对ABA的耐受性 | 第89-90页 |
| 4.4 讨论 | 第90-93页 |
| 4.4.1 CiWRKY75-1参与调控植物对盐和ABA的响应 | 第90-92页 |
| 4.4.2 中间锦鸡儿CiWRKY28-1参与干旱和ABA响应 | 第92-93页 |
| 5.结论 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-112页 |
| 作者简介 | 第112-113页 |
