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17-β雌二醇调控绵羊输卵管上皮细胞β-防御素1基因表达过程中NF-κB信号通路的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
插图和附表清单第11-13页
缩略语表第13-15页
1 引言第15-33页
    1.1 防御素的研究进展第15-25页
        1.1.1 防御素蛋白结构第15-17页
        1.1.2 防御素生物学活性第17-20页
        1.1.3 防御素的分类及分布第20-21页
        1.1.4 17-β雌二醇与绵羊β防御素表达关系第21-25页
    1.2 NF-κB信号通路研究进展第25-30页
        1.2.1 NF-κB信号通路介绍第25页
        1.2.2 NF-κB/Rel和IκB家族蛋白组成和功能第25-27页
        1.2.3 NF-κB信号通路激活途径第27-28页
        1.2.4 NF-κB信号通路的调节第28-29页
        1.2.5 NF-κB信号通路的终止第29-30页
        1.2.6 染色质免疫共沉淀技术第30页
    1.3 本研究的目的及意义第30-31页
    1.4 技术路线第31-33页
2 实验一 17-β雌二醇对绵羊输卵管上皮细胞SBD1表达的影响第33-49页
    2.1 材料与方法第33-40页
        2.1.1 实验材料第33页
        2.1.2 仪器设备第33页
        2.1.3 实验试剂第33-34页
        2.1.4 实验方法第34-40页
    2.2 实验结果第40-47页
        2.2.1 输卵管上皮细胞传代培养形态第40-41页
        2.2.2 输卵管上皮细胞总RNA检测结果第41页
        2.2.3 输卵管上皮细胞不同基因RT-qPCR扩增产物电泳结果第41-42页
        2.2.4 输卵管上皮细胞不同基因RT-qPCR扩增效率、扩增、熔解和熔解峰曲线第42-45页
        2.2.5 输卵管上皮细胞不同基因测序结果第45页
        2.2.6 E_2对绵羊输卵管上皮细胞SBD1表达的影响第45-46页
        2.2.7 E_2对绵羊输卵管上皮细胞Bcl-2和Bax表达的影响第46-47页
    2.3 讨论第47-48页
    2.4 小结第48-49页
3 实验二 17-β雌二醇调控绵羊输卵管上皮细胞SBD1基因的信号转导机制第49-58页
    3.1 材料与方法第49-51页
        3.1.1 实验材料第49页
        3.1.2 实验仪器第49页
        3.1.3 实验试剂第49页
        3.1.4 实验试剂的配置第49-50页
        3.1.5 实验方法第50-51页
    3.2 实验结果第51-53页
        3.2.1 17-β雌二醇调控SBD1表达过程中GPR30和雌激素受体的作用第51-53页
        3.2.2 17-β雌二醇调控SBD1表达过程中PKA、PKC和NF-κ B信号通路的的作用第53页
    3.3 讨论第53-57页
        3.3.1 细胞受体的种类和功能第54-55页
        3.3.2 17-β雌二醇诱导SBD1的表达通过GPR30和雌激素受体所介导第55-56页
        3.3.3 17-β雌二醇诱导SBD1表达的非基因组途径需要通过PKA、PKC和NF-κ B信号通路第56-57页
    3.4 小结第57-58页
4 实验三 NF-κ B信号通路在17-β雌二醇调控绵羊输卵管上皮细胞SBD1基因表达中的作用第58-80页
    4.1 材料与方法第58-67页
        4.1.1 实验材料第58页
        4.1.2 仪器设备第58页
        4.1.3 实验试剂与试剂配制第58-60页
        4.1.4 实验方法第60-67页
    4.2 实验结果第67-76页
        4.2.1 添加17-β雌二醇后细胞内NF-κ B信号通路中I-κBα蛋白变化第67-68页
        4.2.2 添加17-β雌二醇后细胞内NF-κ B信号通路中p-I-κ B α蛋白变化第68-69页
        4.2.3 RT-qPCR方法检测NF-κ B方法的建立第69-70页
        4.2.4 添加17-β雌二醇后细胞内NF-κ B表达量变化第70-71页
        4.2.5 添加17-β雌二醇后细胞质内NF-κB信号通路中p65蛋白变化第71-72页
        4.2.6 添加17-β雌二醇后细胞核内NF-κ B信号通路中p65蛋白变化第72-73页
        4.2.7 染色质免疫共沉淀实验步骤质量控制检验第73-74页
        4.2.8 RT-qPCR方法检测SBD1启动子基因方法的建立第74-76页
        4.2.9 添加17-β雌二醇后细胞核内NF-κB信号通路中p65蛋白结合SBD1启动子基因的变化第76页
    4.3 讨论第76-79页
        4.3.1 NF-κ B信号通路I-κ Bα蛋白发生泛素化第77页
        4.3.2 NF-κ B信号通路蛋白的磷酸化与脱磷酸化第77-78页
        4.3.3 p65蛋白发生核位移并参与SBD1基因的转录第78页
        4.3.4 NF-κB信号通路的终止第78-79页
    4.4 小结第79-80页
5 结论第80-81页
致谢第81-83页
参考文献第83-93页
作者简介第93-94页

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