摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
插图和附表清单 | 第11-13页 |
缩略语表 | 第13-15页 |
1 引言 | 第15-33页 |
1.1 防御素的研究进展 | 第15-25页 |
1.1.1 防御素蛋白结构 | 第15-17页 |
1.1.2 防御素生物学活性 | 第17-20页 |
1.1.3 防御素的分类及分布 | 第20-21页 |
1.1.4 17-β雌二醇与绵羊β防御素表达关系 | 第21-25页 |
1.2 NF-κB信号通路研究进展 | 第25-30页 |
1.2.1 NF-κB信号通路介绍 | 第25页 |
1.2.2 NF-κB/Rel和IκB家族蛋白组成和功能 | 第25-27页 |
1.2.3 NF-κB信号通路激活途径 | 第27-28页 |
1.2.4 NF-κB信号通路的调节 | 第28-29页 |
1.2.5 NF-κB信号通路的终止 | 第29-30页 |
1.2.6 染色质免疫共沉淀技术 | 第30页 |
1.3 本研究的目的及意义 | 第30-31页 |
1.4 技术路线 | 第31-33页 |
2 实验一 17-β雌二醇对绵羊输卵管上皮细胞SBD1表达的影响 | 第33-49页 |
2.1 材料与方法 | 第33-40页 |
2.1.1 实验材料 | 第33页 |
2.1.2 仪器设备 | 第33页 |
2.1.3 实验试剂 | 第33-34页 |
2.1.4 实验方法 | 第34-40页 |
2.2 实验结果 | 第40-47页 |
2.2.1 输卵管上皮细胞传代培养形态 | 第40-41页 |
2.2.2 输卵管上皮细胞总RNA检测结果 | 第41页 |
2.2.3 输卵管上皮细胞不同基因RT-qPCR扩增产物电泳结果 | 第41-42页 |
2.2.4 输卵管上皮细胞不同基因RT-qPCR扩增效率、扩增、熔解和熔解峰曲线 | 第42-45页 |
2.2.5 输卵管上皮细胞不同基因测序结果 | 第45页 |
2.2.6 E_2对绵羊输卵管上皮细胞SBD1表达的影响 | 第45-46页 |
2.2.7 E_2对绵羊输卵管上皮细胞Bcl-2和Bax表达的影响 | 第46-47页 |
2.3 讨论 | 第47-48页 |
2.4 小结 | 第48-49页 |
3 实验二 17-β雌二醇调控绵羊输卵管上皮细胞SBD1基因的信号转导机制 | 第49-58页 |
3.1 材料与方法 | 第49-51页 |
3.1.1 实验材料 | 第49页 |
3.1.2 实验仪器 | 第49页 |
3.1.3 实验试剂 | 第49页 |
3.1.4 实验试剂的配置 | 第49-50页 |
3.1.5 实验方法 | 第50-51页 |
3.2 实验结果 | 第51-53页 |
3.2.1 17-β雌二醇调控SBD1表达过程中GPR30和雌激素受体的作用 | 第51-53页 |
3.2.2 17-β雌二醇调控SBD1表达过程中PKA、PKC和NF-κ B信号通路的的作用 | 第53页 |
3.3 讨论 | 第53-57页 |
3.3.1 细胞受体的种类和功能 | 第54-55页 |
3.3.2 17-β雌二醇诱导SBD1的表达通过GPR30和雌激素受体所介导 | 第55-56页 |
3.3.3 17-β雌二醇诱导SBD1表达的非基因组途径需要通过PKA、PKC和NF-κ B信号通路 | 第56-57页 |
3.4 小结 | 第57-58页 |
4 实验三 NF-κ B信号通路在17-β雌二醇调控绵羊输卵管上皮细胞SBD1基因表达中的作用 | 第58-80页 |
4.1 材料与方法 | 第58-67页 |
4.1.1 实验材料 | 第58页 |
4.1.2 仪器设备 | 第58页 |
4.1.3 实验试剂与试剂配制 | 第58-60页 |
4.1.4 实验方法 | 第60-67页 |
4.2 实验结果 | 第67-76页 |
4.2.1 添加17-β雌二醇后细胞内NF-κ B信号通路中I-κBα蛋白变化 | 第67-68页 |
4.2.2 添加17-β雌二醇后细胞内NF-κ B信号通路中p-I-κ B α蛋白变化 | 第68-69页 |
4.2.3 RT-qPCR方法检测NF-κ B方法的建立 | 第69-70页 |
4.2.4 添加17-β雌二醇后细胞内NF-κ B表达量变化 | 第70-71页 |
4.2.5 添加17-β雌二醇后细胞质内NF-κB信号通路中p65蛋白变化 | 第71-72页 |
4.2.6 添加17-β雌二醇后细胞核内NF-κ B信号通路中p65蛋白变化 | 第72-73页 |
4.2.7 染色质免疫共沉淀实验步骤质量控制检验 | 第73-74页 |
4.2.8 RT-qPCR方法检测SBD1启动子基因方法的建立 | 第74-76页 |
4.2.9 添加17-β雌二醇后细胞核内NF-κB信号通路中p65蛋白结合SBD1启动子基因的变化 | 第76页 |
4.3 讨论 | 第76-79页 |
4.3.1 NF-κ B信号通路I-κ Bα蛋白发生泛素化 | 第77页 |
4.3.2 NF-κ B信号通路蛋白的磷酸化与脱磷酸化 | 第77-78页 |
4.3.3 p65蛋白发生核位移并参与SBD1基因的转录 | 第78页 |
4.3.4 NF-κB信号通路的终止 | 第78-79页 |
4.4 小结 | 第79-80页 |
5 结论 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-93页 |
作者简介 | 第93-94页 |