| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第10-25页 |
| 1.1 花药与花粉发育过程 | 第10-13页 |
| 1.2 花药绒毡层的发育及相关功能基因 | 第13-18页 |
| 1.3 花粉壁的结构和成分 | 第18-22页 |
| 1.4 胼胝质、初生外壁和小孢子质膜的波浪形成对花粉壁的影响 | 第22-23页 |
| 1.5 孢粉素合成的相关通路 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 植物种质资源 | 第25页 |
| 2.1.2 常规试剂,生化试剂盒,工具酶 | 第25页 |
| 2.1.3 菌株、质粒 | 第25-26页 |
| 2.1.4 培养基配方 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-50页 |
| 2.2.1 拟南芥种植 | 第27-28页 |
| 2.2.2 不育突变体表型鉴定 | 第28页 |
| 2.2.3 大肠杆菌超级感受态细胞的制备 | 第28-30页 |
| 2.2.4 感受态细胞的转化过程 | 第30页 |
| 2.2.5 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第30-31页 |
| 2.2.6 拟南芥的转化 | 第31-32页 |
| 2.2.7 质粒少量抽提的实验流程 | 第32页 |
| 2.2.8 抽提拟南芥DNA | 第32-33页 |
| 2.2.9 总RNA抽提及反转录cDNA第一链 | 第33-35页 |
| 2.2.10 半定量及定量RT-PCR分析 | 第35页 |
| 2.2.11 基因芯片分析 | 第35-36页 |
| 2.2.12 拟南芥植株的半薄切片观察 | 第36-37页 |
| 2.2.13 扫描电镜SEM观察 | 第37-38页 |
| 2.2.14 透射电镜观察 | 第38-39页 |
| 2.2.15 原位杂交In situ hybridization | 第39-43页 |
| 2.2.16 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第43-45页 |
| 2.2.17 MBP蛋白表达 | 第45-48页 |
| 2.2.18 凝胶迁移实验(EMSA) | 第48-50页 |
| 3 实验结果与讨论 | 第50-78页 |
| 第一部分 拟南芥花粉壁早期发育中孢粉素前体以及外壁内层物质积累的观察 | 第50-57页 |
| 3.1 实验结果 | 第50-54页 |
| 3.1.1 拟南芥外壁模式形成的透射电镜观察 | 第50-53页 |
| 3.1.2 拟南芥花粉外壁模式形成的发育模型 | 第53-54页 |
| 3.2 讨论 | 第54-57页 |
| 3.2.1 初生外壁对花粉外壁发育的影响 | 第54-55页 |
| 3.2.2 小孢子质膜的波浪型形成 | 第55页 |
| 3.2.3 棒状前体的形成过程 | 第55-57页 |
| 第二部分 转录因子MS188调控LAP5/6基因参与花粉外壁合成的机理 | 第57-78页 |
| 3.3 实验结果 | 第57-73页 |
| 3.3.1 基因芯片分析在ms188突变体花药中的差异表达基因 | 第58-62页 |
| 3.3.2 LAP5-6在ms188下的时空表达检测 | 第62-63页 |
| 3.3.3 LAP5-6的启动子结合序列的分析 | 第63-65页 |
| 3.3.4 ProMS188::MS188-GFP转基因互补植株的构建和鉴定 | 第65-68页 |
| 3.3.5 转录因子MS188能够直接结合与LAP5基因的启动子上 | 第68-71页 |
| 3.3.6 lap5和lap6单突变体影响了小孢子的发育和花粉外壁的积累 | 第71-72页 |
| 3.3.7 在ms188突变体中表达LAP5的转基因植株的鉴定 | 第72-73页 |
| 3.4 讨论 | 第73-78页 |
| 3.4.1 绒毡层转录因子MS188的突变导致花粉外壁外层完全缺失 | 第73-74页 |
| 3.4.2 查尔酮合成酶LAP5/6在孢粉素前体合成过程中起重要作用 | 第74-76页 |
| 3.4.3 MS188通过调控LAP5-6以及其他孢粉素合成基因直接参与到花粉外壁外层的发育过程中 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 发表文章目录 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
