| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-34页 |
| ·基因沉默 | 第12-20页 |
| ·基因沉默的研究历史 | 第12-14页 |
| ·基因沉默类型 | 第14-16页 |
| ·转录后基因沉默作用机制 | 第16-18页 |
| ·RNA 沉默中的重要蛋白与酶 | 第18-20页 |
| ·RNA 沉默是植物天然的抗病毒防卫反应 | 第20页 |
| ·RNA 沉默的病毒抑制子 | 第20-28页 |
| ·RNA 沉默的病毒抑制子研究进展 | 第20页 |
| ·RNA 沉默抑制子作用机制 | 第20-22页 |
| ·抑制因子鉴定方法 | 第22-25页 |
| ·病毒诱导的基因沉默系统 | 第25-27页 |
| ·农杆菌介导的瞬时表达体系 | 第27-28页 |
| ·黄瓜坏死病毒 | 第28-33页 |
| ·生物学特性 | 第28-31页 |
| ·分子生物学特征 | 第31-33页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第33-34页 |
| 第二章 材料与方法 | 第34-49页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·病毒侵染性克隆、菌种和质粒 | 第34页 |
| ·试剂和酶 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-49页 |
| ·PCR 反应 | 第34-35页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第35-36页 |
| ·DNA 克隆技术 | 第36-38页 |
| ·质粒提取与鉴定 | 第38-39页 |
| ·核酸测序 | 第39-40页 |
| ·植物总RNA 提取与Northern 印记分析 | 第40-42页 |
| ·SDS-PAGE 与Wextern Blot 印记分析 | 第42-45页 |
| ·农杆菌感受态细胞制备及转化 | 第45-46页 |
| ·农杆菌接种及荧光观察 | 第46页 |
| ·RNA 体外转录与病毒接种 | 第46-48页 |
| ·核酸、蛋白序列和结构分析 | 第48-49页 |
| 第三章 VIGS 系统中CNV p20 抑制RNA 沉默活性研究 | 第49-60页 |
| ·CNV-P20 和TBSV-P19 同源性分析 | 第49页 |
| ·CNV p20 抑制转基因烟草GFP 基因沉默分析 | 第49-55页 |
| ·GFPstop 突变体鉴定CNV P20 蛋白抑制GFP 基因沉默效应 | 第55-57页 |
| ·CNV P21 蛋白在基因沉默抑制效应中的作用分析 | 第57-60页 |
| 第四章 农杆菌介导的瞬时表达系统中CNV p20 抑制RNA 沉默活性研究 | 第60-81页 |
| ·在农杆菌介导的瞬时表达系统中，CNV P20 不能抑制基因沉默 | 第61-63页 |
| ·CNV 基因产物不能协助CNV P20 蛋白抑制GFP 转基因沉默 | 第63-66页 |
| ·CNV p20 与TBSV p19 蛋白表达分析 | 第66-68页 |
| ·CNV p20 mRNA 表达分析 | 第68-69页 |
| ·GFP mRNA 表达分析 | 第69-71页 |
| ·CNV p20 对外源蛋白表达的促进作用 | 第71-72页 |
| ·表达载体对CNV p20 在农杆菌系统中的表达影响 | 第72-73页 |
| ·定点突变对CNV p20 的表达影响 | 第73-81页 |
| 第五章 CNV p20 在病毒侵染寄主植物中的作用研究 | 第81-85页 |
| ·CNV p20 可以协助病毒侵染寄主植物 | 第81-82页 |
| ·CNV p20 是一个弱效的RNA 沉默病毒抑制子 | 第82-83页 |
| ·在病毒侵染寄主的过程中，CNV P20 蛋白表达水平与TBSV P19 相近 | 第83-85页 |
| 第六章 CNV P20 蛋白结构分析 | 第85-96页 |
| ·TBSV P19 蛋白结构分析 | 第85-88页 |
| ·CNV p20 二级结构分析 | 第88-89页 |
| ·CNV p20 三级结构预测 | 第89-91页 |
| ·CNV p20 三级结构中关键氨基酸残基功能分析 | 第91-96页 |
| 第七章 结论 | 第96-97页 |
| 第八章 讨论 | 第97-101页 |
| ·蛋白表达与VSR 功能活性的关系 | 第97-98页 |
| ·CNV p20 蛋白关键氨基酸残基突变分析 | 第98-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 附录 | 第113-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 作者简介 | 第117页 |
