| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 英文缩略词 | 第15-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-33页 |
| 第一章 卵泡发育与闭锁 | 第17-21页 |
| 1 哺乳动物卵泡发育模式 | 第17-18页 |
| 2 卵泡闭锁与退化 | 第18-19页 |
| 3 颗粒细胞与卵泡发育的关系 | 第19-21页 |
| 第二章 细胞凋亡及其信号通路 | 第21-27页 |
| 1 细胞凋亡概念 | 第21页 |
| 2 细胞凋亡的特征 | 第21-22页 |
| 3 细胞凋亡信号通路 | 第22-27页 |
| 第三章 颗粒细胞凋亡及其调控因素 | 第27-32页 |
| 1 颗粒细胞凋亡 | 第27页 |
| 2 颗粒细胞凋亡的调控因素 | 第27-32页 |
| 2.1 影响颗粒细胞凋亡的相关激素 | 第27-29页 |
| 2.2 影响颗粒细胞凋亡的相关细胞因子 | 第29-30页 |
| 2.3 影响颗粒细胞凋亡的相关基因 | 第30-31页 |
| 2.4 影响颗粒细胞凋亡的部分miRNA | 第31-32页 |
| 实验目的及意义 | 第32-33页 |
| 第二部分 试验研究 | 第33-71页 |
| 第一章 不同闭锁程度水牛卵泡颗粒细胞凋亡相关基因和miRNA的表达分析 | 第34-55页 |
| 摘要 | 第34-35页 |
| 1 材料与方法 | 第35-44页 |
| 1.1 材料 | 第35-37页 |
| 1.1.1 试验材料 | 第35页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第36页 |
| 1.1.4 主要溶液配制 | 第36-37页 |
| 1.2 方法 | 第37-44页 |
| 1.2.1 卵泡的筛选与分类 | 第37页 |
| 1.2.2 卵泡组织切片制作与HE染色 | 第37-38页 |
| 1.2.3 颗粒细胞的分离与收集 | 第38页 |
| 1.2.4 颗粒细胞基因组提取与DNA电泳分析 | 第38页 |
| 1.2.5 颗粒细胞凋亡检测 | 第38页 |
| 1.2.6 qRT-PCR引物设计与合成 | 第38-40页 |
| 1.2.7 颗粒细胞总RNA的提取及反转录成eDNA | 第40-42页 |
| 1.2.8 实时荧光定量PCR检测 | 第42-44页 |
| 1.2.9 组织切片制作与免疫组化试验 | 第44页 |
| 1.3 数据统计与分析 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-52页 |
| 2.1 不同闭锁程度水牛卵泡HE染色及形态学比较 | 第44-45页 |
| 2.2 不同闭锁程度水牛卵泡颗粒细胞基因组DNA电泳分析 | 第45-46页 |
| 2.3 不同闭锁程度水牛卵泡颗粒细胞Tunel检测 | 第46-47页 |
| 2.4 不同闭锁程度水牛卵泡颗粒细胞凋亡相关基因的表达 | 第47-50页 |
| 2.5 不同闭锁程度水牛卵泡颗粒细胞凋亡相关miRNA的表达 | 第50-51页 |
| 2.6 Fas和Caspase3蛋白在不同闭锁程度水牛卵泡中的表达分析 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 4 结论 | 第54-55页 |
| 第二章 ：雌二醇对体外培养的水牛颗粒细胞凋亡的影响及其调控机制 | 第55-71页 |
| 摘要 | 第55-56页 |
| 1 材料与方法 | 第56-62页 |
| 1.1 材料 | 第56-58页 |
| 1.1.1 试验材料 | 第56页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第56-57页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第57页 |
| 1.1.4 主要溶液配制 | 第57-58页 |
| 1.2 方法 | 第58-61页 |
| 1.2.1 颗粒细胞体外培养 | 第58页 |
| 1.2.2 颗粒细胞凋亡检测 | 第58页 |
| 1.2.3 细胞周期测定 | 第58-59页 |
| 1.2.4 qRT-PCR引物设计与合成 | 第59页 |
| 1.2.5 颗粒细胞总RNA的提取及反转录 | 第59页 |
| 1.2.6 实时荧光定量PCR检测 | 第59-60页 |
| 1.2.7 western-blot检测 | 第60-61页 |
| 1.3 数据统计与分析 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-68页 |
| 2.1 E2处理对水牛颗粒细胞凋亡的影响 | 第62-64页 |
| 2.2 E2处理对颗粒细胞细胞周期的影响 | 第64-65页 |
| 2.3 E2处理对颗粒细胞凋亡相关基因表达的影响 | 第65-67页 |
| 2.4 E2处理对颗粒细胞凋亡相关miRNA表达的影响 | 第67页 |
| 2.5 E2处理对颗粒细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第67-68页 |
| 3. 讨论 | 第68-71页 |
| 4 结论 | 第71页 |
| 全文结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读硕士期间发表学术论文 | 第79页 |
