| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 插图和附表清单 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-23页 |
| 1.1 植物耐寒性研究进展 | 第9-14页 |
| 1.1.1 植物在低温胁迫下的生理生化反应 | 第9-11页 |
| 1.1.2 植物响应低温胁迫的分子机制 | 第11-14页 |
| 1.2 DNA测序技术研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 第一代测序技术 | 第15页 |
| 1.2.2 第二代测序技术 | 第15-16页 |
| 1.2.3 第三代测序技术 | 第16-17页 |
| 1.3 基因表达谱分析方法 | 第17-18页 |
| 1.4 NAC转录因子概述 | 第18-21页 |
| 1.4.1 NAC蛋白的结构与分类 | 第19页 |
| 1.4.2 NAC转录因子的功能 | 第19-21页 |
| 1.5 沙冬青研究进展 | 第21-22页 |
| 1.6 本项研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第23页 |
| 2.1.3 试剂 | 第23页 |
| 2.1.4 实验中用到的引物 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-30页 |
| 2.2.1 沙冬青幼苗培养 | 第23页 |
| 2.2.2 沙冬青幼苗胁迫处理 | 第23-24页 |
| 2.2.3 总RNA的提取：采用改进的TRIZOL法 | 第24页 |
| 2.2.4 总RNA的纯化 | 第24-25页 |
| 2.2.5 RNA-SEQ及数据处理 | 第25-26页 |
| 2.2.6 RT-QRCR(REAL-TIME QUANTITATIVE-PCR)分析 | 第26-27页 |
| 2.2.7 5’RACE反应 | 第27-28页 |
| 2.2.8 目的基因与PMD19-T载体连接 | 第28页 |
| 2.2.9 转化E.COLI感受态细胞 | 第28-29页 |
| 2.2.10 菌落PCR鉴定及测序 | 第29页 |
| 2.2.11 RT-PCR反应 | 第29-30页 |
| 2.2.12 菌种保存 | 第30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-50页 |
| 3.1 表达谱分析 | 第30-48页 |
| 3.1.1 总RNA质量检测 | 第30-31页 |
| 3.1.2 原始序列数据及其初步分析 | 第31-34页 |
| 3.1.3 差异表达基因筛选及验证 | 第34-36页 |
| 3.1.4 差异表达基因初步分析 | 第36-48页 |
| 3.2 AMNAC2基因的克隆 | 第48-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 4.1 黄酮类合成酶基因与蒙古沙冬青耐寒性 | 第50页 |
| 4.2 叶绿体相关基因与蒙古沙冬青耐寒性 | 第50-51页 |
| 4.3 基因转录调节与蒙古沙冬青耐寒性 | 第51页 |
| 5 结论 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |