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菊花与青蒿MET1基因克隆及菊花RNAi载体构建

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
缩写词(Abbreviations)第6-7页
目录第7-10页
1 绪论第10-20页
    1.1 研究背景第10-11页
    1.2 DNA 甲基化第11-12页
        1.2.1 DNA 甲基化的存在形式第11-12页
        1.2.2 植物中胞嘧啶甲基化的含量第12页
        1.2.3 植物甲基化的作用方式第12页
    1.3 DNA 甲基化的功能第12-13页
    1.4 DNA 甲基转移酶第13-15页
        1.4.1 MET1 家族第13-14页
        1.4.2 CMT 家族第14页
        1.4.3 DRM 家族第14-15页
        1.4.4 DDM1第15页
    1.5 嫁接与 RNAi 信号的转移第15-16页
    1.6 RACE 技术第16-17页
    1.7 本研究的目的意义及研究内容第17-20页
2 材料与方法第20-40页
    2.1 实验仪器第20页
    2.2 实验材料第20-21页
        2.2.1 植物材料第20页
        2.2.2 质粒载体与菌株第20-21页
    2.3 实验试剂第21页
    2.4 DNA 测序及引物合成第21-23页
    2.5 常用培养基及溶液的配制第23-24页
        2.5.1 Hoagland 营养液第23页
        2.5.2 LB 培养基第23-24页
        2.5.3 常用溶液的配制第24页
        2.5.4 抗生素的配制第24页
    2.6 实验方法第24-40页
        2.6.1 菊花和青蒿的组培第24页
        2.6.2 菊花和青蒿水培第24-25页
        2.6.3 菊花和青蒿 RNA 提取方法第25-26页
        2.6.4 菊花和青蒿同源克隆第26-27页
        2.6.5 3'RACE 实验方法第27-29页
        2.6.6 5'RACE 实验方法第29-33页
        2.6.7 PCR 以及酶切产物的回收与纯化第33-34页
        2.6.8 PCR 产物的连接第34页
        2.6.9 质粒的酶切第34-35页
        2.6.10 酶切产物的连接第35页
        2.6.11 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第35-36页
        2.6.12 质粒 DNA 的提取第36-37页
        2.6.13 重组质粒的鉴定第37页
        2.6.14 RNAi 载体构建第37-38页
        2.6.15 荧光定量 PCR第38页
        2.6.16 测序结果的比对以及分析第38-40页
3 结果分析第40-50页
    3.1 菊花和青蒿同源序列的获得第40-42页
    3.2 运用 3'RACE 技术获得菊花 3'端 cDNA 序列第42页
    3.3 5'RACE 技术获得菊花和青蒿 5'端所有序列第42-44页
    3.4 菊花和青蒿 MET1 全基因的扩增第44页
    3.5 生物信息学分析菊花和青蒿的序列第44-45页
    3.6 构建 RNAi 载体第45-47页
    3.7 菊花和青蒿表达谱分析第47-50页
4 小结和讨论第50-52页
    4.1 DNA 甲基转移酶基因分离方法第50页
    4.2 5'RACE 实验第50页
    4.3 RNAi 载体的构建第50-51页
    4.4 荧光定量 PCR第51-52页
5 结论第52-54页
参考文献第54-62页
附录第62-66页
致谢第66-67页

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