摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
缩写词(Abbreviations) | 第6-7页 |
目录 | 第7-10页 |
1 绪论 | 第10-20页 |
1.1 研究背景 | 第10-11页 |
1.2 DNA 甲基化 | 第11-12页 |
1.2.1 DNA 甲基化的存在形式 | 第11-12页 |
1.2.2 植物中胞嘧啶甲基化的含量 | 第12页 |
1.2.3 植物甲基化的作用方式 | 第12页 |
1.3 DNA 甲基化的功能 | 第12-13页 |
1.4 DNA 甲基转移酶 | 第13-15页 |
1.4.1 MET1 家族 | 第13-14页 |
1.4.2 CMT 家族 | 第14页 |
1.4.3 DRM 家族 | 第14-15页 |
1.4.4 DDM1 | 第15页 |
1.5 嫁接与 RNAi 信号的转移 | 第15-16页 |
1.6 RACE 技术 | 第16-17页 |
1.7 本研究的目的意义及研究内容 | 第17-20页 |
2 材料与方法 | 第20-40页 |
2.1 实验仪器 | 第20页 |
2.2 实验材料 | 第20-21页 |
2.2.1 植物材料 | 第20页 |
2.2.2 质粒载体与菌株 | 第20-21页 |
2.3 实验试剂 | 第21页 |
2.4 DNA 测序及引物合成 | 第21-23页 |
2.5 常用培养基及溶液的配制 | 第23-24页 |
2.5.1 Hoagland 营养液 | 第23页 |
2.5.2 LB 培养基 | 第23-24页 |
2.5.3 常用溶液的配制 | 第24页 |
2.5.4 抗生素的配制 | 第24页 |
2.6 实验方法 | 第24-40页 |
2.6.1 菊花和青蒿的组培 | 第24页 |
2.6.2 菊花和青蒿水培 | 第24-25页 |
2.6.3 菊花和青蒿 RNA 提取方法 | 第25-26页 |
2.6.4 菊花和青蒿同源克隆 | 第26-27页 |
2.6.5 3'RACE 实验方法 | 第27-29页 |
2.6.6 5'RACE 实验方法 | 第29-33页 |
2.6.7 PCR 以及酶切产物的回收与纯化 | 第33-34页 |
2.6.8 PCR 产物的连接 | 第34页 |
2.6.9 质粒的酶切 | 第34-35页 |
2.6.10 酶切产物的连接 | 第35页 |
2.6.11 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第35-36页 |
2.6.12 质粒 DNA 的提取 | 第36-37页 |
2.6.13 重组质粒的鉴定 | 第37页 |
2.6.14 RNAi 载体构建 | 第37-38页 |
2.6.15 荧光定量 PCR | 第38页 |
2.6.16 测序结果的比对以及分析 | 第38-40页 |
3 结果分析 | 第40-50页 |
3.1 菊花和青蒿同源序列的获得 | 第40-42页 |
3.2 运用 3'RACE 技术获得菊花 3'端 cDNA 序列 | 第42页 |
3.3 5'RACE 技术获得菊花和青蒿 5'端所有序列 | 第42-44页 |
3.4 菊花和青蒿 MET1 全基因的扩增 | 第44页 |
3.5 生物信息学分析菊花和青蒿的序列 | 第44-45页 |
3.6 构建 RNAi 载体 | 第45-47页 |
3.7 菊花和青蒿表达谱分析 | 第47-50页 |
4 小结和讨论 | 第50-52页 |
4.1 DNA 甲基转移酶基因分离方法 | 第50页 |
4.2 5'RACE 实验 | 第50页 |
4.3 RNAi 载体的构建 | 第50-51页 |
4.4 荧光定量 PCR | 第51-52页 |
5 结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
附录 | 第62-66页 |
致谢 | 第66-67页 |