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甜瓜果实PDS基因克隆及β-胡萝卜素积累分子机理研究

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
1 引言第10-21页
    1.1 类胡萝卜素的种类和功能第10页
    1.2 类胡萝卜素的生物合成第10-16页
        1.2.1 类胡萝卜素生物合成途径第10-12页
        1.2.2 类胡萝卜素生物合成的关键反应第12-13页
        1.2.3 类胡萝卜素生物合成途径中的主要酶及其基因第13-16页
    1.3 植物类胡萝卜素的分解途径第16-17页
        1.3.1 类胡萝卜素加氧裂解酶的发现第16-17页
        1.3.2 CCDs的植物生物学作用第17页
        1.3.3 NCEDs的生物学功能第17页
    1.4 植物类胡萝卜素代谢的基因工程第17-19页
    1.5 本研究的目的与意义第19-21页
2 材料与方法第21-38页
    2.1 试验材料第21-22页
        2.1.1 植物材料种植及果实采收第21页
        2.1.2 质粒及菌株第21页
        2.1.3 酶制剂、试剂盒、生化试剂及试验仪器第21页
        2.1.4 PCR引物第21页
        2.1.5 培养基第21-22页
    2.2 试验方法第22-38页
        2.2.1 甜瓜果实总RNA的提取与cDNA合成第22-24页
        2.2.2 甜瓜果实PDS基因的克隆及测序第24-29页
        2.2.3 PDS基因反义表达载体的构建及对甜瓜的遗传转化第29-33页
        2.2.4 甜瓜PDS基因的荧光定量PCR反应第33-34页
        2.2.5 甜瓜果实类胡萝卜素合成相关基因的半定量PCR第34-36页
        2.2.6 甜瓜果实叶黄素及β-胡萝卜含量测定第36-38页
3 结果与分析第38-50页
    3.1 甜瓜果实总RNA提取与cDNA合成第38页
    3.2 PDS基因的克隆及其生物信息学分析第38-42页
    3.3 PDS基因的的表达模式分析第42-43页
    3.4 CmPDS反义表达载体的构建及遗传转化第43-44页
    3.5 甜瓜果实叶黄素和β-胡萝卜素测定第44-46页
    3.6 甜瓜类胡萝卜素代谢基因序列分析第46页
    3.7 甜瓜果实类胡萝卜素代谢基因氨基酸序列分析第46-47页
    3.8 甜瓜果实类胡萝卜素代谢相关基因的表达分析第47-50页
        3.8.1 合成途径相关基因的半定量分析第47-48页
        3.8.2 类胡萝卜素裂解相关酶基因的表达分析第48-50页
4 讨论第50-52页
    4.1 关于甜瓜总RNA的提取第50页
    4.2 CmPDS的克隆及表达分析第50-51页
    4.3 关于甜瓜转基因第51页
    4.4 关于荧光定量PCR的问题第51-52页
5 结论第52-53页
参考文献第53-61页
致谢第61-62页
攻读硕士期间发表文章第62页

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