摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 引言 | 第10-21页 |
1.1 类胡萝卜素的种类和功能 | 第10页 |
1.2 类胡萝卜素的生物合成 | 第10-16页 |
1.2.1 类胡萝卜素生物合成途径 | 第10-12页 |
1.2.2 类胡萝卜素生物合成的关键反应 | 第12-13页 |
1.2.3 类胡萝卜素生物合成途径中的主要酶及其基因 | 第13-16页 |
1.3 植物类胡萝卜素的分解途径 | 第16-17页 |
1.3.1 类胡萝卜素加氧裂解酶的发现 | 第16-17页 |
1.3.2 CCDs的植物生物学作用 | 第17页 |
1.3.3 NCEDs的生物学功能 | 第17页 |
1.4 植物类胡萝卜素代谢的基因工程 | 第17-19页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-38页 |
2.1 试验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 植物材料种植及果实采收 | 第21页 |
2.1.2 质粒及菌株 | 第21页 |
2.1.3 酶制剂、试剂盒、生化试剂及试验仪器 | 第21页 |
2.1.4 PCR引物 | 第21页 |
2.1.5 培养基 | 第21-22页 |
2.2 试验方法 | 第22-38页 |
2.2.1 甜瓜果实总RNA的提取与cDNA合成 | 第22-24页 |
2.2.2 甜瓜果实PDS基因的克隆及测序 | 第24-29页 |
2.2.3 PDS基因反义表达载体的构建及对甜瓜的遗传转化 | 第29-33页 |
2.2.4 甜瓜PDS基因的荧光定量PCR反应 | 第33-34页 |
2.2.5 甜瓜果实类胡萝卜素合成相关基因的半定量PCR | 第34-36页 |
2.2.6 甜瓜果实叶黄素及β-胡萝卜含量测定 | 第36-38页 |
3 结果与分析 | 第38-50页 |
3.1 甜瓜果实总RNA提取与cDNA合成 | 第38页 |
3.2 PDS基因的克隆及其生物信息学分析 | 第38-42页 |
3.3 PDS基因的的表达模式分析 | 第42-43页 |
3.4 CmPDS反义表达载体的构建及遗传转化 | 第43-44页 |
3.5 甜瓜果实叶黄素和β-胡萝卜素测定 | 第44-46页 |
3.6 甜瓜类胡萝卜素代谢基因序列分析 | 第46页 |
3.7 甜瓜果实类胡萝卜素代谢基因氨基酸序列分析 | 第46-47页 |
3.8 甜瓜果实类胡萝卜素代谢相关基因的表达分析 | 第47-50页 |
3.8.1 合成途径相关基因的半定量分析 | 第47-48页 |
3.8.2 类胡萝卜素裂解相关酶基因的表达分析 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
4.1 关于甜瓜总RNA的提取 | 第50页 |
4.2 CmPDS的克隆及表达分析 | 第50-51页 |
4.3 关于甜瓜转基因 | 第51页 |
4.4 关于荧光定量PCR的问题 | 第51-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读硕士期间发表文章 | 第62页 |