| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 插图和附表清单 | 第12-14页 |
| 缩略语索引 | 第14-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-23页 |
| 1.1 戊型肝炎病毒 | 第16-17页 |
| 1.2 戊型肝炎病毒的细胞培养 | 第17-18页 |
| 1.3 戊型肝炎病毒复制机制的研究现状 | 第18页 |
| 1.4 利用microRNA研究病毒复制机制 | 第18-22页 |
| 1.4.1 microRNA影响HEV复制的提出 | 第19页 |
| 1.4.2 microRNA靶基因预测 | 第19-22页 |
| 1.5 本文的研究目的和科学意义 | 第22-23页 |
| 第二章 microRNA-A6靶基因的筛选 | 第23-41页 |
| 2.1 材料和方法 | 第23-36页 |
| 2.1.1 材料 | 第23-29页 |
| 2.1.2 方法 | 第29-36页 |
| 2.2 结果 | 第36-39页 |
| 2.2.1 靶基因扩增 | 第36-37页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建及鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.3 荧光素酶活性实验 | 第38-39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-40页 |
| 2.3.1 荧光素酶 | 第39页 |
| 2.3.2 荧光素酶的应用 | 第39-40页 |
| 2.3.3 pMIR-REPORT报告载体 | 第40页 |
| 2.3.4 miR-A6与靶基因的相互作用 | 第40页 |
| 2.4 小结 | 第40-41页 |
| 第三章 microRNA-A6对靶基因的调控 | 第41-66页 |
| 3.1 材料和方法 | 第41-52页 |
| 3.1.1 材料 | 第41-45页 |
| 3.1.2 方法 | 第45-52页 |
| 3.2 结果 | 第52-63页 |
| 3.2.1 miR-A6靶基因真核表达载体构建 | 第52-56页 |
| 3.2.2 miR-A6靶基因载体表达鉴定 | 第56-57页 |
| 3.2.3 Real-time qPCR检测miR-A6对靶基因在mRNA水平的调控 | 第57-61页 |
| 3.2.4 Western Blot检测miR-A6对靶基因在蛋白水平的调控 | 第61-63页 |
| 3.3 讨论 | 第63-65页 |
| 3.3.1 miR-A6对SIRP-α的调控作用 | 第63-64页 |
| 3.3.2 miR-A6对ING5的调控作用 | 第64页 |
| 3.3.3 miR-A6对ZAP的调控作用 | 第64-65页 |
| 3.4 小结 | 第65-66页 |
| 第四章 microRNA-A6对HEV复制的影响 | 第66-92页 |
| 4.1 材料和方法 | 第66-72页 |
| 4.1.1 材料 | 第66-67页 |
| 4.1.2 方法 | 第67-72页 |
| 4.2 结果 | 第72-89页 |
| 4.2.1 HEV样品检测 | 第72-74页 |
| 4.2.2 免疫荧光检测细胞中HEV分布 | 第74-79页 |
| 4.2.3 PGC-A6载体构建 | 第79-80页 |
| 4.2.4 Real-time qPCR检测miR-A6对HEV mRNA转录调控 | 第80-86页 |
| 4.2.5 Western Blot检测miR-A6对HEV蛋白表达的影响 | 第86-89页 |
| 4.3 讨论 | 第89-91页 |
| 4.3.1 HEV体外培养 | 第89页 |
| 4.3.2 A549细胞、HepG2细胞培养HEV | 第89页 |
| 4.3.3 ORF1和ORF2的检测 | 第89-90页 |
| 4.3.4 MicroRNA在肝炎病毒研究中的应用 | 第90-91页 |
| 4.4 小结 | 第91-92页 |
| 全文总结 | 第92-93页 |
| 展望 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-101页 |
| 附录A | 第101页 |
