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半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)中性粒细胞胞外陷阱抗菌组分研究

摘要第5-6页
Abstract第6页
第一章 绪论第9-26页
    1.1 鱼类免疫系统概论第9-12页
        1.1.1 鱼类免疫细胞第9-12页
    1.2 中性粒细胞第12-18页
        1.2.1 颗粒和脱颗粒第13-14页
        1.2.2 中性粒细胞中的抗菌蛋白第14-17页
        1.2.3 呼吸爆发第17页
        1.2.4 吞噬第17-18页
    1.3 中性粒细胞胞外陷阱(neutrophilextracellulartraps,NETs)第18-24页
        1.3.1 NETs的形成机制第18-20页
        1.3.2 NETs的抗微生物作用及机制第20-21页
        1.3.3 组蛋白第21-23页
        1.3.4 弹性蛋白酶第23-24页
    1.4 鱼类NETs的研究现状第24-25页
    1.5 本论文的研究目的与意义第25-26页
第二章 实验材料第26-30页
    2.1 实验动物与实验菌株第26-28页
        2.1.1 实验动物第26-27页
        2.1.2 实验菌株第27-28页
    2.2 实验试剂第28-29页
    2.3 实验仪器和设备第29-30页
第三章 实验方法第30-48页
    3.1 序列分析第30页
    3.2 半滑舌鳎总RNA提取及cDNA合成第30-32页
    3.3 重组蛋白原核表达载体的构建第32-38页
    3.4 重组蛋白的表达和纯化第38-40页
    3.5 重组蛋白多克隆抗体的制备及效价检测第40-42页
    3.6 重组蛋白对细菌的结合作用第42页
    3.7 免疫荧光检测重组蛋白对细菌的结合作用第42-43页
    3.8 重组蛋白对细菌增殖的影响第43页
    3.9 半滑舌鳎中性粒细胞的提取及中性粒细胞胞外陷阱(NETs)的产生第43-45页
    3.10 显微镜观察组蛋白和弹性蛋白酶与NETs共定位第45页
    3.11 抗体封闭NETs对细菌活性的影响第45-48页
第四章 实验结果第48-62页
    4.1 半滑舌鳎两个组蛋白(Cs H2B 和 Cs H4)和两个弹性蛋白(CsEla1和CsEla2)序列分析第48-50页
    4.2 rCsH2B和rCsH4对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的结合能力第50-53页
    4.3 rCsH2B和rCsH4对细菌生长的影响第53-55页
    4.4 rCsEla1和rCsEla2对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的结合第55-57页
    4.5 rCsEla1和rCsEla2对细菌生长的影响第57-58页
    4.6 组蛋白和弹性蛋白与NETs的共定位第58-60页
    4.7 抗体封闭组蛋白和弹性蛋白酶后NETs对细菌生长的影响第60-62页
第五章 讨论第62-64页
第六章 结论第64-66页
参考文献第66-80页
附录第80-83页
致谢第83-84页
作者简历及攻读硕士期间发表的学术论文与研究成果第84页

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