摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第13-18页 |
1.1 课题来源 | 第13页 |
1.2 课题研究的目的和意义 | 第13-15页 |
1.3 国内外研究现状 | 第15-16页 |
1.4 论文的主要研究内容 | 第16-18页 |
第二章 材料和方法 | 第18-41页 |
2.1 细胞及组织来源 | 第18页 |
2.2 试剂及其配制 | 第18-22页 |
2.2.1 试剂 | 第18-19页 |
2.2.2 试剂盒 | 第19页 |
2.2.3 试剂配制 | 第19-22页 |
2.3 实验仪器 | 第22-23页 |
2.4 实验方法 | 第23-41页 |
2.4.1 细胞培养 | 第23-24页 |
2.4.2 细胞转染 | 第24-25页 |
2.4.3 实时定量荧光 PCR(Real-time PCR) | 第25-26页 |
2.4.4 CCK-8 检测细胞增殖 | 第26-27页 |
2.4.5 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第27-28页 |
2.4.6 流式细胞仪检测细胞周期 | 第28页 |
2.4.7 靶基因预测 | 第28-29页 |
2.4.8 cDNA 模板制备 | 第29-30页 |
2.4.9 靶基因 pGL3-3′-UTR 载体构建 | 第30-35页 |
2.4.10 质粒抽提 | 第35-37页 |
2.4.11 点突变实验 | 第37-38页 |
2.4.12 双荧光素酶报告基因分析 | 第38-39页 |
2.4.13 蛋白质印迹法(Western Blot) | 第39-41页 |
第三章 结果与讨论 | 第41-62页 |
3.1 miR-148a 在 NSCLC 细胞系和 NSCLC 临床组织样品中的表达量 | 第41-45页 |
3.1.1 miR-148a 在 NSCLC 细胞系中的表达水平 | 第41-42页 |
3.1.2 miR-148a 在 NSCLC 临床组织中的表达水平 | 第42-44页 |
3.1.3 miR-148a 在 NSCLC 细胞系和 NSCLC 临床组织中的表达水平讨论 | 第44-45页 |
3.2 miR-148a 功能的研究 | 第45-50页 |
3.2.1 miR-148a mimics 上调 NSCLC 中 miR-148a 的表达 | 第45-46页 |
3.2.2 过表达 miR-148a 抑制 NSCLC 细胞增殖 | 第46-47页 |
3.2.3 过表达 miR-148a 促进 H1299 细胞凋亡 | 第47-48页 |
3.2.4 过表达 miR-148a 抑制 H1299 细胞的周期 | 第48-49页 |
3.2.5 miR-148a 的功能讨论 | 第49-50页 |
3.3 miR-148a 靶基因的预测与鉴定 | 第50-56页 |
3.3.1 miR-148a 靶基因的预测 | 第50-52页 |
3.3.2 miR-148a 靶基因 3′-UTR 载体的构建 | 第52页 |
3.3.3 双荧光素酶报告基因分析 | 第52-55页 |
3.3.4 miR-148a 抑制靶基因 DNMT1 mRNA 及蛋白的表达 | 第55页 |
3.3.5 miR-148a 靶基因的预测与鉴定讨论 | 第55-56页 |
3.4 miR-148a 靶基因 DNMT1 功能的研究 | 第56-62页 |
3.4.1 DNMT1 mRNA 在 NSCLC 细胞系中的表达水平 | 第56-57页 |
3.4.2 DNMT1 mRNA 在 NSCLC 临床组织中的表达水平 | 第57-58页 |
3.4.3 过表达 DNMT1 siRNA 序列抑制其蛋白表达 | 第58页 |
3.4.4 过表达 DNMT1 siRNA 序列促进细胞凋亡 | 第58-59页 |
3.4.5 过表达 DNMT1 siRNA 序列抑制细胞周期 | 第59-60页 |
3.4.6 miR-148a 靶基因功能的研究讨论 | 第60-62页 |
第四章 结论与展望 | 第62-65页 |
4.1 结论 | 第62-63页 |
4.2 展望 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
缩略词对照表 | 第72-73页 |
作者在攻读硕士学位期间公开发表的专利 | 第73-74页 |
作者在攻读硕士学位期间所参与的项目 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |