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MiR-148a在非小细胞肺癌中功能的研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 绪论第13-18页
    1.1 课题来源第13页
    1.2 课题研究的目的和意义第13-15页
    1.3 国内外研究现状第15-16页
    1.4 论文的主要研究内容第16-18页
第二章 材料和方法第18-41页
    2.1 细胞及组织来源第18页
    2.2 试剂及其配制第18-22页
        2.2.1 试剂第18-19页
        2.2.2 试剂盒第19页
        2.2.3 试剂配制第19-22页
    2.3 实验仪器第22-23页
    2.4 实验方法第23-41页
        2.4.1 细胞培养第23-24页
        2.4.2 细胞转染第24-25页
        2.4.3 实时定量荧光 PCR(Real-time PCR)第25-26页
        2.4.4 CCK-8 检测细胞增殖第26-27页
        2.4.5 流式细胞仪检测细胞凋亡第27-28页
        2.4.6 流式细胞仪检测细胞周期第28页
        2.4.7 靶基因预测第28-29页
        2.4.8 cDNA 模板制备第29-30页
        2.4.9 靶基因 pGL3-3′-UTR 载体构建第30-35页
        2.4.10 质粒抽提第35-37页
        2.4.11 点突变实验第37-38页
        2.4.12 双荧光素酶报告基因分析第38-39页
        2.4.13 蛋白质印迹法(Western Blot)第39-41页
第三章 结果与讨论第41-62页
    3.1 miR-148a 在 NSCLC 细胞系和 NSCLC 临床组织样品中的表达量第41-45页
        3.1.1 miR-148a 在 NSCLC 细胞系中的表达水平第41-42页
        3.1.2 miR-148a 在 NSCLC 临床组织中的表达水平第42-44页
        3.1.3 miR-148a 在 NSCLC 细胞系和 NSCLC 临床组织中的表达水平讨论第44-45页
    3.2 miR-148a 功能的研究第45-50页
        3.2.1 miR-148a mimics 上调 NSCLC 中 miR-148a 的表达第45-46页
        3.2.2 过表达 miR-148a 抑制 NSCLC 细胞增殖第46-47页
        3.2.3 过表达 miR-148a 促进 H1299 细胞凋亡第47-48页
        3.2.4 过表达 miR-148a 抑制 H1299 细胞的周期第48-49页
        3.2.5 miR-148a 的功能讨论第49-50页
    3.3 miR-148a 靶基因的预测与鉴定第50-56页
        3.3.1 miR-148a 靶基因的预测第50-52页
        3.3.2 miR-148a 靶基因 3′-UTR 载体的构建第52页
        3.3.3 双荧光素酶报告基因分析第52-55页
        3.3.4 miR-148a 抑制靶基因 DNMT1 mRNA 及蛋白的表达第55页
        3.3.5 miR-148a 靶基因的预测与鉴定讨论第55-56页
    3.4 miR-148a 靶基因 DNMT1 功能的研究第56-62页
        3.4.1 DNMT1 mRNA 在 NSCLC 细胞系中的表达水平第56-57页
        3.4.2 DNMT1 mRNA 在 NSCLC 临床组织中的表达水平第57-58页
        3.4.3 过表达 DNMT1 siRNA 序列抑制其蛋白表达第58页
        3.4.4 过表达 DNMT1 siRNA 序列促进细胞凋亡第58-59页
        3.4.5 过表达 DNMT1 siRNA 序列抑制细胞周期第59-60页
        3.4.6 miR-148a 靶基因功能的研究讨论第60-62页
第四章 结论与展望第62-65页
    4.1 结论第62-63页
    4.2 展望第63-65页
参考文献第65-72页
缩略词对照表第72-73页
作者在攻读硕士学位期间公开发表的专利第73-74页
作者在攻读硕士学位期间所参与的项目第74-75页
致谢第75页

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