中文摘要 | 第7-8页 |
英文摘要 | 第8页 |
前言 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1. 真核生物转录调控简介 | 第12-13页 |
1.1 真核生物的转录启始 | 第12页 |
1.2 pol Ⅱ在启动子近端的暂停 | 第12页 |
1.3 pol Ⅱ的磷酸化及释放 | 第12-13页 |
2. 超级延伸复合物与转录调控 | 第13-16页 |
2.1 一些真核生物的基因转录激活受超级延伸复合物的调控 | 第13-14页 |
2.2 超级延伸复合物的组成 | 第14-16页 |
2.3 超级延伸复合物对基因调节的特异性 | 第16页 |
3. AFF1在SEC复合物中的主要作用 | 第16-17页 |
3.1 AFF1的结构 | 第16-17页 |
3.2 AFF1上的突变导致AFF1蛋白降解速率的下降 | 第17页 |
4. 非小细胞肺癌研究进展 | 第17-19页 |
4.1 非小细胞肺癌的发病率 | 第17-18页 |
4.2 非小细胞肺癌的组织学特征 | 第18页 |
4.3 非小细胞肺癌的驱动基因 | 第18-19页 |
5. 细胞趋化因子简介 | 第19-21页 |
5.1 趋化因子与趋化因子受体的结构和分类 | 第19-20页 |
5.2 趋化因子在癌症中的作用 | 第20-21页 |
总结 | 第21-22页 |
第二章 实验材料及方法 | 第22-42页 |
1. 实验材料 | 第22-25页 |
1.1 实验试剂 | 第22-23页 |
1.2 细胞培养试剂及耗材 | 第23-24页 |
1.3 试剂盒 | 第24页 |
1.4 细胞系 | 第24页 |
1.5 实验仪器及设备 | 第24-25页 |
2. 实验方法 | 第25-42页 |
2.1 构建表达AFF1 shRNA的pLKO.1重组质粒 | 第25-27页 |
2.2 制备AFF1抗体 | 第27-29页 |
2.3 细胞培养 | 第29-30页 |
2.4 慢病毒包装 | 第30-31页 |
2.5 A549细胞的感染 | 第31页 |
2.6 荧光定量PCR检测AFF1敲减效率平 | 第31-34页 |
2.7 免疫印迹试验(western blot) | 第34-37页 |
2.8 染色质免疫沉淀(ChIP) | 第37-40页 |
2.9 裸鼠成瘤实验 | 第40-41页 |
2.10 实验所用引物及shRNA序列 | 第41-42页 |
第三章 实验结果 | 第42-53页 |
3.1 AFF1的高表达与非小细胞肺癌的生存率存在正相关 | 第42页 |
3.2 构建pLKO.1-puro重组质粒,筛选特异性靶向AFF1的shRNA | 第42-44页 |
3.3 AFF1敲减后下调CXC类趋化因子的mRNA水平 | 第44-45页 |
3.4 制备AFF1抗体 | 第45-47页 |
3.5 AFF1在CXC趋化因子基因上富集 | 第47-48页 |
3.6 AFF1对CXC因子的调控依赖于SEC的形成 | 第48页 |
3.7 AFF1在裸鼠成瘤中的作用 | 第48-49页 |
3.8 讨论 | 第49-53页 |
参考文献 | 第53-63页 |
致谢 | 第63页 |