| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 引言 | 第9页 |
| 1.2 植物响应非生物胁迫的应答 | 第9-12页 |
| 1.2.1 植物响应盐分胁迫 | 第10页 |
| 1.2.2 植物响应干旱胁迫 | 第10-11页 |
| 1.2.3 植物响应ABA胁迫 | 第11-12页 |
| 1.3 植物抗逆基因研究进展概述 | 第12页 |
| 1.4 真核NAC基因的研究 | 第12-14页 |
| 1.5 柽柳的介绍及研究意义 | 第14-15页 |
| 1.5.1 柽柳的介绍 | 第14页 |
| 1.5.2 柽柳的研究意义 | 第14-15页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 柽柳ThNAC7基因的表达模式 | 第16-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 溶液配制 | 第16-17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-20页 |
| 2.2.1 柽柳ThNAC7基因的cDNA序列 | 第17-18页 |
| 2.2.2 柽柳RNA的提取 | 第18页 |
| 2.2.3 柽柳总RNA的反转录 | 第18-19页 |
| 2.2.4 实时定量PCR | 第19-20页 |
| 2.3 结果与分析 | 第20-23页 |
| 2.3.1 生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.3.2 ThNAC7序列多重序列比对及进化树分析 | 第21页 |
| 2.3.3 柽柳完整的总RNA提取 | 第21-22页 |
| 2.3.4 ThNAC7基因在不同胁迫下的表达模式 | 第22-23页 |
| 2.4 本章小结 | 第23-24页 |
| 3 柽柳ThNAC7基因的过表达和抑制表达载体的构建 | 第24-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 3.1.1 菌种与载体 | 第24页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 3.1.3 抗生素配制 | 第24-25页 |
| 3.1.4 细菌培养基制备 | 第25页 |
| 3.1.5 感受态的制备 | 第25页 |
| 3.1.6 引物合成与测序 | 第25-26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-40页 |
| 3.2.1 pMD18-T-ThNAC7载体的构建 | 第26-27页 |
| 3.2.2 过表达载体pROK2-ThNAC7的构建 | 第27-32页 |
| 3.2.3 植物抑制表达载体ThNAC7-RNAi的构建 | 第32-40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-42页 |
| 3.3.1 植物过表达载体pROK2-ThNAC7的构建 | 第40页 |
| 3.3.2 植物抑制表达载体ThNAC7-RNAi的构建 | 第40-42页 |
| 3.4 本章小结 | 第42-43页 |
| 4 瞬时转化研究柽柳ThNAC7基因的抗逆性 | 第43-57页 |
| 4.1 实验材料 | 第43-45页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第43页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 培养基 | 第43页 |
| 4.1.4 菌种 | 第43-44页 |
| 4.1.5 溶液配制 | 第44-45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-47页 |
| 4.2.1 菌种活化 | 第45页 |
| 4.2.2 渗透胁迫预处理 | 第45页 |
| 4.2.3 瞬时侵染柽柳 | 第45-46页 |
| 4.2.4 瞬时转化ThNAC7基因的表达 | 第46页 |
| 4.2.5 NBT染色 | 第46-47页 |
| 4.2.6 DAB染色 | 第47页 |
| 4.2.7 Evans blue染色 | 第47页 |
| 4.3 失水率的测定 | 第47页 |
| 4.4 电解质渗透率测定 | 第47-48页 |
| 4.5 叶绿素含量测定 | 第48页 |
| 4.6 丙二醛含量测定 | 第48-49页 |
| 4.7 结果与分析 | 第49-56页 |
| 4.7.1 GUS染色分析 | 第49-50页 |
| 4.7.2 ThNAC7基因的瞬时表达 | 第50-51页 |
| 4.7.3 利用NBT定位法研究瞬时侵染柽柳苗细胞内超氧离子水平 | 第51-52页 |
| 4.7.4 利用DAB定位法研究瞬时侵染柽柳苗细胞内过氧化氢水平 | 第52页 |
| 4.7.5 利用Evans Blue研究瞬时侵染柽柳苗细胞受损情况 | 第52-53页 |
| 4.7.6 转基因柽柳的电解质渗透率分析 | 第53页 |
| 4.7.7 转基因柽柳的失水率测定 | 第53-54页 |
| 4.7.8 转基因柽柳的叶绿素含量测定 | 第54-55页 |
| 4.7.9 转基因柽柳的丙二醛含量测定 | 第55-56页 |
| 4.8 本章小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
