| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-23页 |
| ·纤维素酶 | 第9-10页 |
| ·β-葡萄糖苷酶 | 第10-17页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的生物类群分布 | 第10-11页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分类 | 第11页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的酶学性质 | 第11-13页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的催化机制 | 第13-15页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的酶活测定方法研究进展 | 第15页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的应用 | 第15-16页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分子生物学研究 | 第16-17页 |
| ·黑曲霉 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌系统重组蛋白表达 | 第18-22页 |
| ·现代重组表达系统 | 第18-19页 |
| ·pET表达系统 | 第19-21页 |
| ·pBAD表达系统 | 第21-22页 |
| ·大肠杆菌宿主菌 | 第22页 |
| ·本课题研究内容及意义 | 第22-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·菌种保藏 | 第23页 |
| ·限制性内切酶,Marker及试剂盒 | 第23页 |
| ·主要化学试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基配方 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·应用软件及程序 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-35页 |
| ·黑曲霉菌体的获得 | 第25页 |
| ·RNA抽提方法的建立 | 第25-27页 |
| ·基因组DNA抽提 | 第27页 |
| ·RNA与DNA质量检验 | 第27-28页 |
| ·目的基因的克隆 | 第28-32页 |
| ·阳性重组子的序列测定及分析 | 第32页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第32页 |
| ·重组表达质粒的转化 | 第32页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第32-34页 |
| ·重组蛋白质浓度的测定 | 第34页 |
| ·重组β-葡萄糖苷酶活性测定 | 第34-35页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第35-58页 |
| ·目的基因克隆 | 第35-51页 |
| ·黑曲霉Aepergillus niger H7总RNA抽提方法的比较 | 第35-36页 |
| ·基因组DNA抽提 | 第36-37页 |
| ·目的基因克隆路线图 | 第37-38页 |
| ·目的基因的扩增 | 第38-40页 |
| ·pMD18-T载体阳性重组子的鉴定 | 第40-41页 |
| ·阳性重组子的序列测定及分析 | 第41-50页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第50-51页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第51-54页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第51-52页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第52-54页 |
| ·目的蛋白浓度测定 | 第54-55页 |
| ·目的蛋白酶活测定 | 第55-58页 |
| 第4章 结论与展望 | 第58-60页 |
| ·结论 | 第58页 |
| ·展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |