符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-24页 |
1.1 鸭甲肝病毒的概述 | 第12-13页 |
1.1.1 鸭甲肝病毒的分类地位 | 第12-13页 |
1.1.2 DHAV 研究的发展史 | 第13页 |
1.2 DHAV 的生物学特性 | 第13-14页 |
1.2.1 DHAV 的结构特征及抵抗力 | 第13-14页 |
1.2.2 DHAV 的致病性 | 第14页 |
1.2.3 DHAV 的培养特性 | 第14页 |
1.3 DHAV 的流行病学 | 第14-15页 |
1.4 鸭病毒性肝炎(DVH)的诊断方法 | 第15-17页 |
1.4.1 根据临床症状初步诊断 | 第15页 |
1.4.2 根据病理剖检变化诊断 | 第15页 |
1.4.3 病原学诊断 | 第15-16页 |
1.4.4 实验室诊断 | 第16-17页 |
1.5 DHAV 的预防与治疗 | 第17-18页 |
1.5.1 DHAV 的预防 | 第17页 |
1.5.2 治疗 | 第17-18页 |
1.6 DHAV 的分子生物学研究 | 第18-20页 |
1.6.1 DHAV-3 基因组结构 | 第18-19页 |
1.6.2 DHAV-3 功能蛋白作用及其特性 | 第19-20页 |
1.7 RNA 病毒感染性克隆操作技术研究进展 | 第20-23页 |
1.7.1 RNA 病毒感染性克隆构建的发展历程 | 第20页 |
1.7.2 RNA 病毒感染性克隆的构建基础 | 第20-22页 |
1.7.3 感染性克隆的应用 | 第22-23页 |
1.8 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-43页 |
2.1 材料 | 第24-26页 |
2.1.1 菌(毒)株 | 第24页 |
2.1.2 实验动物及细胞株 | 第24页 |
2.1.3 酶和相关试剂 | 第24页 |
2.1.4 主要仪器 | 第24页 |
2.1.5 引物设计与合成 | 第24-26页 |
2.1.6 溶液系统 | 第26页 |
2.2 方法 | 第26-43页 |
2.2.1 病毒的分离与鉴定 | 第26-31页 |
2.2.2 病毒的增殖与纯化 | 第31页 |
2.2.3 全长 cDNA 感染性克隆的构建 | 第31-38页 |
2.2.4 DHAV-3 感染性克隆拯救病毒粒子的获得与鉴定 | 第38-41页 |
2.2.5 拯救病毒的部分生物学指标的分析 | 第41-43页 |
3 结果与分析 | 第43-50页 |
3.1 病毒的分离鉴定结果 | 第43-44页 |
3.1.1 接种鸭胚结果 | 第43页 |
3.1.2 RT-PCR 鉴定结果 | 第43-44页 |
3.2 感染性克隆的构建结果 | 第44-47页 |
3.2.1 全长 cDNA 构建结果 | 第44页 |
3.2.2 重组质粒序列分析结果 | 第44-45页 |
3.2.3 拯救病毒的 RT-PCR 鉴定 | 第45-46页 |
3.2.4 间接免疫荧光(IFA)检测结果 | 第46-47页 |
3.3 鸭胚半数致死量(DELD50)的结果和分析 | 第47-48页 |
3.4 拯救病毒与母本病毒对雏鸭致病性的比较 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-54页 |
4.1 感染性克隆的构建 | 第50-51页 |
4.2 拯救病毒的鉴定 | 第51-52页 |
4.3 拯救病毒与母本病毒鸭胚半数致死量的测定 | 第52-53页 |
4.4 拯救病毒与母本病毒对雏鸭致病性的比较 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第64页 |