| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-16页 |
| 1.1 M.bovis的致病性 | 第10-11页 |
| 1.2 M.bovis的影响和发病率 | 第11页 |
| 1.3 M.bovis的感染对经济以及其他方面的影响 | 第11-12页 |
| 1.4 M. bovis的流行病学研究 | 第12页 |
| 1.5 M.bovis致病性的生物学特征 | 第12页 |
| 1.6 M.bovis 的传播 | 第12-13页 |
| 1.7 M.bovis的耐药性 | 第13-14页 |
| 1.7.1 抗菌药物敏感性测试对指导治疗M.bovis感染的作用 | 第13页 |
| 1.7.2 可以做药敏测试的适宜菌株 | 第13-14页 |
| 1.7.3 利用药敏试验检测M.bovis的适宜方法 | 第14页 |
| 1.7.4 M.bovis分离株耐药性研究的相关数据 | 第14页 |
| 1.8 支原体表面脂蛋白的研究 | 第14页 |
| 1.9 支原体黏附蛋白的研究 | 第14-15页 |
| 1.10 本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 材料及方法 | 第16-27页 |
| 2.1 材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 支原体菌种、表达载体及实验动物 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第16-17页 |
| 2.1.4 引物设计及序列分析软件 | 第17页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第17-19页 |
| 2.2 目的蛋白的原核表达 | 第19-21页 |
| 2.2.1 M.bovis培养及基因组提取 | 第19页 |
| 2.2.2 M.bovis Hubei-1目的基因的突变和扩增 | 第19-20页 |
| 2.2.3 重组质粒的构建及鉴定 | 第20页 |
| 2.2.4 重组质粒的诱导表达 | 第20页 |
| 2.2.5 重组蛋白的纯化 | 第20-21页 |
| 2.3 抗体的制备 | 第21-22页 |
| 2.3.1 抗血清的制备 | 第21页 |
| 2.3.2 抗体效价的测定 | 第21-22页 |
| 2.4 目的蛋白在M.bovis上的定位实验 | 第22页 |
| 2.5 蛋白黏附特性的鉴定 | 第22-24页 |
| 2.5.1 rP41黏附细胞和黏附抑制实验 | 第22页 |
| 2.5.2 rP41b黏附细胞和黏附抑制实验 | 第22-23页 |
| 2.5.3 M.bovis黏附细胞和黏附抑制实验 | 第23-24页 |
| 2.6 夹心ELISA实验 | 第24-27页 |
| 2.6.1 rP41黏附夹心ELISA实验 | 第24页 |
| 2.6.2 rP41b黏附夹心ELISA实验 | 第24-25页 |
| 2.6.3 M.bovis黏附夹心ELISA实验 | 第25-27页 |
| 3 结果 | 第27-38页 |
| 3.1 重组质粒的构建及鉴定 | 第27-28页 |
| 3.1.1 P41-pET30a重组质粒构建及鉴定 | 第27页 |
| 3.1.2 P41b-pET32a重组质粒构建及鉴定 | 第27-28页 |
| 3.2 蛋白表达与纯化 | 第28-29页 |
| 3.2.1 rP41的表达与纯化 | 第28页 |
| 3.2.2 rP41b的表达与纯化 | 第28-29页 |
| 3.3 抗体效价测定 | 第29-30页 |
| 3.3.1 兔抗rP41血清效价的测定 | 第29页 |
| 3.3.2 兔抗rP41b血清效价的测定 | 第29-30页 |
| 3.4 目的蛋白在M.bovis上的定位实验 | 第30页 |
| 3.5 细胞黏附和黏附抑制实验 | 第30-34页 |
| 3.5.1 rP41黏附细胞和黏附抑制实验 | 第30-31页 |
| 3.5.2 rP41b黏附细胞和黏附抑制实验 | 第31-32页 |
| 3.5.3 M.bovis黏附细胞和黏附抑制实验 | 第32-34页 |
| 3.6 夹心ELISA实验 | 第34-38页 |
| 3.6.1 rP41黏附夹心ELISA实验结果 | 第34-35页 |
| 3.6.2 rP41b黏附夹心ELISA实验结果 | 第35-36页 |
| 3.6.3 M.bovis黏附夹心ELISA实验结果 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 4.1 目的蛋白的原核表达 | 第38页 |
| 4.2 在M.bovis上的定位实验 | 第38页 |
| 4.3 蛋白黏附特性的鉴定 | 第38-40页 |
| 5 结论 | 第40-42页 |
| 致谢 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第50页 |
