缩写表(中英文对照) | 第3-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第12-24页 |
1 苏云金芽胞杆菌及其杀虫晶体蛋白 | 第12-16页 |
1.1 苏云金芽胞杆菌 | 第12-13页 |
1.2 杀虫晶体蛋白(ICPs) | 第13-15页 |
1.3 杀虫晶体蛋白作用机制及昆虫抗性 | 第15-16页 |
2 培养条件优化 | 第16-20页 |
2.1 碳、氮源 | 第16-18页 |
2.2 矿物营养 | 第18页 |
2.3 pH、温度和溶氧 | 第18-20页 |
3 杀虫晶体蛋白产生的调控机制 | 第20-22页 |
4 立题依据和研究意义 | 第22-24页 |
材料与方法 | 第24-40页 |
1 实验材料 | 第24-29页 |
1.1 供试菌株与培养基 | 第24页 |
1.2 主要生化试剂 | 第24-25页 |
1.3 常用溶液与缓冲液 | 第25-27页 |
1.4 引物 | 第27-28页 |
1.5 主要仪器设备 | 第28-29页 |
2 实验方法 | 第29-40页 |
2.1 Bt X022菌株培养条件 | 第29页 |
2.2 菌株鉴定 | 第29-32页 |
2.3 Bt X022新菌株培养条件的优化 | 第32-34页 |
2.4 Bt X022新菌株菌体全蛋白提取及含量测定 | 第34页 |
2.5 Shot-gun蛋白样品溶液酶解 | 第34-35页 |
2.6 全蛋白酶解肽段的2D-LC-MS/MS分析 | 第35-37页 |
2.7 蛋白质数据库搜寻鉴定 | 第37-38页 |
2.8 鉴定蛋白的生物信息学分析及半定量分析 | 第38页 |
2.9 RNA提取和实时荧光定量RT-PCR分析 | 第38-40页 |
结果与分析 | 第40-62页 |
1 Bt X022新菌株的分类鉴定 | 第40-42页 |
1.1 菌体形态特征 | 第40页 |
1.2 16S rRNA基因测序 | 第40-41页 |
1.3 系统发育树的构建及分类地位 | 第41-42页 |
2 Bt X022新菌株培养条件的优化 | 第42-45页 |
2.1 不同通氧量对Bt X022新菌株毒蛋白产量的影响 | 第42-43页 |
2.2 不同的初始pH对Bt X022新菌株毒蛋白产量的影响 | 第43-44页 |
2.3 Cu~(2+)对Bt X022新菌株毒蛋白产量的影响 | 第44-45页 |
2.4 Cu~(2+)对Bt X022新菌株杀虫毒力的影响 | 第45页 |
3 Cu~(2+)引起Bt X022新菌株发酵过程参数的改变 | 第45-47页 |
4 Bt X022新菌株芽胞释放期菌体全蛋白质组分析 | 第47-56页 |
4.1 两种培养基中蛋白数目比较分析 | 第47-48页 |
4.2 Bt X022新菌株杀虫晶体蛋白的质谱鉴定 | 第48-52页 |
4.3 蛋白的功能分类及比较分析 | 第52-56页 |
5 Bt X022新菌株芽胞释放期全蛋白的半定量比较分析 | 第56-59页 |
6 毒素蛋白及功能基因的RT-qPCR分析 | 第59-62页 |
讨论 | 第62-71页 |
1 Bt X022产生的ICPs主要为Cry1Ca、Cry1Ac和Cry1Da | 第62页 |
2 Cu~(2+)可提高Bt X022菌株毒蛋白产量 | 第62-63页 |
3 Cu~(2+)提高Bt X022菌株毒蛋白产量的机制探讨 | 第63-71页 |
3.1 Cu~(2+)对Bt X022菌株发酵参数的影响 | 第63-64页 |
3.2 Cu~(2+)对Bt X022菌株蛋白表达谱的影响 | 第64-71页 |
结论 | 第71-72页 |
工作展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-83页 |
课题受资助的基金项目 | 第83-84页 |
论文发表情况 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |