中文摘要 | 第11-13页 |
英文摘要 | 第13-14页 |
前言 | 第16-30页 |
1.1 禽用弱毒疫苗中外源病毒污染的现状 | 第16-20页 |
1.1.1 疫苗污染的现状 | 第16-17页 |
1.1.2 疫苗污染中出现外源病毒污染的原因 | 第17页 |
1.1.3 禽用疫苗中外源病毒污染的种类 | 第17-18页 |
1.1.4 活疫苗中禽网状内皮组织增生症病毒的污染 | 第18-19页 |
1.1.5 疫苗中外源病毒污染的危害 | 第19页 |
1.1.6 禽用活病毒疫苗中外源病毒的检测方法 | 第19-20页 |
1.2 禽网状内皮组织增生症的研究进展 | 第20-29页 |
1.2.1 禽网状内皮组织增生症病毒的发现与命名 | 第20页 |
1.2.2 病原学 | 第20-23页 |
1.2.2.1 REV的形态学结构和理化特性 | 第21页 |
1.2.2.2 REV的抗原性 | 第21页 |
1.2.2.3 基因组 | 第21-22页 |
1.2.2.4 蛋白质 | 第22页 |
1.2.2.5 REV的生活周期 | 第22-23页 |
1.2.3 REV的流行病学 | 第23-26页 |
1.2.3.1 自然宿主和实验宿主 | 第23页 |
1.2.3.2 细胞培养 | 第23-24页 |
1.2.3.3 流行现状 | 第24-25页 |
1.2.3.4 REV的传播 | 第25-26页 |
1.2.4 REV的致病机制 | 第26-27页 |
1.2.5 鸡感染后的免疫反应 | 第27页 |
1.2.6 临诊症状及病理变化 | 第27-28页 |
1.2.7 诊断 | 第28页 |
1.2.7.1 病毒分离 | 第28页 |
1.2.7.2 实验室常用的诊断技术 | 第28页 |
1.2.7.3 与其他疾病的区别 | 第28页 |
1.2.8 REV的防治措施 | 第28-29页 |
1.3 研究的目的与意义 | 第29-30页 |
材料与方法 | 第30-40页 |
2.1 材料 | 第30-31页 |
2.1.1 毒株样品来源 | 第30页 |
2.1.2 细胞与血清 | 第30页 |
2.1.3 试验动物与饲养管理 | 第30页 |
2.1.4 主要仪器与主要试剂 | 第30-31页 |
2.1.5 主要试剂配制 | 第31页 |
2.2 常规试验操作方法 | 第31-40页 |
2.2.1 REV的分离与鉴定 | 第31-32页 |
2.2.1.1 REV的分离 | 第31页 |
2.2.1.2 REV的间接免疫荧光鉴定 | 第31-32页 |
2.2.2 REV的体外复制研究 | 第32页 |
2.2.2.1 REV的定量 | 第32页 |
2.2.2.2 REV的体外复制动态 | 第32页 |
2.2.3 REV的全基因组扩增、克隆和测序 | 第32-35页 |
2.2.3.1 前病毒DNA提取 | 第32-33页 |
2.2.3.2 引物设计与合成 | 第33页 |
2.2.3.3 前病毒全基因组序列的扩增 | 第33-34页 |
2.2.3.4 扩增产物的凝胶纯化 | 第34页 |
2.2.3.5 回收产物与载体的连接 | 第34页 |
2.2.3.6 感受态细胞DH5α的制备 | 第34-35页 |
2.2.3.7 连接产物的转化及序列测定 | 第35页 |
2.2.4 序列测定与全基因组序列分析 | 第35-36页 |
2.2.5 不同剂量REV对1日龄SPF鸡的致病性 | 第36-40页 |
2.2.5.1 试验设计 | 第36-37页 |
2.2.5.2 感染后鸡只状态观察 | 第37页 |
2.2.5.3 体重及免疫器官指数的测定 | 第37页 |
2.2.5.4 NDV疫苗和AIV-H9疫苗抗体水平的测定 | 第37-38页 |
2.2.5.5 REV病原学检测 | 第38-39页 |
2.2.5.6 REV血清抗体的检测 | 第39-40页 |
结果与分析 | 第40-54页 |
3.1 IBDV疫苗毒种中REV的分离、鉴定与定量 | 第40-41页 |
3.1.1 IFA检测结果 | 第40-41页 |
3.1.2 分离病毒的体外复制研究 | 第41页 |
3.1.2.1 REV的毒力测定 | 第41页 |
3.1.2.2 复制动力学研究 | 第41页 |
3.2 REV的全基因组序列分析 | 第41-47页 |
3.2.1 全基因组扩增 | 第41-42页 |
3.2.2 病毒基因组核苷酸序列分析 | 第42-44页 |
3.2.2.1 病毒全基因组序列分析 | 第42-43页 |
3.2.2.2 病毒基因组分段比较 | 第43-44页 |
3.2.3 氨基酸序列分析 | 第44-45页 |
3.2.4 遗传进化分析 | 第45-47页 |
3.2.4.1 全基因组遗传进化分析 | 第45-46页 |
3.2.4.2 病毒基因组各部分遗传进化分析 | 第46-47页 |
3.3 REV分离株IBD-C1605株的致病性研究 | 第47-54页 |
3.3.1 鸡群总体状态 | 第47-48页 |
3.3.2 IBD-C1605株对SPF鸡体重的影响 | 第48页 |
3.3.3 IBD-C1605株对NDV和H9疫苗的抗体抑制作用 | 第48-50页 |
3.3.4 IBD-C1605株对免疫器官指数的影响 | 第50-51页 |
3.3.5 REV病原学检测 | 第51-52页 |
3.3.6 REV抗体阳性率分析 | 第52-54页 |
讨论 | 第54-57页 |
4.1 疫苗毒种中REV分离株的基因组序列分析 | 第54-55页 |
4.2 疫苗毒种中REV分离株对SPF鸡的致病性影响 | 第55-57页 |
结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第68-69页 |