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IBDV疫苗毒种中REV的分离鉴定及对SPF雏鸡的致病性研究

中文摘要第11-13页
英文摘要第13-14页
前言第16-30页
    1.1 禽用弱毒疫苗中外源病毒污染的现状第16-20页
        1.1.1 疫苗污染的现状第16-17页
        1.1.2 疫苗污染中出现外源病毒污染的原因第17页
        1.1.3 禽用疫苗中外源病毒污染的种类第17-18页
        1.1.4 活疫苗中禽网状内皮组织增生症病毒的污染第18-19页
        1.1.5 疫苗中外源病毒污染的危害第19页
        1.1.6 禽用活病毒疫苗中外源病毒的检测方法第19-20页
    1.2 禽网状内皮组织增生症的研究进展第20-29页
        1.2.1 禽网状内皮组织增生症病毒的发现与命名第20页
        1.2.2 病原学第20-23页
            1.2.2.1 REV的形态学结构和理化特性第21页
            1.2.2.2 REV的抗原性第21页
            1.2.2.3 基因组第21-22页
            1.2.2.4 蛋白质第22页
            1.2.2.5 REV的生活周期第22-23页
        1.2.3 REV的流行病学第23-26页
            1.2.3.1 自然宿主和实验宿主第23页
            1.2.3.2 细胞培养第23-24页
            1.2.3.3 流行现状第24-25页
            1.2.3.4 REV的传播第25-26页
        1.2.4 REV的致病机制第26-27页
        1.2.5 鸡感染后的免疫反应第27页
        1.2.6 临诊症状及病理变化第27-28页
        1.2.7 诊断第28页
            1.2.7.1 病毒分离第28页
            1.2.7.2 实验室常用的诊断技术第28页
            1.2.7.3 与其他疾病的区别第28页
        1.2.8 REV的防治措施第28-29页
    1.3 研究的目的与意义第29-30页
材料与方法第30-40页
    2.1 材料第30-31页
        2.1.1 毒株样品来源第30页
        2.1.2 细胞与血清第30页
        2.1.3 试验动物与饲养管理第30页
        2.1.4 主要仪器与主要试剂第30-31页
        2.1.5 主要试剂配制第31页
    2.2 常规试验操作方法第31-40页
        2.2.1 REV的分离与鉴定第31-32页
            2.2.1.1 REV的分离第31页
            2.2.1.2 REV的间接免疫荧光鉴定第31-32页
        2.2.2 REV的体外复制研究第32页
            2.2.2.1 REV的定量第32页
            2.2.2.2 REV的体外复制动态第32页
        2.2.3 REV的全基因组扩增、克隆和测序第32-35页
            2.2.3.1 前病毒DNA提取第32-33页
            2.2.3.2 引物设计与合成第33页
            2.2.3.3 前病毒全基因组序列的扩增第33-34页
            2.2.3.4 扩增产物的凝胶纯化第34页
            2.2.3.5 回收产物与载体的连接第34页
            2.2.3.6 感受态细胞DH5α的制备第34-35页
            2.2.3.7 连接产物的转化及序列测定第35页
        2.2.4 序列测定与全基因组序列分析第35-36页
        2.2.5 不同剂量REV对1日龄SPF鸡的致病性第36-40页
            2.2.5.1 试验设计第36-37页
            2.2.5.2 感染后鸡只状态观察第37页
            2.2.5.3 体重及免疫器官指数的测定第37页
            2.2.5.4 NDV疫苗和AIV-H9疫苗抗体水平的测定第37-38页
            2.2.5.5 REV病原学检测第38-39页
            2.2.5.6 REV血清抗体的检测第39-40页
结果与分析第40-54页
    3.1 IBDV疫苗毒种中REV的分离、鉴定与定量第40-41页
        3.1.1 IFA检测结果第40-41页
        3.1.2 分离病毒的体外复制研究第41页
            3.1.2.1 REV的毒力测定第41页
            3.1.2.2 复制动力学研究第41页
    3.2 REV的全基因组序列分析第41-47页
        3.2.1 全基因组扩增第41-42页
        3.2.2 病毒基因组核苷酸序列分析第42-44页
            3.2.2.1 病毒全基因组序列分析第42-43页
            3.2.2.2 病毒基因组分段比较第43-44页
        3.2.3 氨基酸序列分析第44-45页
        3.2.4 遗传进化分析第45-47页
            3.2.4.1 全基因组遗传进化分析第45-46页
            3.2.4.2 病毒基因组各部分遗传进化分析第46-47页
    3.3 REV分离株IBD-C1605株的致病性研究第47-54页
        3.3.1 鸡群总体状态第47-48页
        3.3.2 IBD-C1605株对SPF鸡体重的影响第48页
        3.3.3 IBD-C1605株对NDV和H9疫苗的抗体抑制作用第48-50页
        3.3.4 IBD-C1605株对免疫器官指数的影响第50-51页
        3.3.5 REV病原学检测第51-52页
        3.3.6 REV抗体阳性率分析第52-54页
讨论第54-57页
    4.1 疫苗毒种中REV分离株的基因组序列分析第54-55页
    4.2 疫苗毒种中REV分离株对SPF鸡的致病性影响第55-57页
结论第57-58页
参考文献第58-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间发表论文情况第68-69页

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