| 中文摘要 | 第4-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 一 引言 | 第10-16页 |
| 1.Warburg效应 | 第10-11页 |
| 2.M2型丙酮酸激酶(PKM2) | 第11-13页 |
| 2.1 PKM2的功能及调节 | 第11-12页 |
| 2.2 PKM2的蛋白质翻译后修饰 | 第12-13页 |
| 3.O-GlcNAc修饰 | 第13-14页 |
| 3.1 O-GlcNAc修饰的酶 | 第13页 |
| 3.2 O-GlcNAc修饰的供体 | 第13-14页 |
| 4.立题依据与研究思路 | 第14-16页 |
| 二 材料和方法 | 第16-28页 |
| 1.实验试剂 | 第16-17页 |
| 1.1 抗体 | 第16页 |
| 1.2 其它主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.实验材料 | 第17页 |
| 2.1 细胞株及菌株 | 第17页 |
| 2.2 真核表达载体 | 第17页 |
| 3.实验仪器 | 第17-18页 |
| 4.实验方法 | 第18-28页 |
| 4.1 细胞培养 | 第18页 |
| 4.2 构建质粒 | 第18-23页 |
| 4.3 瞬时转染 | 第23页 |
| 4.4 免疫印迹法(WB) | 第23-24页 |
| 4.5 丙酮酸激酶活性的检测 | 第24-25页 |
| 4.6 提取细胞浆蛋白和核蛋白 | 第25页 |
| 4.7 戊二醛交联试验 | 第25页 |
| 4.8 蛋白质的免疫沉淀试验(IP) | 第25-26页 |
| 4.9 葡萄糖含量检测 | 第26页 |
| 4.10 乳酸含量检测 | 第26-28页 |
| 三 实验结果 | 第28-36页 |
| 1.OGT真核表达质粒的构建 | 第28-29页 |
| 2.OGT过表达可上调PKM2T405/S406的O-GlcNAc修饰 | 第29-30页 |
| 3.T405/S406的O-GlcNAc修饰促进PKM2四聚体解聚 | 第30-31页 |
| 4.T405/S406的O-GlcNAc修饰降低PKM2酶活性 | 第31-32页 |
| 5.T405/S406的O-GlcNAc修饰促进PKM2核易位 | 第32-33页 |
| 6.T405/S406的O-GlcNAc修饰增强PKM2非代谢酶功能 | 第33-34页 |
| 7.T405/S406的O-GlcNAc修饰促进Warburg效应 | 第34-36页 |
| 四 讨论 | 第36-37页 |
| 1.T405/S406的O-GlcNAc修饰促进PKM2四聚体解聚的可能机制 | 第36页 |
| 2.T405/S406的O-GlcNAc修饰促进PKM2核易位的可能机制 | 第36-37页 |
| 五 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 致谢 | 第43页 |
