摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
中英文对照及英文缩写表 | 第6-10页 |
第一章 前言 | 第10-28页 |
1.1 半乳凝素家族(Galectins)概述 | 第10-19页 |
1.1.1 凝集素 | 第10页 |
1.1.2 半乳凝素的结构与分类 | 第10-12页 |
1.1.3 半乳凝素的表达与分布情况 | 第12-16页 |
1.1.4 半乳凝素的配体及生物学功能 | 第16-19页 |
1.2 半乳凝素与肿瘤和免疫逃逸 | 第19-24页 |
1.2.1 半乳凝素与肿瘤发生 | 第19-20页 |
1.2.2 半乳凝素与肿瘤细胞的转移 | 第20-22页 |
1.2.3 半乳凝素与免疫逃逸 | 第22-24页 |
1.3 半乳凝素诱导T细胞凋亡的研究进展 | 第24-27页 |
1.3.1 caspase依赖的细胞凋亡途径 | 第24-25页 |
1.3.2 半乳凝素诱导T细胞凋亡的分子机制 | 第25-27页 |
1.4 选题依据、研究内容、目的及意义 | 第27-28页 |
第二章 半乳凝素蛋白的制备 | 第28-38页 |
2.1 材料、试剂与仪器 | 第28-33页 |
2.1.1 实验材料 | 第28页 |
2.1.2 实验试剂及来源 | 第28-29页 |
2.1.3 实验试剂配制 | 第29-32页 |
2.1.4 实验仪器 | 第32-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-36页 |
2.2.1 制备感受态E.coli | 第33页 |
2.2.2 质粒提取 | 第33-34页 |
2.2.3 转化接菌 | 第34页 |
2.2.4 扩大培养与诱导表达 | 第34页 |
2.2.5 收集目的蛋白 | 第34-35页 |
2.2.6 亲和层析纯化目的蛋白 | 第35页 |
2.2.7 去除蛋白标签 | 第35页 |
2.2.8 考马斯亮蓝蛋白定量法 | 第35-36页 |
2.2.9 SDS-PAGE检测目的蛋白 | 第36页 |
2.3 实验结果 | 第36-37页 |
2.4 小结 | 第37-38页 |
第三章 不同半乳凝素诱导的T细胞凋亡作用 | 第38-51页 |
3.1 材料、试剂与仪器 | 第38-41页 |
3.1.1 实验材料 | 第38页 |
3.1.2 实验试剂及来源 | 第38-39页 |
3.1.3 实验试剂配制 | 第39-41页 |
3.1.4 实验仪器 | 第41页 |
3.2 实验方法 | 第41-44页 |
3.2.1 细胞复苏、培养与冻存 | 第41-42页 |
3.2.2 免疫蛋白印迹法检测细胞分泌蛋白 | 第42-43页 |
3.2.3 流式细胞术检测细胞凋亡(FITC-AnnexinV/PI双染法) | 第43-44页 |
3.3 实验结果 | 第44-50页 |
3.3.1 利用westernblot方法比较研究各种半乳凝素诱导JurkatT细胞的凋亡 | 第44-45页 |
3.3.2 利用流式细胞术比较研究Gal-1、Gal-3、Gal-7、Gal-8诱导的JurkatT细胞凋亡 | 第45-47页 |
3.3.3 不同时间Gal-1、Gal-3、Gal-7、Gal-8诱导JurkatT细胞凋亡比较 | 第47-48页 |
3.3.4 Gal-3和Gal-8能够诱导CEMT细胞凋亡 | 第48-50页 |
3.4 小结 | 第50-51页 |
第四章 Gal-1、Gal-3、Gal-7、Gal-8诱导T细胞凋亡的机制 | 第51-65页 |
4.1 材料、试剂与仪器 | 第51页 |
4.1.1 实验材料 | 第51页 |
4.1.2 实验试剂及配制 | 第51页 |
4.1.3 实验仪器 | 第51页 |
4.2 实验方法 | 第51-52页 |
4.2.1 细胞复苏、培养与冻存 | 第51页 |
4.2.2 抑制剂抑制相应分子的表达 | 第51页 |
4.2.3 WesternBlotting检测凋亡因子以及ERK、PKC变化 | 第51-52页 |
4.2.4 流式细胞术检测细胞内ROS总水平 | 第52页 |
4.3 实验结果 | 第52-63页 |
4.3.1 Gal-1、Gal-3、Gal-7、Gal-8通过活化ERK诱导T细胞凋亡 | 第52-55页 |
4.3.2 Gal-1、Gal-3、Gal-7和Gal-8通过活化ROS-ERK诱导JurkatT细胞凋亡 | 第55-59页 |
4.3.3 Gal-1、Gal-3、Gal-7、Gal-8均通过活化PKC分子诱导JurkatT细胞凋亡 | 第59-61页 |
4.3.4 Gal-3和Gal-8诱导CEMT细胞凋亡的信号通路 | 第61-63页 |
4.4 小结 | 第63-65页 |
论文总结 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
在读期间发表论文及著作情况 | 第80页 |