| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第11-20页 |
| 1 MiRNA的发现及生物合成 | 第11-12页 |
| 2 MiRNA的表达特征 | 第12-13页 |
| 3 MiRNA参与的生物学过程 | 第13-15页 |
| 4 miRNA的研究方法 | 第15-17页 |
| 5 鱼类miRNA的研究现状 | 第17-18页 |
| 6 暗纹东方鲀 | 第18-20页 |
| 第二章 暗纹东方纯胚胎囊胚期和体节期miRNA转录组研究 | 第20-41页 |
| 1 实验试剂及主要仪器 | 第20-21页 |
| 2 实验材料和方法 | 第21-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.2 总RNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.3 RNA的浓度及质量检测 | 第22页 |
| 2.4 测序文库的构建 | 第22-23页 |
| 2.5 序列测定 | 第23页 |
| 2.6 测序结果的数据处理 | 第23-25页 |
| 3 实验结果 | 第25-37页 |
| 3.1 总RNA琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| 3.2 总RNA浓度及OD比值检测结果 | 第25-26页 |
| 3.3 安捷伦2100检测结果 | 第26页 |
| 3.4 测序结果 | 第26-29页 |
| 3.5 已知miRNA的分析 | 第29-30页 |
| 3.6 新miRNA的分析 | 第30-32页 |
| 3.7 miRNA表达及差异分析 | 第32-34页 |
| 3.8 miRNA靶基因预测以及功能富集分析 | 第34-37页 |
| 本章小节 | 第37-41页 |
| 第三章 差异表达的miRNAs在暗纹东方鲀不同胚胎发育时相中的表达研究 | 第41-54页 |
| 1 实验试剂以及主要仪器 | 第41-42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第42页 |
| 2.2.2 RNA质量检测 | 第42页 |
| 2.2.3 cDNA文库的构建 | 第42页 |
| 2.2.4 基因组DNA提取 | 第42页 |
| 2.2.5 凝胶中DNA片段的回收 | 第42-43页 |
| 2.2.6 连接反应及大肠杆菌转化 | 第43页 |
| 2.2.7 RT-PCR反应条件 | 第43-44页 |
| 2.2.8 QRT-PCR反应条件 | 第44页 |
| 2.2.9 引物列表 | 第44-45页 |
| 2.2.10 靶基因预测 | 第45页 |
| 3 实验结果及讨论 | 第45-53页 |
| 3.1 总RNA质量检测 | 第45-46页 |
| 3.2 内参基因的筛选 | 第46-47页 |
| 3.2.1 候选内参引物PCR凝胶电泳检测 | 第46-47页 |
| 3.2.2 通过RT-PCR检测内参的溶解曲线 | 第47页 |
| 3.3 内参标准曲线 | 第47-48页 |
| 3.4 所选miRNAs的表达时序及表达量 | 第48-51页 |
| 3.5 靶基因的预测及分析 | 第51-53页 |
| 本章小结 | 第53-54页 |
| 全文总结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 个人简介 | 第61-62页 |
| 已发表论文 | 第62页 |