中文摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
第一章 绪论 | 第7-21页 |
1.1 前言 | 第7-8页 |
1.2 肝细胞生长因子及受体研究 | 第8-9页 |
1.2.1 肝细胞生长因子的来源 | 第8页 |
1.2.2 HGF和HGF受体的结构与性质 | 第8-9页 |
1.3 HGF对毛囊的作用及可能机制 | 第9-12页 |
1.3.1 毛囊 | 第9-10页 |
1.3.2 毛乳头和毛囊干细胞 | 第10页 |
1.3.3 HGF调节毛发生长的可能机制 | 第10-12页 |
1.4 基因治疗 | 第12-17页 |
1.4.1 基因治疗概述 | 第12-13页 |
1.4.2 基因治疗途径 | 第13页 |
1.4.3 基因治疗载体 | 第13-17页 |
1.4.4 基因治疗应用 | 第17页 |
1.5 人的皮肤成纤维细胞治疗模型 | 第17-19页 |
1.5.5 人的皮肤成纤维细胞 | 第17-18页 |
1.5.6 绿色荧光蛋白 | 第18-19页 |
1.6 本课题的研究目的及研究方案 | 第19-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-39页 |
2.1 实验材料 | 第21-26页 |
2.1.1 菌株 | 第21页 |
2.1.2 质粒 | 第21页 |
2.1.3 细胞系 | 第21-22页 |
2.1.4 工具酶和试剂盒 | 第22页 |
2.1.5 常用试剂 | 第22-24页 |
2.1.6 主要实验器材 | 第24页 |
2.1.7 溶液配制 | 第24-26页 |
2.2 方法 | 第26-39页 |
2.2.1 克隆HGF的全长基因 | 第26-29页 |
2.2.2 真核表达载体pEGFP-N1-HGF的构建 | 第29-32页 |
2.2.3 重组脂质体转染皮肤成纤维细胞 | 第32-34页 |
2.2.4 转染表达蛋白的鉴定 | 第34-39页 |
第三章 结果与讨论 | 第39-52页 |
3.1 HGF的克隆 | 第39-41页 |
3.2 真核表达载体的构建 | 第41-42页 |
3.3 脂质体转染皮肤成纤维细胞 | 第42-48页 |
3.3.1 皮肤成纤维细胞的培养 | 第42-43页 |
3.3.2 重组质粒转染到皮肤成纤维细胞 | 第43-48页 |
3.4 转染皮肤成纤维表达HGF的鉴定 | 第48-52页 |
3.4.1 Western Blotting鉴定HGF的表达 | 第48-49页 |
3.4.2 RT-PCR检测重组质粒中HGF的基因表达 | 第49-50页 |
3.4.3 ELISA 检测重组质粒中 HGF 蛋白的检测 | 第50-52页 |
第四章 结论与展望 | 第52-53页 |
4.1 结论 | 第52页 |
4.2 展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
发表论文和科研情况说明 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |