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肝细胞生长因子质粒的建立及其在成纤维细胞的表达与鉴定

中文摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
第一章 绪论第7-21页
    1.1 前言第7-8页
    1.2 肝细胞生长因子及受体研究第8-9页
        1.2.1 肝细胞生长因子的来源第8页
        1.2.2 HGF和HGF受体的结构与性质第8-9页
    1.3 HGF对毛囊的作用及可能机制第9-12页
        1.3.1 毛囊第9-10页
        1.3.2 毛乳头和毛囊干细胞第10页
        1.3.3 HGF调节毛发生长的可能机制第10-12页
    1.4 基因治疗第12-17页
        1.4.1 基因治疗概述第12-13页
        1.4.2 基因治疗途径第13页
        1.4.3 基因治疗载体第13-17页
        1.4.4 基因治疗应用第17页
    1.5 人的皮肤成纤维细胞治疗模型第17-19页
        1.5.5 人的皮肤成纤维细胞第17-18页
        1.5.6 绿色荧光蛋白第18-19页
    1.6 本课题的研究目的及研究方案第19-21页
第二章 材料与方法第21-39页
    2.1 实验材料第21-26页
        2.1.1 菌株第21页
        2.1.2 质粒第21页
        2.1.3 细胞系第21-22页
        2.1.4 工具酶和试剂盒第22页
        2.1.5 常用试剂第22-24页
        2.1.6 主要实验器材第24页
        2.1.7 溶液配制第24-26页
    2.2 方法第26-39页
        2.2.1 克隆HGF的全长基因第26-29页
        2.2.2 真核表达载体pEGFP-N1-HGF的构建第29-32页
        2.2.3 重组脂质体转染皮肤成纤维细胞第32-34页
        2.2.4 转染表达蛋白的鉴定第34-39页
第三章 结果与讨论第39-52页
    3.1 HGF的克隆第39-41页
    3.2 真核表达载体的构建第41-42页
    3.3 脂质体转染皮肤成纤维细胞第42-48页
        3.3.1 皮肤成纤维细胞的培养第42-43页
        3.3.2 重组质粒转染到皮肤成纤维细胞第43-48页
    3.4 转染皮肤成纤维表达HGF的鉴定第48-52页
        3.4.1 Western Blotting鉴定HGF的表达第48-49页
        3.4.2 RT-PCR检测重组质粒中HGF的基因表达第49-50页
        3.4.3 ELISA 检测重组质粒中 HGF 蛋白的检测第50-52页
第四章 结论与展望第52-53页
    4.1 结论第52页
    4.2 展望第52-53页
参考文献第53-59页
发表论文和科研情况说明第59-60页
致谢第60页

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