摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
英文缩略语索引 | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-34页 |
1.1 玉米弯孢霉叶斑病发生与危害 | 第13-14页 |
1.2 病害爆发原因与潜在威胁 | 第14-15页 |
1.3 玉米弯孢霉叶斑病菌致病机理 | 第15-18页 |
1.3.1 细胞壁降解酶 | 第15-16页 |
1.3.2 黑色素 | 第16页 |
1.3.3 毒素 | 第16-18页 |
1.4 其他玉米叶斑病菌的研究进展 | 第18-22页 |
1.4.1 生理生化水平 | 第18-20页 |
1.4.2 基因水平研究 | 第20-22页 |
1.5 植物病原菌致病基因克隆的几种主要方法[56,57] | 第22-26页 |
1.5.1 同源克隆 | 第22-23页 |
1.5.2 突变体方法 | 第23-25页 |
1.5.3 基于表达序列标签( EST) 的基因克隆 | 第25页 |
1.5.4 mRNA 差别显示 | 第25-26页 |
1.6 展望 | 第26页 |
1.7 本论文研究意义及内容 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-34页 |
第二章 玉米弯孢霉叶斑病菌突变株构建 | 第34-47页 |
2.1 材料与方法 | 第34-39页 |
2.1.1 供试菌株和质粒 | 第34-35页 |
2.1.2 主要培养基配制 | 第35页 |
2.1.3 主要试剂配制 | 第35-37页 |
2.1.4 萌发分生孢子的制备 | 第37页 |
2.1.5 载体的准备 | 第37-38页 |
2.1.6 转化 | 第38页 |
2.1.7 转化体系的优化 | 第38-39页 |
2.2 结果与分析 | 第39-43页 |
2.2.1 质粒pBHt1 的转化 | 第39-40页 |
2.2.2 ATMT 转化 | 第40页 |
2.2.3 孢子萌发时间对转化率的影响 | 第40页 |
2.2.4 农杆菌菌株对转化率的影响 | 第40-41页 |
2.2.5 共培养条件对转化率的影响 | 第41-42页 |
2.2.6 转化子插入位点验证 | 第42-43页 |
2.3 结论与讨论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-47页 |
第三章 突变株筛选与致病性相关性状测定 | 第47-64页 |
3.1 材料与方法 | 第47-51页 |
3.1.1 供试菌株 | 第47页 |
3.1.2 供试寄主 | 第47页 |
3.1.3 主要培养基配制 | 第47-48页 |
3.1.4 主要试剂配制 | 第48页 |
3.1.5 初步筛选 | 第48页 |
3.1.6 菌落形态及生长速度测定 | 第48页 |
3.1.7 产孢量测定 | 第48页 |
3.1.8 细胞壁降解酶活性测定 | 第48-49页 |
3.1.9 色素和毒素的变化 | 第49-50页 |
3.1.10 致病性测定 | 第50页 |
3.1.11 致病相关基因表达分析 | 第50-51页 |
3.2 结果与分析 | 第51-60页 |
3.2.1 突变株库初步筛选 | 第51-52页 |
3.2.2 菌落形态及生长速度 | 第52-53页 |
3.2.3 产孢量 | 第53-54页 |
3.2.4 细胞壁降解酶活性 | 第54-55页 |
3.2.5 代谢产物的变化 | 第55-56页 |
3.2.6 致病性测定 | 第56-59页 |
3.2.7 突变株致病相关基因表达 | 第59-60页 |
3.3 结论与讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-64页 |
第四章 突变株CLM-1648 基因克隆及生物学性状观察 | 第64-81页 |
4.1 材料与方法 | 第64-68页 |
4.1.1 供试菌株和质粒 | 第64页 |
4.1.2 供试寄主 | 第64页 |
4.1.3 主要培养基配制 | 第64页 |
4.1.4 主要试剂配制 | 第64页 |
4.1.5 CLM-1648 生物学性状观察 | 第64-65页 |
4.1.6 致病性测定 | 第65页 |
4.1.7 T-DNA 插入突变验证 | 第65-66页 |
4.1.8 Southern Blot | 第66页 |
4.1.9 Genome Walking | 第66-68页 |
4.1.10 基因拷贝数分析 | 第68页 |
4.1.11 基因表达量分析 | 第68页 |
4.2 结果与分析 | 第68-78页 |
4.2.1 CLM-1648 生物学性状 | 第68-73页 |
4.2.2 T-DNA 插入的PCR 检测结果 | 第73页 |
4.2.3 T-DNA 插入拷贝数 | 第73-74页 |
4.2.4 T-DNA 插入位点序列克隆 | 第74页 |
4.2.5 T-DNA 区域插入两端序列的分析 | 第74-75页 |
4.2.6 基因结构 | 第75-77页 |
4.2.7 基因拷贝数 | 第77页 |
4.2.8 基因表达量 | 第77-78页 |
4.3 结论与讨论 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-81页 |
第五章 总结与展望 | 第81-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第84-87页 |
上海交通大学学位论文答辩决议书 | 第87页 |