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拟南芥复制因子C生物学功能的研究

摘要第9-12页
Abstract第12-14页
第一章 前言第15-34页
    1.1 拟南芥雌雄配子体发育的研究进展第15-18页
        1.1.1 拟南芥雄配子体发育研究进展第15-18页
        1.1.2 拟南芥雌配子体发育研究进展第18页
    1.2 被子植物胚胎发育过程第18-20页
    1.3 真核生物减数分裂的研究进展第20-28页
        1.3.1 减数分裂过程中DSB的形成第20-22页
        1.3.2 DSB的加工第22页
        1.3.3 双链交换:RecA类蛋白的作用第22-24页
        1.3.4 重组中间体的形成第24-28页
    1.4 复制因子C的研究进展第28-33页
    1.5 本研究的目的和意义第33-34页
第二章 复制因子C的生物信息学分析第34-40页
    2.1 材料与方法第34-35页
        2.1.1 RFC序列比对第34页
        2.1.2 AtRFC1同源模建第34-35页
        2.1.3 AtRFC1启动子分析第35页
    2.2 结果第35-38页
        2.2.1 AtRFC1/2/3/4/5蛋白序列比对第35-37页
        2.2.2 AtRFC1蛋白质N端三维结构的同源模建第37页
        2.2.3 AtRFC1启动子元件分析第37-38页
    2.3 讨论第38-40页
第三章 拟南芥AtRFC1生物学功能的研究第40-71页
    3.1. 材料与方法第41-48页
        3.1.1 材料获得与种植第41页
        3.1.2 突变体基因组鉴定第41页
        3.1.3 突变体转录水平鉴定第41-43页
        3.1.4 角果和花的外形观察与统计第43页
        3.1.5 亚历山大(Alexander).染色方法第43页
        3.1.6 花药透明技术第43页
        3.1.7 突变体与qrt植株杂交技术第43-44页
        3.1.8 半薄切片方法第44页
        3.1.9 激光共聚焦扫描胚囊结构第44页
        3.1.10 花粉细胞核的DAPI染色第44页
        3.1.11 染色体形态观察第44-45页
        3.1.12 Western-blot技术第45-46页
        3.1.13 免疫荧光技术第46页
        3.1.14 荧光原位杂交技术第46-47页
        3.1.15 mRNA原位杂交第47-48页
        3.1.16 双突变体的获得与鉴定第48页
        3.1.17 突变体回复载体构建与转基因技术第48页
    3.2 结果第48-66页
        3.2.1 突变体rfc1-2的纯杂合鉴定第48-50页
        3.2.2 突变体rfc1-2的表型分析第50-51页
        3.2.3 突变体rfc1-2的回复株系鉴定与分析第51-52页
        3.2.4 突变体rfc1-2雌雄配子体发育的表型分析第52-54页
        3.2.5 突变体rfc1-2花粉减数分裂的特点第54-56页
        3.2.6 rfc1-1突变体花粉减数分裂的特点第56-57页
        3.2.7 突变体rfc1-2细胞有丝分裂的特点第57-58页
        3.2.8 AtRFC1基因与其编码蛋白的表达分析第58-59页
        3.2.9 AtRFC1定位依赖于DSBs的形成和修复第59-60页
        3.2.10 AtRFC1基因参与减数分裂DNA修复第60页
        3.2.11 AtRFC1基因与AtSPO11-1和AtRAD51基因间的上下游关系第60-64页
        3.2.12 突变体Atrfc1-2减数分裂染色体异常表型不依赖于AtMLH3基因第64-65页
        3.2.13 突变体rfc1-2中相关基因的表达第65-66页
    3.3 讨论第66-69页
        3.3.1 AtRFC1基因参与减数分裂的过程第66-67页
        3.3.2 AtRFC1经AtRAD51介导的同源重组来修复AtSP011-1产生的DSBs第67-69页
    3.4 本章小结第69-71页
第四章 拟南芥AtRFC2/3/4/5突变体表型及功能的初步分析第71-85页
    4.1 材料与方法第71-74页
        4.1.1 突变体获得与鉴定第71页
        4.1.2 突变体抗性筛选第71-72页
        4.1.3 胚珠透明技术第72页
        4.1.4 胚乳marker杂交技术第72页
        4.1.5 载体构建与转基因技术第72-73页
        4.1.6 GUS染色方法第73页
        4.1.7 酵母双杂交技术第73-74页
        4.1.8 DNA复制抑制剂的处理第74页
    4.2 结果第74-83页
        4.2.1 AtRFC2/3/4/5突变体的鉴定与分析第74-76页
        4.2.2 AtRFC4突变体败育的表型分析第76-79页
        4.2.4 AtRFC2/3/4/5基因的表达模式第79-81页
        4.2.5 AtRFC1/2/3/4/5蛋白间的相互作用第81-82页
        4.2.6 AtRFC基因对DNA复制抑制剂处理的应答第82-83页
    4.3 讨论第83-85页
第五章 总讨论第85-87页
附表第87-89页
参考文献第89-100页
图版及说明第100-120页
发表和待发表的论文第120-121页
致谢第121页

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