| 摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 1. 文献综述 | 第16-51页 |
| 1.1 二穗短柄草概况 | 第16-26页 |
| 1.1.1 二穗短柄草在禾本科中的进化位置 | 第16-18页 |
| 1.1.2 生长分布状况及种质资源信息 | 第18-20页 |
| 1.1.3 细胞学特点和遗传多样性 | 第20-22页 |
| 1.1.4 遗传转化研究进展 | 第22-25页 |
| 1.1.5 具备理想模式植物的优点 | 第25-26页 |
| 1.2 寒冻灾害及植物的抗寒性 | 第26-29页 |
| 1.2.1 寒冻灾害 | 第26-27页 |
| 1.2.2 冷驯化与植物抗寒性 | 第27-29页 |
| 1.3 植物抗寒冻机制研究 | 第29-38页 |
| 1.3.1 细胞识别和传递寒冷信号 | 第29页 |
| 1.3.2 不同层次的多基因相互作用 | 第29-34页 |
| 1.3.3 多层次上的细胞物质变化 | 第34-36页 |
| 1.3.4 植物细胞抗寒冻机制模式图 | 第36-38页 |
| 1.4 重要抗寒冻相关的基因家族 | 第38-47页 |
| 1.4.1 抑制冰晶再结晶蛋白基因家族IRIps | 第38-42页 |
| 1.4.2 C-重复序列转录结合因子基因家族CBFs | 第42-44页 |
| 1.4.3 果糖基转移酶基因家族FSTs和反转录酶基因家族INVs | 第44-47页 |
| 1.5 生物芯片技术(cDNA microarry) | 第47-48页 |
| 1.6 构建microRNA载体 | 第48-51页 |
| 2 本研究的目的意义 | 第51-52页 |
| 3. 材料和方法 | 第52-68页 |
| 3.1 实验材料 | 第52页 |
| 3.2 实验方法 | 第52-68页 |
| 3.2.1 二穗短柄草中的IRIps基因鉴定及分析 | 第52-55页 |
| 3.2.2 冷驯化和抗寒冻检测 | 第55-57页 |
| 3.2.3 冷驯化处理下BDIRIps基因的差异表达 | 第57-59页 |
| 3.2.4 BDIRIps基因的抗寒冻相关启动子元件分析 | 第59页 |
| 3.2.5 利用基因芯片技术检测抗寒相关基因 | 第59-60页 |
| 3.2.6 利用噬菌体文库筛选抗寒冻相关基因 | 第60页 |
| 3.2.7 抗寒冻相关基因家族的系统进化分析 | 第60-62页 |
| 3.2.8 冷驯化处理前后碳水化合物及果糖含量测定 | 第62-64页 |
| 3.2.9 Bradi5g27350基因miRNA载体和过表达载体构建 | 第64-66页 |
| 3.2.10 二穗短柄草的转基因研究 | 第66-68页 |
| 4. 结果和分析 | 第68-112页 |
| 4.1 二穗短柄草及其近缘材料中IRIps基因的遗传多样性分析 | 第68-75页 |
| 4.1.1 BDIRIps基因序列 | 第69-72页 |
| 4.1.2 扩增BDIRIps | 第72-75页 |
| 4.2 冷驯化处理前后BDirips基因的差异表达 | 第75-91页 |
| 4.2.1 RNA样品检测 | 第75-84页 |
| 4.2.2 qPCR标准曲线绘制 | 第84-87页 |
| 4.2.3 冷驯化处理前后BDIRIps基因的表达 | 第87-91页 |
| 4.3 抗寒冻相关基因BDIRIps的启动子元件分析 | 第91-92页 |
| 4.4 基因芯片检测抗寒冻相关基因的表达 | 第92-94页 |
| 4.4.1 IRIps基因的表达 | 第92页 |
| 4.4.2 CBFs基因的表达 | 第92-94页 |
| 4.4.3 FSTs基因的表达 | 第94页 |
| 4.5 利用噬菌体文库筛选CBFs亚族基因 | 第94页 |
| 4.6 抗寒冻相关基因的系统进化分析 | 第94-100页 |
| 4.6.1 IRIps系统进化分析 | 第94-95页 |
| 4.6.2 cbfs系统进化分析 | 第95页 |
| 4.6.3 FSTs系统进化分析 | 第95-100页 |
| 4.7 冷驯化处理前后碳水化合物和果糖的含量变化 | 第100-105页 |
| 4.7.1 冷驯化前后总碳水化合物和果糖含量动态分析 | 第100页 |
| 4.7.2 冷驯化前后果聚糖链长差异 | 第100-105页 |
| 4.8 载体构建及农杆菌侵染转化 | 第105-109页 |
| 4.8.1 mirna载体构建 | 第105-107页 |
| 4.8.2 过表达载体构建 | 第107页 |
| 4.8.3 遗传转化研究 | 第107-109页 |
| 4.9 冷驯化对不同基因型二穗短柄草抗寒性的影响 | 第109-110页 |
| 4.10 二穗短柄草的世界分布 | 第110-112页 |
| 5 讨论 | 第112-119页 |
| 5.1 二穗短柄草和早熟禾亚科中基因IRIps的对比分析 | 第112-113页 |
| 5.2 寒冷敏感型二穗短柄草Bd3-1的综合表现 | 第113页 |
| 5.3 早熟禾亚科中CBFs基因家族进化多样性及功能分析 | 第113-114页 |
| 5.4 二穗短柄草和早熟禾亚科应答低温胁迫的代谢物质差异分析 | 第114-116页 |
| 5.5 二穗短柄草作为早熟禾亚科研究模式植物的综合评估 | 第116-117页 |
| 5.6 后续研究方向 | 第117-119页 |
| 6 结论 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 附录1：分子生物学实验方法 | 第135-142页 |
| 附录2：硕博连读期间文章情况 | 第142页 |
